王晓佳
- 作品数：8 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生机械工程更多>>
- 稳定、高效表达肝细胞生长因子的中国仓鼠卵巢细胞系的构建
- 2006年
- 目的:构建hHGF-pCDNA3.1表达载体,在中国仓鼠卵巢细胞中获得具有生物学活性的重组人肝细胞生长因子蛋白的高效、稳定表达。方法:RT-PCR扩增人肝脏中hHGF全长cDNA片段,克隆入pCDNA3.1(+)真核表达载体中,构建hHGF-pCD-NA3.1重组质粒并转染中国仓鼠卵巢细胞,经筛选得到了高效、稳定表达hHGF的细胞克隆,采用RT-PCR和ELISA方法检测hHGF在中国仓鼠卵巢细胞中的表达。结果:酶切及测序结果表明重组质粒构建正确,RT-PCR显示细胞的rhHGF mRNA呈现高水平,ELISA检测hHGF在细胞中的分泌性表达,浓度达10ug/L。结论:成功地在中国仓鼠卵巢细胞中获得了hHGF蛋白的高效、稳定表达。为下一步将表达hHGF的细胞微囊化制备基因工程细胞,并移植用于相关疾病的基因治疗奠定了基础。
- 鲁芳王晓佳刘彦友汪宇辉胡丽娟王正荣
- 关键词：肝细胞生长因子中国仓鼠卵巢细胞转染基因表达
- 生物节律数学模型的建立及评价被引量：1
- 2005年
- 近年来,研究生物钟产生自激振荡过程的机制越来越复杂,获得的数据亦在不断增多。这是由于哺乳动物的蛋白数量比低等的动植物的蛋白数量多。因此,研究哺乳动物的生物节律的实验数据不能通过以前的简单数学模型来处理。本文综述了近年来研究的哺乳动物的生物节律数学模型。
- 王晓佳王跃錡华慧王正荣
- 关键词：生物节律数学模型近日节律生物钟
- 吗啡对小鼠节律基因mPeriod1表达的影响
- 目的
地球上的大多数生物都存在着近日节律，它们被内源性近日节律钟所调控。目前，对近日节律钟的分子机制研究发现，无论是在脑内还是外周的近日节律蛋白表达的相位会被外源性的刺激所改变。为了说明吗...
- 王晓佳
- 关键词：近日节律药物依赖CPP
- 文献传递
- 小鼠钟基因Period2(Per2)抑制乳腺癌细胞生长的研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究小鼠节律基因Period2(Per2)对小鼠乳腺癌细胞(EMT6)的生长抑制及诱导凋亡的作用。方法将pcDNA3.1(+)-Per2转导入EMT6细胞内,同时设立转染空质粒pcDNA3.1(+)入细胞的对照组。以RT-PCR、Westernblot、流式细胞技术来检测Per2基因和蛋白的表达;采用MTT、细胞生长曲线、细胞平板集落形成实验检测Per2过表达后对小鼠乳腺癌细胞的生长抑制作用;通过流式细胞技术、DNA梯形带、hochst33258荧光染色和电镜技术检测Per2过表达后对小鼠乳腺癌细胞凋亡的影响。结果小鼠节律基因Per2过表达抑制EMT6细胞的生长和增殖,诱导细胞凋亡率增加。结论本研究发现小鼠节律基因Per2可能通过使EMT6细胞阻滞于G1期,并诱导细胞凋亡来实现对该肿瘤细胞的生长抑制作用。
- 华慧王跃锜万朝敏刘延友王晓佳王正荣
- 关键词：时间生物学生物节律节律基因细胞周期
- 吗啡依赖及戒断小鼠脑内节律基因mPeriod1表达的研究
- 2006年
- 目的研究吗啡依赖和吗啡戒断小鼠脑组织内节律基因mPeriod1(mPer1)表达的变化。方法以雄性BALB/C小鼠的吗啡条件性位置偏爱为指标,观测吗啡依赖组、吗啡戒断组小鼠与正常盐水组小鼠的药物精神依赖的变化;应用免疫组化SP法检测3组小鼠脑内mPer1的表达情况;利用图像软件对免疫组化结果进行分析和处理。结果吗啡依赖组的小鼠脑内mPer1表达峰值相位较正常盐水组有明显改变。而吗啡戒断组小鼠脑内mPer1表达峰值相位较正常盐水组没有显著性差异。结论研究结果表明吗啡成瘾影响了以mPer1为重要部件的近日钟的自激振荡过程,使近日节律发生了改变。
- 王晓佳王跃锜刘延友华慧幸浩洋王正荣
- 关键词：生物节律节律基因基因表达药物成瘾
- 节律基因mPeriod2对Lewis肺癌细胞的影响
- 王正荣王跃铸华慧朱彬王晓佳刘延友杨春蕾
- 生物节律测控和分析系统的研制及应用被引量：4
- 2006年
- 目的设计研制生物节律测控及分析系统,并以该系统为技术平台研究外环境的改变对动物的生物节律的影响。方法生物节律测控及分析系统采用分布式控制方案,由测控计算机和授时因子发生仪组成。动物活动性检测部分及授时因子发生部分采用模块化设计,根据实验不同要求进行配置。并且通过对饲养在不同的光暗循环周期的小鼠进行生物节律的研究来检测系统的性能及动物对工作平台的适应性。结果该系统选配光线授时因子模块后,显示系统按设计要求完成数据采集及通信、光线调控、数据处理分析。在使用期间没有发生故障。结论系统功能完善,扩展性好,动物适应性好,操作简单,可靠性高,为时间生物学的研究工作提供了可靠的研究平台。
- 杨波刘延友李颖廖玍王晓佳王正荣
- 关键词：生物节律测控系统时间生物学
- hper1干扰质粒的构建及hper1功能的初步研究
- 2006年
- 目的构建高效的针对hper1(人类period1基因)的干扰质粒,并对hper1的功能进行初步研究。方法选择4个hper1的干扰位点,根据位点序列合成构建4个pTER-hper1干扰质粒,并通过测序验证。将4种干扰质粒分别转染至SH-SY5Y细胞,经马血清休克诱导后,提取细胞总RNA,RT-PCR检测hper1mRNA的表达,鉴定干扰效果。提取细胞总蛋白,Western Blot检测P-p44/42丝裂原活化蛋白激酶(mitagen-actinated pratein kinase,MAPK)表达。结果RT-PCR鉴定显示pTER-hper1-Ⅱ干扰质粒干扰效率最高,hper1表达量降低84.9%。Western Blot显示hper1表达受抑制后,P-p44/42MAPK水平升高。结论成功构建并筛选到具有显著干扰效率的pTER-hper1干扰质粒,为进一步研究hper1的功能奠定了基础,并发现hper1对MAPK通路具有负相调控作用。
- 叶珊汪宇辉胡丽娟刘延友王晓佳王正荣
- 关键词：生物节律干扰质粒RNA干扰
