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李爽: 作品数：12 被引量：26H指数：3; 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>; 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家重点新产品计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>

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纤维素酶产生菌DR的筛选和优化培养被引量：1: 2007年; 采用刚果红染色法从地热中筛选到1株可以分解纤维素的细菌，命名为DR，对其单菌落进行培养分析，确定其最佳生长条件和最佳产酶条件为：温度37-41℃，pH值6～7，盐浓度1％，1％左右的CMC和蛋白胨，培养时间30～36h。; 李旺刘辉李恒鑫李爽姬生跃杨明明; 关键词：纤维素酶细菌

PRRSV感染继发细菌性病原的致病性及耐药性分析被引量：5: 2021年; 旨在探索感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)后引起继发性严重炎症反应的细菌性病原,以期为疾病的诊断、治疗和预防提供参考依据。从感染PRRSV的猪体内无菌采取胸腔积液,经菌落培养、革兰染色观察、生理生化鉴定、药物敏感性试验、16S rRNA序列比对分析和动物致病性试验,了解病原菌生长特性、菌落形态、生理生化特性、药物敏感性和致病性。结果显示,该分离菌株在普通琼脂平板呈圆形、白色小菌落,血平板呈α溶血,革兰染色为阳性球菌、呈两联或四联,能发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,赖氨酸脱羧酶反应呈阳性,对头孢他啶、头孢呋辛、头孢西啶、苯唑西林高度敏感,对万古霉素、青霉素G不敏感。16S rRNA基因序列分析显示,该分离菌株与NCBI登录的绿色气球菌的同源性高达99%,小鼠攻菌试验表明该分离菌株具有致病性。本试验为进一步探索绿色气球菌的致病机制奠定前期基础,并为动物疾病的诊断、预防和治疗提供技术支撑和实践指导。; 付霞丽郑紫方李洋肖书奇李爽; 关键词：PRRSV 绿色气球菌

谷氨酰t-RNA还原酶基因(hemA)的高效表达被引量：1: 2007年; 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的hemA基因编码谷氨酰tRNA还原酶,该酶是B.subtilis代谢途径中由谷氨酸到5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)反应的限速酶。将B.subtilis的hemA基因克隆到pET28a载体上,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,表达的目的蛋白占总蛋白的20%。通过分离纯化得到谷氨酰tRNA还原酶。重组菌发酵液上清中5-ALA含量达40.2mg/L,菌液呈红色,过筛试验和紫外分光光度检测验证显色物质为卟啉类,实验表明,表达的重组蛋白促进了5-ALA的合成和代谢。; 李爽李恒鑫刘辉袁新宇杨明明龚月生; 关键词：枯草芽孢杆菌 5-ALA

一株猪源肺炎克雷伯菌的分离与鉴定被引量：9: 2021年; 2020年6月陕西某猪场猪大规模发病,表现为精神萎靡、喜卧、不食、呼吸急促、腹泻、肺部有出血点,肝脏肿大。为查明是否有细菌感染,通过细菌分离培养、革兰染色、菌落形态观察、生化试验、药敏试验、16S rRNA基因测序比对、致病性试验,对病原菌进行了分离鉴定。结果,分离到一株革兰阴性短杆菌;该分离菌株在固体LB琼脂平板呈白色、隆起、菌落直径较大的湿润菌落;尿素、七叶苷、乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、山醇、硫化氢、阿糖反应为阳性,赖氨酸反应为阴性;16S rRNA基因序列比对结果显示,该分离菌株与肺炎克雷伯菌的同源性高达99%,确定该菌为肺炎克雷伯菌;药敏结果显示,该分离菌株对抗生素有不同程度的耐药性;耐药基因检测结果显示,该分离菌株具有SHV耐药基因;动物致病性试验显示,该菌能使小鼠死亡,表明该菌具有致病性。上述结果表明,本研究分离到的细菌为猪源肺炎克雷伯菌,为进一步研究肺炎克雷伯菌的特性提供了基础数据,为抗生素的合理使用提供了参考依据。; 付霞丽郑紫方肖书奇李爽; 关键词：肺炎克雷伯菌生化试验药敏试验

高校教学实验室科学管理被引量：4: 2015年; 教学实验室是高校教学中的一个重要环节,承担着全校相关课程的实验实习任务,能否科学运行是实验室管理水平的有效反映。论文初步从建立健全的实验室管理制度、实验室维护管理和实验室管理人员综合能力水平的提高三方面进行探讨。; 李爽乔宪凤; 关键词：教学实验室

猪流行性腹泻病毒S蛋白纳米抗体的筛选与鉴定被引量：3: 2021年; 猪流行性腹泻病(porcine epidemic diarrhea,PED)是一种高度接触性肠道传染性疫病,主要危害1周龄以内的仔猪,仔猪感染死亡率高达100%,是目前危害世界养猪业的主要疫病之一。本研究旨在制备针对猪流行性腹泻病毒S蛋白的特异性纳米抗体并鉴定其结合活性。作者原核表达并纯化PEDV S1蛋白,将纯化后的PEDV S1重组蛋白免疫双峰驼,第4次免疫后分离其外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞RNA,反转录得到cDNA,通过巢式PCR扩增VHH片段,并构建至pCANTAB-5E载体中,电转化至TG1感受态细胞,得到VHH噬菌体抗体展示文库;随后,对构建的噬菌体抗体展示文库进行救援和3轮富集,利用噬菌体展示技术从中筛选针对PEDV S蛋白纳米抗体,通过ELISA验证筛选的纳米抗体的特异性和结合力。通过Western blot和间接免疫荧光验证纳米抗体与PEDV的结合活性。结果显示:成功表达并纯化PEDV S1蛋白,经4次免疫后,双峰驼血清中的特异性抗体效价达到了1∶256000。构建的噬菌体展示文库的库容量为2.1×10^(7),阳性率85%;对噬菌体展示文库3轮的淘选富集后,最终筛选出6株氨基酸序列不同的纳米抗体,ELISA结果显示,6株纳米抗体均对PEDV S1重组蛋白具有良好的结合力与特异性。随后验证了Nb3能够与PEDV结合,表明其具有良好的活性。成功筛选到针对PEDV S1蛋白的特异性纳米抗体,所筛选纳米抗体有望用于PED的诊断和治疗,同时为PEDV的致病机制研究提供抗体材料。; 王天宇李志伟杨婷董林芳马志倩边巴次仁肖书奇李爽; 关键词：猪流行性腹泻病毒噬菌体展示技术

谷胱甘肽对氯化汞致果蝇肠损伤的影响: 2016年; 以模式生物果蝇为模型,研究了谷胱甘肽(1 mmol/L)对氯化汞(400μmol/L)致果蝇肠损伤的影响。结果表明,谷胱甘肽对氯化汞所致果蝇肠道损伤有一定的保护作用。1 mmol/L谷胱甘肽显著抑制400μmol/L氯化汞所致果蝇肠道上皮活性氧的产生、细胞凋亡以及肠道干细胞的分裂。; 乔宪凤陈志李爽; 关键词：氯化汞果蝇谷胱甘肽

谷氨酰t-RNA还原酶基因（hemA）的高效表达及其对5-ALA合成的影响: 氨基乙酰丙酸/(5-aminolevuinic acid，5-ALA/)是生物体内合成四吡咯类物质/(血红素、细胞色素、维生素B/_/(12/)等/)的前体。5-ALA作为光动力药物，可以用来诊断治疗皮肤癌、食道癌等疾病...; 李爽; 关键词：枯草芽孢杆菌 5-ALA; 文献传递

猪Utx慢病毒过表达/干扰载体的构建和病毒包装被引量：1: 2017年; UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表达载体,设计并合成干扰shRNA和阴性对照寡核苷酸片段。其中干扰shRNA及阴性对照通过退火形成双链DNA,并插入pCD513B-U6慢病毒干扰载体。采用双酶切的方法和DNA测序鉴定重组载体。通过干扰和过表达载体质粒共转293T细胞,利用qRT-PCR筛选出最有效的干扰序列。重组质粒与其他3种慢病毒辅助包装质粒(pRsv-Rev、pGag-Pol、pVSV-G)共转染293T细胞包装慢病毒。结果表明,本试验成功扩增Utx基因的全长序列,且成功构建了Utx的过表达和干扰载体。qRT-PCR筛选出pCD513B-U6-Utx-shRNA-3干扰效率最显著,干扰效率为70%。本试验成功包装出慢病毒Lenti-Utx-shRNA、Lenti-NC和Lenti-Utx,测定的病毒滴度分别为6.1×107 TU/mL、4.8×107 TU/mL和3.9×105 TU/mL。此试验为进一步在猪源细胞中进行Utx基因的研究奠定基础。; 闫海龙陈晓旭朱晋生张鹏飞李爽曾文先; 关键词：SHRNA 慢病毒

酸性硫酸钙对临床常见致病微生物的杀灭能力被引量：1: 2021年; 【目的】研究消毒剂酸性硫酸钙(ACS)对微生物的杀灭效果,为用消毒剂防控人畜疫病提供基础数据和理论依据。【方法】将ACS与中和剂(3%卵磷脂、5%吐温-80的磷酸盐缓冲液)共孵育一段时间后,再分别加入大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)共培养一段时间,将与细菌的混合物涂布于营养琼脂平板,置于37℃生化培养箱培养18-24 h;将与病毒的混合物接种于细胞板,在37℃细胞培养箱内培养一定时间,评价中和剂的中和效果。其对照设置和评判标准如下:消毒剂+菌悬液或病毒悬液(第1组),(消毒剂+菌悬液或病毒悬液)+中和剂(第2组),(中和剂+消毒剂)+菌悬液或病毒悬液(第3组),(无菌硬水+菌悬液或病毒悬液)+中和剂(第4组),(无菌硬水+菌悬液或病毒悬液)+PBS(第5组),无菌硬水+PBS(第6组);细菌杀灭试验中和剂效果评价标准:第1组有极少量细菌生长或无菌生长,第2组有菌生长且明显少于第3、4、5组但多于第1组,第3、4、5组细菌数接近且与阳性对照组细菌数接近,第6组无菌生长,3次重复试验均符合上述条件,结果一致,判定所选中和剂及浓度合适;病毒灭活试验中和剂效果评价标准:第1组有极少量病毒生长或无病毒生长,第2组有病毒生长且明显少于第3、4、5组但多于第1组,第3、4、5组病毒生长与原接种量相近,第6组细胞正常生长,3次重复试验结果一致,判定所选中和剂及浓度合适。利用悬液定量杀菌法和测定病毒滴度的方法评价ACS对上述细菌和病毒的消灭效果,将ACS稀释200、300、400、500、600、700倍分别与上述细菌或病毒作用不同时间后加入中和剂进行中和,然后将细菌混合物涂布于营养琼脂平板,通过计算菌落数评价ACS杀灭细菌的效果,测定病毒混合物中病毒滴度评价ACS对病毒的杀灭效果。【结果】所选用的中和剂能够有效地中和ACS 200倍稀释液�; 付霞丽郑紫方马志倩徐乐乐李志伟李洋肖书奇李爽; 关键词：微生物中和剂杀灭效果

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