温桂兰
- 作品数：27 被引量：100H指数：6
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：江西省卫生厅基金国家自然科学基金江西省科技计划项目更多>>
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- 鲍曼不动杆菌的耐药率变迁及CRAB耐药机制研究被引量：4
- 2015年
- 目的分析南昌大学第一附属医院鲍曼不动杆菌的耐药率变迁,并研究耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant acinetobacter baumannii,CRAB)的耐药机制,为临床抗生素的使用提供依据。方法采用VITEK-2-COMPACT全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏测定,分析2010年及2014年南昌大学第一附属医院鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素的耐药分布;同时,选取临床分离的非重复耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌进行耐药机制研究,应用多重聚合酶链反应(PCR)扩增IMP、VIM、OXA-23、0XA-24、0XA-51、OXA-58、IsAba1-blaoxa-23基因,明确该院鲍曼不动杆菌中主要碳青霉烯酶基因表达及其与插入序列IsAba1的关系。结果与2010年相比,2014年检出的鲍曼不动杆菌对大部分临床常用抗生素的耐药率均有上升趋势(除外左氧氟沙星及复方新诺明);随机选取临床分离的非重复耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌70株和1株对碳青霉烯类敏感的敏感株参照株(carbapenemase sensitive acinetobacter baumannii,CSAB)共71株,用7对特异性引物对70株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌和1株敏感对照株进行PCR扩增检测显示,70株CRAB及1株敏感菌株中均携带有OXA-51,而仅在CRAB中检出OXA-23、IsAba1-blaOXA-23基因,敏感对照株中未检出该两个基因表达;OXA-58基因在6株CRAB中有表达,均未检出VIM,IMP,OXA-24基因。结论南昌大学第一附属医院鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素的耐药性有上升趋势,需进一步加强合理使用抗生素,同时耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要耐药基因为bla OXA-23和bla OXA-51,前者可能与bla OXA-23上游存在插入序列IsAba1有关,后者则可能与其上游存在强启动子导致高表达有关,而CRAB耐药与金属酶、OXA-24、OXA-58基因无明显相关性。
- 杨璐康秀华张垂斌温桂兰
- 关键词：鲍曼不动杆菌耐药碳青霉烯类金属酶碳青霉烯酶
- 肺炎病原学诊断的现状与进展被引量：1
- 2008年
- 肺炎病原多种多样,临床上病情也轻重不一。各种感染之间或感染与非感染之间,在临床表现、胸部X线等常有交叉重叠,难以鉴别。因此,病原学检查非常重要,以利于及早明确诊断,有针对性地进行抗菌治疗。近年来人们在不断探索新的、简便易行的病原学诊断方法,同时对一些传统的诊断方法也有了新的认识。
- 郭勇温桂兰
- 关键词：肺炎病原学
- 非典型病原体所致社区获得性肺炎的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨成人社区获得性肺炎(CAP)非典型病原体的构成及有关问题,为临床治疗提供依据。方法收集121例CAP患者急性期和恢复期血清,采用微量颗粒凝集(MAG)法检测肺炎支原体,微量免疫荧光(MIF)法检测肺炎衣原体,间接荧光免疫(IFA)法检测嗜肺军团菌,酶免疫测定(EIA)法检测军团菌尿抗原。结果121例CAP患者共检出非典型病原体28例,其中肺炎支原体19例,是最常见的非典型病原体,其后依次是肺炎衣原体6例,嗜肺军团菌3例,3例阳性病例中军团菌尿抗原检测也是阴性。121例CAP中绝大多数为单一病原体感染,混合感染仅6例。结论肺炎支原体是CAP中同时也是非典型病原体中最多的一种病原体,肺炎衣原体所占比例较高,而嗜肺军团菌检出较少。
- 廖晚珍彭卫华胡雪飞孙爱娣余阳温桂兰陈国华
- 关键词：社区获得性肺炎非典型病原体肺炎支原体肺炎衣原体嗜肺军团菌
- 经支气管镜植入放射性^(125)I粒子治疗中央型肺癌的应用研究被引量：6
- 2011年
- 目的探讨经电子支气管镜(EB)直视下植入放射性125I粒子,近距离内照射治疗中央型非小细胞肺癌(NSCLC)的近期效果。方法术前临床和活检证实NSCLC 65例,125I粒子植入联合NP方案化疗(长春瑞滨+顺铂)23例作为实验组,单纯NP方案化疗42例作为对照组。治疗后6个月根据CT和EB检查,比较肿瘤体积,按国际标准判定疗效。结果6个月后实验组和对照组有效率分别为78.2%(18/23)和42.8%(18/42),χ2=92.61,P<0.01。结论放射性125I粒子植入联合化疗是一种有效的、微创的治疗中央型NSCLC的方法。
- 孙龙华陈国华温桂兰邱峰许飞
- 关键词：电子支气管镜
- 小鼠IL-10重组慢病毒载体的构建和病毒包装被引量：1
- 2011年
- 目的:构建小鼠IL-10重组慢病毒表达载体并进行包装,为进一步研究IL-10基因修饰树突细胞在哮喘免疫耐受中的作用提供实验基础。方法:小鼠IL-10基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,获得PGC-LV-IL-10重组慢病毒并转化细菌感受态细胞。克隆菌落行PCR鉴定,对阳性的重组质粒进行测序并转入293T细胞,荧光显微镜下观察GFP表达并行Western blot鉴定。将重组质粒与慢病毒包装系统一同转染293T细胞进行病毒包装,Real-time定量PCR法检测病毒滴度。结果:DNA测序结果及Western blot鉴定证实成功构建小鼠IL-10重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为2×108TU/ml。结论:成功构建并包装小鼠IL-10重组慢病毒表达载体。
- 陈亮温桂兰许飞
- 关键词：IL-10基因慢病毒载体免疫耐受
- 碱性成纤维细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞对肺微血管内皮细胞的作用被引量：1
- 2016年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肺微血管内皮细胞的作用。方法选用4周龄SD大鼠,分离、培养大鼠BMSCs。实验分6组,A组加入质粒bFGF-pcDNA3.1,B组加入质粒pcDNA3.1,C组加入转染质粒bFGF-pcDNA3.1的BMSCs,D组加入转染质粒pcDNA3.1的BMSCs,E组加入BMSCs,F组加入PBS液,通过与肺微血管内皮细胞在Transwell体系下共培养,共培养24、48、72 h后CCK-8检测肺微血管内皮细胞的增殖情况。Western blot方法检测bFGF蛋白的表达。结果 bFGF基因转染BMSCs后可以大量表达bFGF;C组为肺微血管内皮细胞增殖率最高的组别,其与A、B及F组的细胞增殖率对比,差异均有统计学意义(P<0.05);而与D组及E组相比,虽然差异无统计学意义(P>0.05),但有增高趋势,且随共培养时间延长,增高趋势越明显。结论 BMSCs具有刺激肺微血管内皮细胞增殖的作用,而转染bFGF基因的BMSCs具有更强刺激肺微血管内皮细胞增殖的作用且具有时间依赖性。
- 聂强王鹏温桂兰彭珊珊淦鑫
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞共培养慢性阻塞性肺病
- 慢性咳嗽76例临床分析被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨慢性咳嗽的病因构成特点。方法:回顾了76例慢性咳嗽临床资料,采用慢性咳嗽解剖学诊断程序,对76例持续8周以上患者进行病因初步诊断,并通过诊断性治疗证实。结果:76例慢性咳嗽患者当中,男性36例,女性40例。咳嗽时间平均42个月。71例诊断明确。病因比例依次为鼻后滴流综合征(PNDS)34.6%(26/76),咳嗽变异性哮喘(CVA)26.4%(20/76),嗜酸性粒细胞性支气管炎(EB)23.7%(18/76),胃食道返流性咳嗽(GERC)10.5%(8/76),支气管内膜结核和药物引起的慢性咳嗽各2例,复合病因为5/76,诊断不明5例。结论:PNDS.CVA.EB.GERC是慢性咳嗽的常见原因,应结合病史,症状及相应的实验室检查综合分析,试验性病因治疗是确诊病因重要环节。
- 曾清华温桂兰
- 关键词：慢性咳嗽病因
- 原癌基因Pim-1在非小细胞肺癌中的表达及与细胞凋亡的关系被引量：7
- 2014年
- 目的研究原癌基因Pim-1与非小细胞肺癌病理特征的相关性及其可能的机制。方法检测40例手术切除非小细胞肺癌组织、20例癌旁正常组织中Pim-1表达情况(免疫组化法)及细胞凋亡(TUNEL法)情况,同时免疫组化检测p53这一与细胞凋亡密切相关的抑癌基因在上述组织中的表达情况。结果 (1)Pim-1在非小细胞肺癌中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.01)。(2)Pim-1的表达与TNM分期和淋巴结转移情况有关(P<0.05),而与性别、年龄、病理类型及分化程度无关(P>0.05)。(3)Pim-1、p53均阳性表达者细胞凋亡指数显著低于Pim-1/p53单独表达或两者均不表达者(P<0.05)。结论 Pim-1与非小细胞肺癌发生发展相关,其在非小细胞肺癌发生发展中的作用可能是与p53协同阻碍细胞凋亡。
- 何亚洲温桂兰
- 关键词：PIM-1非小细胞肺癌细胞凋亡P53
- 慢病毒载体介导的TGF-β1基因修饰小鼠未成熟树突状细胞的实验研究
- 2011年
- 目的探讨慢病毒载体介导的转化生长因子β1(TGF-β1)基因修饰小鼠未成熟树突状细胞(iDCs)的方法。方法体外原代培养小鼠骨髓细胞,经粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导以及抗CD11c抗体包被的免疫磁珠分选获得iDCs,取部分iDCs经肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导为成熟DCs(mDCs),用光学显微镜观察细胞形态,流式细胞术分析细胞的表面分子。将iDCs分为感染组[感染携带绿色荧光蛋白(GFP)与TGF-β1基因的慢病毒颗粒]、感染对照组(感染携带GFP、不携带TGF-β1基因的慢病毒颗粒)及空白对照组(未感染慢病毒颗粒)。采用倒置荧光显微镜及酶联免疫吸附试验(ELISA)对各组iDCs中GFP及TGF-β1的表达进行检测。结果经体外诱导培养及免疫磁珠分选后,获得大量高纯度iDCs,随培养时间延长,iDCs表现出典型的树突状形态;iDCs表面MHCⅡ、CD80及CD86表达水平均明显低于mDCs。感染组iDCs中GFP与TGF-β1蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论携有TGF-β1基因的慢病毒成功感染小鼠iDCs,并使其表达目的蛋白。
- 陈亮许飞温桂兰
- 关键词：树突细胞慢病毒感染粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌6种基因及ISAbal插入序列的研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)的基因型特点和与插入序列ISAbal的关系,探讨其耐药机制。方法收集CRAB 70株(非重复)和碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌10株,采用2-巯基丙酸抑制试验检测金属β-内酰胺酶(MBLs);采用多重聚合酶链反应(PCR)扩增blaIMP、blaVIM、blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58、ISAbalOXA-23,扩增产物DNA测序进行比对。结果 70株CRAB 2-巯基丙酸与头孢他啶协同试验全部为阴性(即MBLs阴性),用7对特异性引物对70株CRAB和10株敏感菌进行PCR扩增,所有CRAB均携带blaOXA-23、blaOXA-51,未检出blaOXA-24;1株含有blaOXA-58;80株均不携带blaIMP和blaVIM;插入序列ISAbalOXA-2370株CRAB均有表达,敏感菌均不表达。结论 CRAB的主要耐药基因是blaOXA-51和blaOXA-23;另外,blaOXA-23上游都存在插入序列ISAbal。鲍曼不动杆菌的耐药性与MBLs、blaOXA-24、blaOXA-58无相关性。
- 廖晚珍杨璐温桂兰彭卫华胡雪飞余阳
- 关键词：鲍曼不动杆菌金属酶碳青霉烯酶基因型
