周峰
- 作品数：28 被引量：52H指数：4
- 供职机构：徐州医学院基础学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗肺炎衣原体42kDa蛋白种特异性单抗的制备及应用被引量：1
- 2002年
- 目的 制备肺炎衣原体 (Cpn) 4 2kDa蛋白单克隆抗体并了解其在Cpn感染诊断中的应用价值。方法 采用纯化的Cpn 42kDa蛋白带制备出 2株特异性抗Cpn 42kDa蛋白单克隆抗体 ,用其中一株建立了检测Cpn的直接免疫荧光法 (DFA)。结果 2株能稳定分泌抗Cpn单抗的杂交瘤细胞株Ad6、Db1 均为IgG1 ,染色体数目为 90～ 1 0 2条 ,效价分别为 1∶32 768、1∶1 6 384(微量免疫荧光法 ,Micro -IFA)。将腹水 1∶1 0 0稀释 ,该单抗只与Cpn呈现阳性反应 ,与其他衣原体和呼吸道病原菌均无交叉反应。Westernblot证实单抗结合Cpn蛋白的分子量为 42kDa,且不与其他衣原体反应。建立的DFA对 1 2 0名呼吸道感染者的咽拭子、肺泡灌洗液、痰检测 ,其结果和PCR试剂盒检测结果经统计学处理 ,二者相关系数为 0 .9667,符合临床检测要求。结论 DFA灵敏、准确 ,可用于Cpn的检测。
- 王慧刘晓梅宁波张官萍周峰简洁
- 关键词：肺炎衣原体杂交瘤微量免疫荧光法直接免疫荧光法
- 人T淋巴细胞活化后羟甲基化的变化
- 2014年
- 目的初步探讨人T淋巴细胞活化后细胞内5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)和5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-mC)的含量变化。方法成年健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)分别经刀豆蛋白(ConA)或CD3抗体和CD28抗体处理72 h后,采用免疫荧光法观察5-hmC和5-mC的变化,Real-time PCR检测TETs的mRNA转录水平。结果免疫荧光结果显示无论是经ConA非特异性刺激还是经CD3抗体和CD28抗体处理的人T淋巴细胞细胞核内,5-hmC水平明显高于5-mC,且后者从核内转位到胞浆;CD3抗体和CD28抗体处理后的TET2 mRNA转录水平显著高于非处理组。结论活化的T淋巴细胞中5-mC转变是由TET2调控的。
- 张庆史震李小翠刘晓梅汤仁仙郑葵阳周峰
- 关键词：T淋巴细胞
- 应用自制细胞培养罐小规模制备抗衣原体单抗的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 建立简便、经济的小规模制备单抗的罐培养方法。方法 使用自制细胞培养罐培养抗衣原体杂交瘤细胞株 ,定时细胞计数 ,测定培养上清液中葡萄糖、乳酸及抗体含量 ,微量免疫荧光法测定单抗效价。结果 5d内细胞密度从 5× 10 8/L增至 1× 10 10 /L ,活细胞数为 1.4 5× 10 9/L ,纯化抗体为 0 .4 4g/L ,总量达 11mg ,3株杂交瘤细胞均获得效价为 1∶2 0 4 8的培养上清。结论 自制细胞培养罐可以纯批式小规模制备单抗 ,污染少 。
- 王慧宁波周峰李慧刘晓梅汤仁仙
- 关键词：单克隆抗体细胞培养衣原体
- 201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 观察 2 0 1A中药合剂防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法 建立大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :2 0 1A处理组、肾炎对照组及正常对照组。 2 0 1A处理组大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后即刻给予 2 0 1A合剂 (0 .42g/kg ,灌胃 ) ,至第 2 1天。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第 4天、第 14天和第 2 1天 ,检测大鼠尿蛋白 ,观察肾组织病理学改变。结果 肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第 4天即出现异常蛋白尿 ,肾小球内可见细胞数增加和新月体形成 ,肾小管内大量蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚。而 2 0 1A处理组鼠上述病变均明显好转。结论 2 0
- 汤仁仙王迎伟王慧周峰
- 关键词：中药合剂抗肾小球基底膜肾炎
- 融合型自杀基因系统Fcy：：Fur／5-FC对人肝癌细胞株HepG2体外杀伤作用的初步研究
- 2011年
- 目的研究融合型自杀基因Fcy：：Fur联合5-氟胞嘧啶（5-Fc）对人肝癌细胞株HepG2的杀伤作用。方法应用脂质体介导法将Fcy：：Fur基因转染人人肝癌细胞株HepG2，经G418筛选2周后行有限稀释法获得稳定表达Fcy：：Fur基因的单克隆细胞。5-Fc处理后，通过MTF法和AnnexinV—FITC＋PI双标记染色法，检测Fcy：：Fur／5～FC自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的细胞增殖及凋亡的影响。结果MqT法检测显示稳定表达Fcy：：Fur基因的HepG2单克隆细胞经5-Fc处理后，在1、2、3、4、5天时对细胞的增殖有明显抑制作用。AnnexinV—FITC＋PI双标记染色法检测细胞凋亡率：1天为5．74％，2天为11．04％，3天为17．56％；PBS处理的细胞凋亡率：1天为3．67％，2天为3．68％，3天为4．42％，凋亡率无明显改变。结论Fcy：：Fur／5-FC自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的增殖有明显的抑制作用，并可促进肿瘤细胞凋亡。
- 张海清周峰孔凡运李向阳史震孙伟郑葵阳汤仁仙
- 关键词：肝癌
- β_1-肾上腺素受体表达的增加未能保护异丙肾上腺素损伤的大鼠心肌细胞被引量：3
- 2010年
- 本文旨在观察转染β1-肾上腺素受体(β1-adrenoceptor,β1-AR)基因对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)损伤的大鼠心肌细胞收缩功能和存活的影响。采用胶原酶消化法分离培养原代大鼠心肌细胞,转染含β1-AR基因的腺病毒后,用ISO孵育24h致心肌细胞损伤,采用Westernblot检测心肌细胞β1-AR蛋白的含量,通过计数培养细胞中杆状细胞的百分率来检测心肌细胞存活率,用可视化边缘探测系统检测心肌细胞收缩功能变化。结果显示,与对照组相比,转染β1-AR基因的心肌细胞β1-AR蛋白含量明显增加(P<0.01);转染β1-AR基因并用ISO损伤的心肌细胞内β1-AR蛋白含量亦明显增加(P<0.01)。与对照组相比,转染β1-AR基因的心肌细胞存活率没有明显变化,ISO损伤的心肌细胞存活率明显下降(P<0.01);而转染β1-AR基因并用ISO损伤的心肌细胞存活率与ISO组比进一步下降(P<0.01)。与对照组相比,转染β1-AR基因的心肌细胞收缩幅度显著增大(P<0.05),ISO损伤的心肌细胞收缩幅度明显下降(P<0.01);而转染β1-AR基因并用ISO损伤的心肌细胞的收缩幅度与ISO组比没有明显变化。以上结果提示,β1-AR的表达增加对ISO损伤的大鼠心肌细胞的保护作用不明显。
- 王影周峰徐传英孙红
- 关键词：Β-肾上腺素受体心肌细胞异丙肾上腺素
- 白血病红细胞免疫功能的观察
- 1992年
- 我们用多种指标检测27例白血病的红细胞、白细胞免疫功能,并与正常人作了比较。白血病患者红细胞 C_3b 致敏肿瘤细胞血凝检测与红细胞 C_3b 受体检测结果均比正常对照组降低(P<0.01),红细胞免疫复合物检查与循环免疫复合物检查结果均比正常对照组升高(P<0.01),而 CD_3、CD_4、CD_8、CD_(30)也比正常对照组降低(P<0.01)。提示白血病患者红细胞免疫与白血细胞免疫功能均低下。
- 何徐彭田兆嵩韩泽广王玉龙周峰
- 关键词：红细胞免疫功能红细胞C3B受体白血病患者CD30CD4CD8
- MLK3信号通路在癫痫及脑缺血海马CA3区神经元中的不同作用被引量：1
- 2014年
- 目的:研究混合性谱系激酶3(MLK3)信号通路对癫痫及脑缺血海马CA3区神经元的作用。方法 :采用海人藻酸(KA)或四动脉结扎法分别建立大鼠癫痫及全脑缺血模型,运用免疫印迹技术检测在KA注射后及脑缺血再灌注后不同时间海马CA3区MLK3和c-Jun的N端激酶(JNK)的活化水平;采用焦油紫染色,观察大鼠海马CA3区神经元的损伤。结果:KA刺激6 h,癫痫大鼠海马CA3区MLK3和JNK明显激活,1 d后仍维持在较高水平(P<0.05);MLK3和JNK的总蛋白表达并无显著改变。脑缺血大鼠海马CA3区,缺血再灌注后各时间点,MLK3和JNK并未出现明显的活化。此外,大鼠致痫后7 d,海马CA3区神经元大量死亡;缺血再灌注后7 d,海马CA3区神经元并未受到明显损伤。结论:MLK3/JNK信号通路参与了癫痫脑损伤海马CA3区神经元的损伤;但并未介导缺血性脑损伤海马CA3区神经元的存活。
- 李小翠王晓天张清秀尤红娟周峰汤仁仙郑葵阳刘晓梅
- 关键词：癫痫脑缺血再灌注海马CA3区JNK
- miR-383增强SLE患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达被引量：2
- 2011年
- 目的初步探讨microRNA-383（miR-383）对IL-2信号介导的系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Foxp3mRNA转录的影响。方法采用Westernblot方法检测14例SLE患者PBMCs中SOCS3蛋白表达水平，通过相关microRNA软件预测和Westernblot鉴定靶向SOCS3的microRNA，RT—PCR方法检测miR-383转染SLE患者的PBMCs中转录因子Foxp3mRNA的转录水平。结果Westernblot结果发现，SLE患者的PBMCs中SOCS3蛋白表达水平显著增加，miR-383抑制SOCS3蛋白表达。SLE患者PBMCs转染miR-383后Foxp3mRNA的转录水平显著增高。结论miR-383靶向抑制SOCS3，上调IL-2信号介导的SLE患者的PBMCs中Foxp3mRNA的转录水平。
- 史震张庆张海清李小翠郑葵阳周峰
- 关键词：系统性红斑狼疮SOCS3外周血单个核细胞FOXP3MRNA
- MLK3介导的腺病毒表达谷氨酸受体羧基肽段对大鼠缺血性脑损伤的保护作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨大鼠脑缺血再灌注后腺病毒表达谷氨酸受体羧基肽段对海马CA1区神经元的保护和MLK3表达的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、表达病毒处理组、非表达病毒处理组及溶剂组。采用焦油紫染色、免疫印迹检测大鼠缺血再灌注后海马神经元损伤和脑组织MLK3表达的情况。结果表达病毒处理组与缺血再灌注对照组、空载病毒处理组及溶剂组相比,海马CA1区神经元损伤明显减轻,脑组织MLK3表达明显降低(P<0.05)。结论腺病毒表达谷氨酸受体羧基肽段可能通过降低脑组织中MLK3的表达对海马CA1区神经元起保护作用。
- 孙亚峰宋远见周峰刘红芝裴冬生
- 关键词：脑缺血再灌注腺病毒
