王战勇
- 作品数：33 被引量：263H指数：8
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教农业科学更多>>
- 扩增片段多态性结合银染法对广西汉族人FⅧ基因内(CA)n的研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究广西汉族人群在 FⅧ基因内含子13(CA)n 及内含子22(GT)n(AG)n 两位点的基因频率分布,并用于血友病甲的家系分析。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增 FⅧ基因内含子13(CA)n 及22(GT)n(AG)n 的多态性片段,银染色法显示扩增结果;任选一标本,测其扩增片段长度获得其 i13(CA)n 及 i22(GT)n(AG)n 的具体重复数,从而推算出所有标本两位点的二核苷酸重复数。结果在91名广西汉族人135条 X 染色体中,共检出6种 i13(CA)n 和4种 i22(GT)n(AG)n,i13(cA)n 位点基因频率在 0.0002～0.5408间,多态信息量(polymorphism information content,PIC)为0.5899,实际杂合度为0.6364(28/44);i22(GT)n(AG)n 位点基因频率为0.0444～0.4963,PIC 为0.5359,实际杂合度为0.5227(23/44)。13个有阳性家族史的血友病家系,用该方法进行家系分析,9个家系可作出诊断,可诊断率为69%。结论 (1)i13(CA)n、i22(GT)n(AG)n 在广西汉族人中 PIC 高,是血友病甲家系分析中的有用位点;(2)相比 FⅧ相关的某些单个限制性片段长度多态性位点(restrictive fragment length polymorphism,RFLP),i22(GT)n(AG)n 是一个较为有用的位点。
- 朱春江刘敬忠欧维琳龙桂芳梁燕王战勇郑明慈
- 关键词：血友病A银染色法
- 胎儿甲型血友病的基因诊断
- 2008年
- 目的探讨胎儿甲型血友病的产前基因诊断方法的临床应用价值。方法2002年1月至2006年12月对北京朝阳医院妇产科19个甲型血友病家系进行基因携带者检测，应用长距离PCR（LD-PCR）技术检测其凝血因子Ⅷ（FⅧ）内含子22倒位情况，出现倒位者直接行脐静脉穿刺抽取脐带血进行胎儿血友病基因的产前诊断；非倒位者则联合应用多位点基因连锁分析技术先对携带者进行筛查，而后进行胎儿血友病基因的产前诊断。同时进行胎儿脐带血FⅧ水平的检测。结果（1）对19例孕妇的22次妊娠的胎儿进行了产前诊断，平均脐静脉穿刺孕周为23周（17～34周），所有穿刺均获成功，无穿刺导致的胎儿丢失。（2）19个甲型血友病家系中，有14个家系检测出内含子22倒位，对其16次妊娠胎儿行产前甲型血友病基因诊断，其中10例胎儿诊断为甲型血友病；6例诊断为正常胎儿。（3）多位点基因连锁分析技术产前诊断甲型血友病胎儿6例，其中包括1例孕妇先后2次妊娠甲型血友病胎儿。（4）22例胎儿中有16例进行了FⅧ水平检测（未行检测的6例为孕周低于20周或因经济原因患者家属拒绝），FⅧ水平在0～198％之间，有11例胎儿FⅧ水平〈10％，其中除1例FⅧ水平为2％，诊断为正常胎儿并随访1年FⅧ水平正常外，其余10例胎儿均诊断为甲型血友病。结论应用LD．PCR和多位点基因连锁分析技术可以快速有效地进行甲型血友病携带者的确认；胎儿脐带血FⅧ水平的检测有助于初步诊断，但确诊胎儿是否患病仍须有基因诊断结果。
- 赵耘梁燕王战勇肖白
- 关键词：血友病A产前诊断杂合子检测聚合酶链反应
- 使用偏爱密码子大幅度提高苯丙氨酸脱氨酶在食品级乳酸乳球菌中的表达被引量：8
- 2006年
- 为获得苯丙氨酸脱氨酶(PAL)在食品级乳酸乳球菌中的高效表达,将欧芹palcDNA(palnat)及根据乳酸乳球菌偏爱密码子设计人工合成的pal基因(palart)重组并转化到两种乳酸乳球菌NICE诱导表达系统中,测定基因工程菌表达PAL酶的量及活性,对比分析密码子偏爱性对乳酸乳球菌表达外源蛋白的影响。结果表明在两种乳酸乳球菌NICE表达系统中,使用偏爱密码子均可显著提高PAL酶的表达效率,使NZ9000/pNZ8048表达系统表达量提高22.23倍,NZ3900/pNZ8149系统提高35.90倍。此研究获得了安全高效表达PAL,可用于治疗苯丙酮尿症的基因工程菌。
- 陈星高斌贾兴元苏畅吕月平王战勇范新萍肖白刘敬忠
- 关键词：乳酸乳球菌密码子
- 风疹病毒JR23株包膜糖蛋白E2的遗传与变异分析被引量：1
- 2003年
- 为了探讨风疹病毒(rubellavirus,RV)包膜糖蛋白E2的基因与蛋白的遗传与变异特点,利用DNAstar软件比较JR23株与GenBank中各参考株E2的基因与多肽序列,分析不同RV株E2基因之间的同源性及E2蛋白功能关键区的氨基酸变异。结果表明,RVE2基因序列比较保守,但JR23株E2基因序列与其它9个分离株之间有明显差异,变异主要集中在484nt～554nt。同源性为90 3%～92 6%之间,与美国疫苗株RA27/3同源性最高,与美国疫苗株HPV77同源性最低,GenBank中的参考株间同源性较高,在96 3%～100 0%之间。E2多肽变异集中于161aa～185aa,但在E2功能关键区,如N端序列、N联糖基化位点、胞质区等则无明显变异。表明RVE2基因序列相对保守,虽然JR23株与GenBank中各参考株的E2基因序列有明显差异,但JR23株E2蛋白在功能关键区表现出遗传稳定性。此结果为阐明RV分子流行病学特征提供了理论依据,也为研究RV分子进化特征及病毒与宿主细胞的相互作用奠定了坚实基础。
- 王志玉王小凡王战勇薛永磊宋艳艳
- 关键词：风疹病毒E2基因
- SYBR-GreenⅠ实时荧光聚合酶链反应结合融解曲线分析技术在α-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断中的应用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR(SYBR-PCR)结合融解曲线分析(D.C)技术进行α-珠蛋白生成障碍性贫血(α-地贫)基因诊断的价值。方法对22个家系中的37份样品采用4管SYBR-PCR结合D.C进行--SEA、-α3.7,-α4.2及非缺失型(αα)4个等位基因型的检测,进而作出基因诊断。同时运用单管多重PCR(mPCR)结合凝胶电泳技术进行基因检测加以对照确认。结果22个家系中6个家系检出有--SEA或-α3.7携带者,其中东南亚型缺失携带者(--SEA/αα)7例,右侧缺失携带者(-α3.7/αα)3例,东南亚型缺失与右侧缺失双重杂合子(--SEA/-α3.7)1例。2例为胎儿产前诊断。其中1例为Bart′s水肿胎儿(--SEA/--SEA),另1例为东南亚型缺失携带者(--SEA/αα)。用mPCR凝胶电泳技术得出的基因诊断结果与上述结果一致。结论SYBR-PCR结合D.C技术在α-地贫的基因诊断、携带者检出及产前诊断方面具有实用价值。
- 闫梅梁燕王立荣王战勇肖白刘敬忠
- 关键词：实时荧光聚合酶链反应基因诊断产前诊断
- 山西省患者生活事件与高血压的关系研究被引量：1
- 2013年
- 目的:通过测试好的结构化问卷进行大范围的流行病学调查,研究近期生活事件与高血压状态之间是否存在关联,以及关联的强度和方向。方法:采用问卷调查法,调查山西省4053人的社会人口学特征、生活事件及血压测量情况。结果:773名受试者报告了高血压(19.2%);1565名受试者测量时为未控制的高血压(38.9%);541名受访者在过去几年有事件发生(13.6%)。自我报告的高血压的患病率在发生事件与未发生事件两组间差异无统计学意义。发生事件组的未控制高血压的患病率则明显低于未发生事件组,两组的患病率分别为33.1%和39.8%。结论:在过去几年的近期发生事件与自我报告的高血压之间无统计学相关性,但和未控制的高血压之间负性相关。在近期发生过事件者中真实未控制的高血压患病率较低。
- 王战勇徐涛王战英
- 关键词：高血压
- 用变性高效液相色谱检测和脱氧核糖核酸测序方法对三个肥厚型心肌病家系β肌球蛋白重链基因突变的分析结果
- 2011年
- 目的:研究家族性肥厚型心肌病(HCM)的主要致病基因β肌球蛋白重链(MYH7)基因突变情况。方法:用变性高效液相色谱(DHPLC)检测和脱氧核糖核酸(DNA)测序方法对三个肥厚型心肌病家系成员的MYH7基因8、14外显子及附近上下游序列进行检测分析;另选正常对照者50例。结果:三个家系其中一个家系发现MYH7基因14外显子中存在Thr441Met突变,外显子8也存在一个点突变。另外两个家系均存在外显子8的C到T的突变,但表型不一。其中一个家系还存在内含子13和19的多态位点。此外,三个家系MYH7基因第3外显子均发现同义突变。结论:MYH7基因在肥厚型心肌病家系中具有较高的突变率。运用变性高效液相色谱技术,能够快速有效的进行基因突变筛查。
- 杨忠伟徐艳萍冯秀丽邱建军王战勇肖白
- 关键词：家族性肥厚型心肌病Β肌球蛋白重链基因突变
- 大黄乙醇提取物体内抗单纯疱疹病毒作用的研究被引量：22
- 2003年
- 目的 了解大黄乙醇提取物 (大黄 )体内抗单纯疱疹病毒 (HSV)的作用。方法 小鼠尾静脉接种滴度为 10 3TCID50 HSV Ⅰ型 0 15ml,第 2天皮下注射给药。将BALB c小鼠分为 7个组 ,分别给予不同剂量的药物 ,不同时间取肝、脾、肾等组织 ,做病理切片 ,观察病变情况 ;用空斑形成法滴定各脏器中的病毒滴度 ,观察药物在动物体内对HSV感染的抑制作用。结果 大黄乙醇提取物经皮下注射未发现小鼠有毒性反应 ;大黄各治疗组脾脏不出现病理变化 ,中、高剂量组肝脏、肾脏的病理损伤也能逐渐消失 ;大黄低剂量组与ACV阳性对照组效果相当 ;病毒滴度测定说明大黄能使各脏器中病毒滴度迅速下降 ,中、高剂量组比低剂量组作用明显 ;将各组数值进行两两比较 (Q检验 ) :F =4 9 14 5 9,P <0 0 0 1,总体均数差异有显著性 ;治疗组 (ACV、DH1、DH2、DH3)与非治疗组 (VC)差异有显著性 (P <0 0 1) ;DH2、DH3、与DH1差异有显著性 (P <0 0 1) ;DH1、DH2、DH3与ACV差异无显著性 (P >0 0 5 )。结果说明 ,对于总滴度平均值的下降 ,大黄与ACV同样有效 ,且中、高剂量组的效果优于低剂量组。结论 大黄乙醇提取物在体内具有非常明显的抗HSV感染作用 ,应用前景广阔。
- 王志玉许斌宋艳艳王桂亭许洪芝王小凡薛永磊王战勇于修平
- 关键词：单纯疱疹病毒抗病毒作用低剂量中剂量高剂量
- 风疹病毒包膜糖蛋白E1酵母表达载体的构建被引量：1
- 2004年
- 目的:构建风疹病毒包膜糖蛋白E1的全基因片段的克隆载体和酵母表达载体。方法:应用PCR方法扩增糖蛋白E1的全长基因,并在基因两端创建相应的酶切位点。E1基因与pBluscriptⅡSK+载体均经双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109,经氨苄筛选和蓝白斑筛选并测序,建立了克隆载体pBluscriptⅡSK+鄄E1;克隆载体与表达载体pGAPZαA双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109熏经Zeocin筛选并测序。结果:PCR扩增后出现一条1.5kb的条带,体外重组技术重组于重组质粒pBluscriptⅡSK+和pGAPZαA后,经PCR、EcoRⅠ及XbaⅠ双酶切均出现相应长度的片段,测序证实为包膜糖蛋白E1的基因。结论:成功构建了含有风疹病毒包膜糖蛋白E1全基因的克隆载体及酵母表达载体。
- 温红玲王志玉王战勇任桂杰
- 关键词：风疹病毒糖蛋白类克隆载体酵母菌
- 血友病甲基因分析技术的改进及其在产前诊断中的应用被引量：9
- 2007年
- 目的对血友病甲基因分析技术进行改进并应用于携带者检查和产前诊断。方法长距离聚合酶链反应方法直接检测凝血因子Ⅷ第22内含子倒位，对非倒位家系用FVH基因内限制酶切位点XbaI、HindⅢ、二核苷酸重复序列多态性位点STR13和STR22，以及基因外可变数目串联重复序列DXS52（St14）位点进行基因连锁分析。结果52个家系共检出71位携带者。21个家系为第22内含子倒位，28个家系经连锁分析得到明确诊断，3个家系无法诊断，可诊断家系占94．2％。为18个家系做胎儿产前诊断，其中10例诊断为血友病甲胎儿；诊断7例正常男胎和1例携带者女胎，随访1年发育正常。结论应用长距离聚合酶链反应和多位点基因连锁分析技术可以快速有效地进行血友病甲携带者检查和产前诊断。
- 梁燕赵耘王战勇闫梅肖白刘敬忠
- 关键词：血友病甲产前诊断
