沈世缘 作品数:17 被引量:20 H指数:3 供职机构: 上海市农业科学院 更多>> 发文基金: 上海市农科院青年科技发展基金 上海市科技兴农重点攻关项目 上海市重大科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
重组猪α干扰素的亲和层析 被引量:1 2007年 真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得到较为单一的目的蛋白组分,而在pH8.2,NaCl0mmol/L的情况下得到的目的蛋白更纯,且非特异性吸附也较少。 邵菁 于瑞嵩 董世娟 朱于敏 沈世缘 曹祥荣 李震重组猪α干扰素抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞增殖的初步研究 被引量:4 2010年 采用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)/Marc-145细胞体系验证重组猪α干扰素(rPoIFN-α)制剂的抑制病毒作用。结果表明:rPoIFN-α稀释至10^(10)可有效预防PRRSV感染Marc-145细胞;当rPoIFN-α稀释至10~8可有效抑制病毒在Marc-145细胞上的增殖。研究结果在细胞水平上明确了rPoIFN-α对PRRSV的抑制作用,为进一步将rPoIFN-α应用于动物试验提供了参考。 刘小宝 董世娟 李福宝 朱于敏 于瑞嵩 沈世缘 李震关键词:重组猪Α干扰素 猪繁殖与呼吸综合征病毒 包含体表达基因工程牛生长激素提取、变复性及纯化的研究 被引量:1 2009年 为了取得较好的复性效果,对重组牛生长激素的纯化及变复性条件进行了研究。结果表明:发酵菌体高压匀浆破碎、离心得到的包含体在7.5 mol/L尿素中变性24 h后,以100 mmol/L Tris.HCl pH10.0稀释至尿素浓度4.5 mol/L,4℃复性48 h,对20 mmol/LTris.HCl pH9.0透析除盐可以成功对重组牛生长激素复性;采用截留分子量100 kD、5 kD超滤膜对复性重组牛生长激素浓缩,FPLC纯化后可得到高纯度的目标蛋白。 于瑞嵩 沈世缘 董世娟 朱于敏 李震关键词:牛生长激素 纯化 复性 微囊化工艺和相关辅料对蛋白类药物稳定性的影响 2009年 蛋白类药物微球的制备工艺可显著影响其结构功能(生物活性)的稳定性。本研究考察了微囊化过程中不同工艺、辅料、有机溶媒等因素对重组牛生长激素稳定性的影响,为优化重组牛生长激素微球注射剂工艺提供依据。 肖莉莉 陈庆华 李震 于瑞嵩 沈世缘关键词:稳定性 重组猪α干扰素对高、低致病性蓝耳病毒的抑制效果研究 本文评价了重组猪α干扰素(rPoIFN-α)在MARC-145细胞上和本体动物上分别抑制低致病性、高致病猪蓝耳病毒效果。长成单层的Marc-145细胞首先用不同稀释度的rPoIFN-α预处理,随着干扰素稀释度增大,对病毒... 董世娟 李震 尹艳博 沈世缘 郭妍妍 高敏捷 张婉华 朱于敏 于瑞嵩 史仲平基因工程牛生长激素高密度发酵表达的研究 被引量:3 2009年 通过对重组牛生长激素基因工程大肠杆菌摇瓶和5、30 L发酵罐发酵表达的研究,建立了基因工程牛生长激素的高密度发酵表达工艺,菌体密度最高可达到OD550=120,rbIL-2的表达量占菌体总蛋白的20%以上。 于瑞嵩 沈世缘 董世娟 朱于敏 李震关键词:牛生长激素 高密度发酵 大肠杆菌 经基因改造的小反刍兽疫N基因、其改造方法及化学合成 提供了一种改造的小反刍兽疫病毒N蛋白的编码核酸,其为SEQ ID NO:41的序列,以及其PCR扩增方法和用于该方法的试剂盒。 张国瑞 李震 雷志海 董世娟 朱玉敏 于瑞嵩 沈世缘 王茜 张西营 叶小飞基因工程重组牛白细胞介素-2的复性方法 本发明提供重组牛白介素-2的脲浓度梯度复性方法及用于该方法的试剂盒。利用该复性方法,复性液中重组牛白介素-2的复性率可达50%以上,活性测定效价可达9.6×10<Sup>4</Sup>IU/mL。 李震 李祥瑞 于瑞嵩 黄建珍 徐立新 沈世缘文献传递 重组猪α干扰素冻干保护剂的筛选 为了使重组猪α干扰素(rPoIFN-α)制品更好地应用于生产实践之中,本文采用保守的冻干工艺重点对rPoIFN-α制品的冻干保护剂进行筛选。通过外观检测、水分含量、活性检测对十四种冻干保护剂进行了比较和筛选。研究结果表明... 董世娟 朱于敏 于瑞嵩 沈世缘 李震关键词:重组猪Α干扰素 冻干保护剂 稳定性 猪戊肝病毒存在准种现象 被引量:3 2010年 为研究猪戊肝病毒准种存在情况,采用逆转录-巢式聚合酶链反应法(RT-nested-PCR)对四株猪戊肝病毒(Hepatitis E virus)第2可读框(ORF2)部分序列进行PCR扩增,将产物克隆后,每个毒株分别随机挑取20个阳性克隆测序,进行DNA序列分析。结果显示4株HEV不同克隆间的ORF2核苷酸序列同源性分别为96.8%-99.7%、98.8%-99.7%、98.8%-99.7%和100%,有变异的克隆核苷酸序列与上海株(SAAS-JDY5)同源性为96.8%-100%。由此证实感染戊肝病毒的猪个体内存在HEV准种。 张西营 朱瑞良 朱于敏 董世娟 于瑞嵩 沈世缘 沈世缘 王振勇关键词:戊型肝炎病毒 准种