李光明
- 作品数：33 被引量：68H指数：4
- 供职机构：天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨含腺病毒基因E1A、融合自杀基因CDglyTK及报告基因GFP的重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK与酶前体药物5-FC和(或)GCV联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用。方法:将重组腺病毒质粒prAd-E1A-CDglyTK经脂质体介导转染293细胞,进行病毒的扩增、纯化与PCR鉴定,以紫外分光光度法与TCID50法测定纯化病毒的颗粒浓度与感染性滴度,计算病毒比活性;在SKOV3细胞中观察重组病毒的复制能力及感染效率,确定感染率达90%以上的最小MOI。用MTT法观察感染重组病毒的SKOV3细胞对5-FC或GCV的敏感性,并计算IC_(50);观察一定MOI的rAd-E1A-CDglyTK或重组复制缺陷型腺病毒rAd-CDglyTK与IC_(50)的5-FC和(或)GCV联合应用对SKOV3细胞生长的抑制作用。结果:经PCR和琼脂糖凝胶电泳证实,纯化重组腺病毒中存在E1A和CDglyTK两个基因片段,其病毒颗粒浓度和感染性滴度分别为9.47×10^(11) VP/ml和3.16×10^(10)IU/ml,病毒比活性为3.34%。重组病毒可在SKOV3细胞中复制,对SKOV3细胞的感染效率随MOI的增加而增加,可致细胞感染率达90%以上的最小MOI为50 IU/cell。5-FC或GCV明显抑制感染细胞的生长,且存在明显的剂量依赖效应。两种重组腺病毒/前药系统的抑瘤作用比较显示,rAd-E1A-CDglyTK组细胞生长抑制率[(16.57±1.59)%]显著高于rAd-CDglyTK组[(10.44±1.80)%,P<0.01];与IC_(50)的5-FC和GCV双药联合应用,其抑制率达(71.68±2.63)%,显著高于rAd-CDglyTK/5-FC+GCV组的(63.64±2.91)%(P<0.01)。结论:重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK与酶前体药物联合应用对卵巢癌SKOV3细胞具有显著的抑制作用,其效果优于重组复制缺陷型腺病毒rAd-CDglyTK。
- 周丽君李秋香李冬田曹阳李光明佟惠春
- 关键词：卵巢癌重组腺病毒自杀基因SKOV3细胞
- 含胞嘧啶脱氨酶基因重组腺病毒的构建及其对肺癌抑制作用的研究被引量：1
- 2002年
- 目的:构建含胞嘧啶脱氨酶基因(CD基因)重组腺病毒(AdE1CMVCD),并鉴定;用自杀基因治疗系统(AdE1CMVCD/5-FC)对肺癌进行抑瘤作用的实验研究。方法:体外实验:用不同稀释度的AdE1CMVCD转染人肺癌细胞H460后分别加入不同浓度的5-氟胞嘧啶(5-FC),用MTT法测OD570nm值,按公式计算细胞生长抑制率;体内实验:建立T739鼠肺腺癌荷瘤模型,瘤体内导入AdE1CMVCD,腹腔注射5-FC,观察实验组及各对照组瘤体及生存期差异。结果:该系统转染的人肺癌H460细胞生长抑制率随前药5-FC浓度及感染重组病毒剂量的增加而增加,最大抑制率达61.29%,同时观察到了明显的旁杀伤作用;在体内实验中观察到AdE1CMVCD/5-FC对小鼠肺癌有明显的生长抑制作用,明显延长荷瘤小鼠生存期。结论:本文建立的AdE1CMVCD/5-FC系统体内外对肺癌均有明显的抑制作用,为临床肺癌基因治疗的应用奠定了基础。
- 佟惠春李冬田李芳芳李光明
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶基因重组腺病毒肺癌基因治疗
- 成纤维细胞生长因子21对胰岛素抵抗肝细胞葡萄糖摄取的影响及机制被引量：1
- 2017年
- 目的观察体外合成成纤维细胞生长因子21(FGF21)对胰岛素抵抗(IR)肝细胞葡萄糖摄取的影响,并探讨其机制。方法体外合成具有一定稳定性的荧光标记的FGF21 mRNA。将肝细胞置于含34.4μg/mL重组胰岛素和1μg/mL地塞米松及10%FBS的RPMI-1640培养基中培养72 h,诱导建立IR肝细胞模型,将其分为模型对照组,胰岛素组和FGF21组。模型对照组不添加任何药物,胰岛素组加入1μg/mL重组胰岛素,FGF21组电转入FGF21 mRNA。采用葡萄糖氧化酶法测定3组细胞培养液中的葡萄糖含量,计算葡萄糖吸收量;实时荧光定量PCR方法检测3组葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)mRNA表达,Western blotting法检测3组GLUT1蛋白表达。结果与模型对照组相比,FGF21组葡萄糖吸收量升高,细胞GLUT1 mRNA及蛋白表达升高(P均<0.05)。与模型对照组相比,胰岛素组葡萄糖吸收量不明显,细胞GLUT1 mRNA及蛋白表达无明显差异(P均>0.05)。结论体外合成的FGF21 mRNA可以改善IR肝细胞对葡萄糖的摄取,其机制与增加GLUT1表达有关。
- 白洁王金鑫宋紫暄吴志敏高雁朱泽李光明
- 关键词：成纤维细胞生长因子21葡萄糖转运蛋白1葡萄糖摄取胰岛素抵抗肝细胞
- SUZ12过表达及敲减恶性外周神经鞘瘤稳定细胞株的建立及其意义
- 2019年
- 目的:构建SUZ12基因过表达和敲减的恶性外周神经鞘瘤(MPNST)稳定细胞株并探讨其意义。方法:PCR合成SUZ12基因全长并设计合成SUZ12基因的3对特异性sgRNA干扰靶点序列(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3),构建重组表达质粒,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒并用荧光法测定其滴度。确定慢病毒感染的最适MOI以及嘌呤霉素筛选的最适剂量,转染ST88-14细胞,构建过表达及敲减的MPNST稳定细胞株。荧光显微镜观察稳定株绿色荧光蛋白的表达情况,RT-qPCR在mRNA水平进行验证,MTT法检测SUZ12过表达和敲减组增殖活性的改变。结果:LV-SUZ12和LV-SUZ12-sgRNA转导入ST88-14细胞并稳定表达绿色荧光蛋白,RT-qPCR结果显示过表达稳定株SUZ12表达量明显升高(P<0.05),CRISPR/Cas9敲减稳定株SUZ12表达量明显下降(P<0.05)。MTT结果显示过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖。结论:SUZ12过表达和敲减的稳定细胞株构建成功,初步验证结果表明过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖,为针对SUZ12在MPNST中的生物学功能、作用机制和疾病诊断治疗的进一步研究提供了实验基础。
- 张静高雅李新宇朱香熹孙硕遥肖可王静刘嘉岳赵玉龙李光明朱泽
- 关键词：恶性外周神经鞘瘤慢病毒
- 重组腺病毒rAdCDglyES体内抑瘤作用的研究
- 2005年
- 目的:探讨重组腺病毒rAdCDglyES对肺癌的体内抑、杀瘤作用。方法:建立近交纯系C57BL小鼠Lewis肺癌模型;于小鼠荷瘤部位注射定量的重组腺病毒rAdCDglyES并给予5-氟胞嘧啶。通过观测小鼠瘤体大小、重量,中位生存期,及组织病理学改变判定疗效。结果:对荷瘤小鼠连续10d的治疗观测后发现,实验组与对照组之间平均瘤重有显著性差异(P<0.05);对荷瘤小鼠的中位生存期比较发现实验组较对照组天数有显著性差异(P<0.05);对实验组和对照组肿瘤进行HE染色后病理检测,镜下所见,含ES基因的实验组小鼠瘤组织血管数明显少于对照组,仅为对照组的53.85%(14/26)。结论:rAdCDglyES/5-FC对C57BL小鼠的Lewis肺癌有明显的抑杀瘤作用。
- 李光明李冬田尹冰楠李秋香佟惠春
- 关键词：自杀基因
- H3K27三甲基化蛋白可作为MPNST的重要诊断标记物被引量：4
- 2018年
- 目的:探讨组蛋白3赖氨酸27位点的三甲基化(H3K27me3)在恶性周围神经鞘瘤(MPNST)中的表达及对预后的影响。方法:收集恶性周围神经鞘瘤病理组织标本43例,经福尔马林固定,石蜡包埋后,利用组织芯片技术(TMA)制成组织芯片,免疫组织化学方法检测H3K27me3等蛋白的表达,根据临床数据和随访信息,运用SPSS 19.0统计软件进行分析比较不同H3K27me3表达水平与患者临床病理特征之间的关系。结果:MPNST组织芯片位点完整。H3K27me3表达缺失组约占65.11%,其中完全缺失组占39.53%,部分缺失组约占25.58%,即以H3K27me3表达缺失为诊断依据则MPNST的检出率可达65.11%,且与原诊断一致;在39例散发病例样本中有43.58%完全缺失、28.20%部分缺失,4例NF1相关样本100%保留表达,即在非NF1相关的MPNST中检出率可达71.78%。结论:检测H3K27me3的表达水平对MPNST的诊断具有良好的灵敏性和特异性,特别是在除外NF1相关临床背景的MPNST前期诊断中具有重要意义,有望成为早期诊断散发型MPNST的生物学标记物。
- 宋紫暄李光明张静张卫民杨吉龙朱泽
- 关键词：恶性周围神经鞘瘤NF1组织芯片
- 融合CD-ES基因治疗恶性肿瘤的实验研究
- 李冬田李秋香佟惠春李菲尹冰楠李光明孙健何明伟朱小代
- 研究将两个不同功能的基因（CD 、ES）作成融合基因，再导入穿梭质粒，最后通过细菌内重组法及在293细胞内包装、扩增重组腺病毒 (rAdCDglyES)，使其具有直接杀伤瘤细胞，阻止瘤新生血管形成、间接杀伤瘤细胞和阻止瘤...
- 关键词：
- 关键词：融合基因基因治疗恶性肿瘤
- 多功能小动物操作台
- 本发明公开了一种多功能小动物操作台，是厢式啮齿类动物固定器或滚筒式啮齿类动物固定器。其包括底座和底盘，位于底座上方的旋转固定板，位于旋转固定板上的四个缚爪器和位于缚爪器下方的四肢固定索道，连接在底座一端的尾部固定装置，设...
- 李光明宋紫暄申天宇代亮姚远张志东
- 成纤维细胞生长因子的代谢作用研究进展被引量：4
- 2018年
- 成纤维细胞生长因子(FGF)是一类细胞因子家族,由20多个成员组成,具有代谢调节等多种生物学活性功能。FGF家族中FGF15/19、FGF21、FGF23通过与细胞膜表面复合物结合的方式,特异性与FGF受体和(或)Klotho细胞结合以发挥作用。FGF15/19在肠道中产生,而FGF21主要在肝脏中特异性表达,主要的生物学功能是调节糖和脂肪的代谢。FGF23则是联系骨骼和肝脏代谢的信息呈递分子,以保持磷酸盐代谢的动态平衡。在药理学领域,FGF15/19、FGF21、FGF1可能作为新型肥胖治疗药物和糖尿病靶点治疗药物。
- 窦易铭白洁李光明
- 关键词：成纤维细胞因子成纤维细胞生长因子21成纤维细胞生长因子23
- 2014年度我院422例小儿急性腹泻病原微生物检验研究被引量：23
- 2015年
- 目的探讨2014年度我院小儿急性腹泻病原微生物检验情况,分析病原微生物的构成,为该病的预防及诊治提供理论参考依据。方法以2014年度我院422例小儿急性腹泻疾病患者为研究对象,采集患儿粪便标本,进行细菌培养与鉴定,同时以ELISA法进行病毒抗原的检测,逆转录聚合酶链反应检测病毒核酸,对病毒分型,统计病原微生物的分布特点及相关特性。结果不同年龄段患儿的发病率差异有统计学意义(χ2=158.083,P<0.05),年龄小于2岁的婴幼儿易于发病;小儿急性腹泻病原微生物的检出254例,检出率为60.19%,其中检出病毒197例(77.56%),人轮状病毒为146例(57.48%),致病菌48例(18.90%),真菌及寄生虫9例(3.54%);性别对小儿急性腹泻发病无显著影响,但病原微生物的感染受季节的影响。结论 2014年度我院小小儿急性腹泻病原微生物主要为病毒,以人轮状病毒最多,多发于冬季。
- 吴鸿滨张岩李光明朱泽
- 关键词：急性腹泻病原微生物
