王文敬 作品数:91 被引量:235 H指数:9 供职机构: 南方医科大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 文化科学 生物学 更多>>
调节性T淋巴细胞对急性期布鲁菌病患者治疗效果的影响 被引量:5 2017年 目的调查布鲁杆菌感染后宿主的体液和细胞免疫应答情况,Foxp3^+在布鲁菌病患者治疗过程中的变化,阐明宿主产生免疫抑制对布鲁菌病治疗效果的影响。方法2015年7月至2015年11月,黑龙江农垦总局总医院感染三科住院的急性期布鲁菌病患者65例。标准治疗组28例,根据患者情况选择抗菌药物进行3个疗程的标准治疗,每个疗程20d,疗程间隔10d;免疫增强剂组37例,在标准治疗的基础上增加免疫增强药物。另选取健康体检者30名为健康对照组。在治疗前和每个疗程结束时,采用流式细胞术检测患者外周血中CD3^+CD4^+Foxp3^+Treg含量变化。符合正态分布的数据以孑±S表示。两组间比较采用t检验,多组问的比较采用方差分析,组间两两比较采用SNK法。不符合正态分布的数据进行多个独立样本的非参数检验。结果65例急性期布鲁菌病患者第1疗程结束时外周血中Foxp3^+ Treg含量为2.83%,第2疗程结束时为3.77%,第3疗程结束时为4.03%,均高于健康对照组的1.69%(£值分别为5.97、9.05和5.66,均P〈0.01)。第1疗程结结束时,标准治疗组和免疫增强剂组间外周血Foxp3^+Treg含量差异无统计学意义(t=0.33,P〉0.05),但均高于健康对照组(£值分别为7.09和4.94,均P〈0.01)。第2疗程结束时,免疫增强剂组患者外周血Foxp3^+Treg含量高于标准治疗组,差异有统计学意义(t=2.22,P〈0.01),且两组均高于健康对照组(f值分别为10.79和7.25,均P〈0.01)。第3疗程结束时,免疫增强剂组患者外周血Foxp3^+ Treg含量高于标准治疗组和健康对照组,差异均有统计学意义(t值分别为6.02和6.45,P〈0.01)。结论急性期布鲁菌病患者经过添加免疫增强剂的治疗,外周血Foxp3^+Treg含量呈现持续上升的趋势,并一直维持在一定高位水平。推测,过� 胡飞环 张国侠 田艳君 张立杰 刘佰玲 王文敬 黎诚耀关键词:布鲁菌病 T淋巴细胞 调节性 FOXP3 羊布鲁杆菌外膜蛋白19(OMP19)的表达及鉴定 被引量:3 2016年 目的构建可表达羊布鲁杆菌外膜蛋白19(OMP19)的真核表达载体,研究OMP19对宿主细胞凋亡的作用。方法以羊布鲁杆菌M5-90疫苗株基因组为模板,PCR扩增脂化型外膜蛋白19(L-OMP19)与非脂化型外膜蛋白19(U-OMP19)基因,产物连接至p Zero Back/blunt载体;经双酶切鉴定、测序正确的基因亚克隆到用于包装慢病毒的表达载体p HAGE-CMV-MCS-IZsGreen上,双酶切鉴定,构建含正确L-OMP19、U-OMP19基因的真核表达载体p HAGE-L-OMP19与p HAGE-U-OMP19。分别将构建好的载体转染293FT细胞、Huh7.5.1细胞和JEG-3细胞,用Western blot法及免疫荧光技术检测L-OMP19、U-OMP19蛋白的表达,用藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果构建能在细胞内表达L-OMP19和U-OMP19基因的真核表达载体p HAGE-L-OMP19和p HAGE-U-OMP19,二者转染细胞后表达的L-OMP19和U-OMP19蛋白可与特异性抗体反应;L-OMP19和U-OMP19不引起Huh7.5.1细胞凋亡,但可引起JEG-3细胞的大量坏死。结论成功构建可用于慢病毒包装的L-OMP19和U-OMP19真核表达载体,胞内重组表达的脂蛋白OMP19具有良好的抗原性,为研究布鲁杆菌脂蛋白在宿主细胞内作用机制提供实验材料。 何作萍 罗佩芳 胡飞环 翁云层 王文敬 黎诚耀关键词:布鲁杆菌 布鲁杆菌病 真核表达 细胞凋亡 “输血医学”本科高等教育课程建设 目的制定符合我国输血医学专业岗位需求的输血医学本科高等教育方案,从根本上提高输血医学行业质量与水平。方法聘请国内外输血医学领域知名专家教授进行专业课的教学及课程建设工作,课程建设遵循'加强基础、注重实践、增强素质、培养能... 王文敬 黎诚耀中国布鲁氏菌16s-23s rRNA间隔区多态性研究 被引量:4 2005年 目的利用16 s-23 s rRNA间隔区(ITS)的多态性,对中国布鲁氏菌种间或种内生物型进行鉴别,评价ITS作为基因标识物的意义,寻找适合布鲁氏菌分型研究的基因标识物。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术,对中国120株布鲁氏菌的ITS进行分析和筛选,测序结果与Genbank中的布鲁氏菌ITS序列进行比较分析。结果对16 s-23 s rRNA间隔区的SSCP结果分析,得到4种不同的带型(ⅠI、I、Ⅲ、Ⅳ),测序序列有3个位点的差异,达到99.87%的一致性。结论中国布鲁氏菌的ITS序列高度保守,具有一定探讨其作为布鲁氏菌属种内分型的基因标识的价值。 王文敬 芮勇宇 陈瑶 骆利敏 李明关键词:布鲁氏菌 16S-23S 多态性 PCR-SSCP 测序 布鲁氏菌omp31蛋白的单克隆抗体及其应用 本发明公开了布鲁氏菌omp31蛋白表位及其抗体和应用,表位的序列为GDDASALHTWSDKTKA。本发明还公开了识别上述表位的单克隆抗体,及单克隆抗体的应用,都有助于布鲁氏菌病的诊断。 王文敬 廖卿宇 李婷婷 黎诚耀文献传递 “输血医学”本科高等教育课程建设 被引量:4 2010年 王文敬 黎诚耀关键词:高等教育课程 输血医学 素质教育课程 专业选修课 医学专业人才 p53蛋白在食管癌诊断中的应用 被引量:2 2008年 食管癌(esophageal cancer,EC)是人类消化道的常见肿瘤,也是世界最常见的十种恶性肿瘤之一,位居我国肿瘤死亡的第四位.近期报道,每年新增病人超过300000人,并且大多发生在发展中国家[1].当前临床就诊的病例多属于中晚期.…… 陆楷 王文敬关键词:食管癌 肿瘤标志物 P53 抑癌基因 乳腺癌肿瘤标志物——乳腺球蛋白的研究进展 被引量:2 2008年 乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤.在美国,每8位女性中会有1位患乳腺癌[1].我国随着人民生活水平的不断提高,乳腺癌发病率也呈逐年上升趋势,年增长率达到2%,在城市,乳腺癌已成为女性最常见的恶性肿瘤[2].因此.乳腺癌的早期诊断对改善病人预后和提高治愈率意义重大[3].…… 杨新红 王文敬关键词:肿瘤标志物 球蛋白 相对分子质量 人外周血 特异性蛋白 新一代大肠癌相关抗原LEA的研究进展 被引量:1 2008年 大肠癌是常见的消化道肿瘤,在北美和西欧的发病率较高,其中在美国其发病率和死亡率均占到全部肿瘤疾病的第三位.在我国.近年来由于饮食结构和生活习惯的改变,大肠癌的发病率也呈明显上升趋势[1].…… 谢玥 王文敬 李明关键词:大肠癌组织 大肠癌相关抗原 肿瘤相关抗原 消化道肿瘤 抗原决定簇 一种新型疫苗递送系统——GEM微球 2009年 目的介绍一种新型疫苗递送系统"GEM微球",可用于制备诱发机体同时产生局部黏膜免疫和系统免疫的多价疫苗。方法利用乳酸菌制备GEM微球,获得融合了蛋白锚定结构(PA)的抗原或多肽等免疫原,二者结合后直接运载至黏膜作用于靶点,进而发挥诱导机体免疫应答的疫苗作用。结果与PA融合表达的蛋白,可高载量与革兰氏阳性菌递送系统"GEM微球"结合,制备多价疫苗。结论本文提供的构建"GEM微球疫苗"的相关实验技术,即GEM新型的疫苗递送系统,可为对迄今无安全有效疫苗的布鲁氏菌病的免疫防护和治疗提供有价值的依据。 王文敬 张艳玲 李明关键词:黏膜免疫