颜奇坡
- 作品数：16 被引量：5H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 中国特有小型猪内源性反转录病毒感染性克隆的构建与鉴定
- 目的猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retrovirus,PERV)是猪-人异种移植及猪源生物制品研发中备受关注的病毒,PERV存在跨种传播感染人源细胞的风险。中国特有小型猪是适合医学实验研究和...
- 马玉媛颜奇坡向思龙吕茂民章金刚
- 关键词：猪内源性反转录病毒感染性克隆异种移植
- ELISPOT检测高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染后猪γ-干扰素的分泌情况被引量：2
- 2010年
- 目的:研究高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染后猪外周血单个核细胞(PBMC)特异性分泌γ-干扰素(IFN-γ)的免疫反应。方法:将仔猪接种PRRSV,于病毒接种前后各时间点分别采血并分离PBMC,采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测PBMC分泌IFN-γ的情况。结果:猪感染高致病性PRRSV后,PBMC分泌IFN-γ的能力明显增强,对照组无明显变化。结论:该结果可为研究高致病性PRRSV致病机理提供参考,为评价PRRSV疫苗诱发的细胞免疫效应提供依据。
- 郑霖马玉媛颜奇坡叶小丽郭逸田克恭章金刚
- 关键词：酶联免疫斑点法猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Γ-干扰素
- 原料血浆中人细小病毒B19的初步检测
- 目的血液与血液制品中人细小病毒B19(human parvovirus B19,HPV B19)的污染越来越受到人们的关注。B19病毒体积微小,没有囊膜,对各种理化条件抵抗力较强,不易去除或者灭活。因此,对B19病毒核酸...
- 颜奇坡赵雄章金刚
- 关键词：原料血浆人细小病毒B19实时定量PCR核酸检测
- 文献传递
- 五指山猪内源性反转录病毒前病毒全基N克隆与序列分析
- 目的：建立五指山猪内源性反转录病毒(PERV)前病毒全基因克隆，并进行序列分析。
方法：将PERV前病毒全基因分为两个大片段分别进行扩增，将两片段依次插入到低拷贝质粒载体pWSK29中，构建得到全基因克隆并测序...
- 马玉媛颜奇坡杨勇贤吕茂民吴健敏田克恭章金刚
- 关键词：五指山猪基因克隆
- 文献传递
- 嗜人性猪内源性反转录病毒感染性克隆感染人胚肾细胞HEK293后Stathmin蛋白差异表达分析
- 2010年
- 目的 分析嗜人性猪内源性反转录病毒（porcine endogenous retroviruses,PERV）感染的人源细胞中Stathmin蛋白的差异表达情况,探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应机制.方法 嗜人性PERV感染性克隆感染HEK293细胞,采用PCR、实时定量RT-PCR、免疫荧光分析确认PERV感染,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹法分析Stathmin蛋白表达差异.结果 嗜人性PERV感染性克隆成功感染HEK293细胞,实时定量RT-PCR和免疫印迹法检测结果表明,PERV感染后Stathmin蛋白与对照相比表达上调.结论 嗜人性PERV感染HEK293细胞后Stathmin表达上调,该研究结果为深入研究嗜人性PERV与人源细胞的相互作用及PERV感染后的分子效应等提供了线索,也提示了PERV感染后可能会对细胞的生长、生理功能等造成影响,甚至存在潜在的致病性.对探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应以及猪→人异种移植的病毒安全性评价也具有重要意义.
- 颜奇坡马玉媛吕茂民叶小丽郑霖吴健敏田克恭章金刚
- 关键词：猪内源性反转录病毒HEK293细胞STATHMIN
- 猪IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan实时定量RT-PCR检测体系的建立被引量：2
- 2011年
- 为了解猪体内细胞免疫应答机制,本研究建立猪细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan实时定量RT-PCR检测体系。以五指山小型猪cDNA为模板,扩增IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的基因保守区,构建相应的重组质粒,并将其作为标准品构建标准曲线。结果显示,各标准曲线的相关系数r值均大于0.990,扩增效率为90%～105%;该检测方法的敏感性较高,IL-4检测下限为1copies/μL,IL-2、IL-10及IFN-γ检测下限达为102copies/μL;重复性较好,批内重复试验与批间重复试验变异系数均小于5%。本研究为病毒感染后猪体内免疫应答等研究提供方法。
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- 关键词：实时定量RT-PCR
- 嗜人性PERV感染性克隆感染人源细胞后Stathmin蛋白表达差异分析
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- 嗜人性PERV感染性克隆感染人源细胞后Stathmin蛋白表达差异分析
- 猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retroviruses,PERV)是猪→人异种移植中倍受关注的病毒。PERV感染人源细胞后虽然没有细胞病变,但这种隐性感染是否会通过潜在的与宿主细胞相互作用引起...
- 颜奇坡马玉媛吕茂民叶小丽郑霖吴健敏田克恭章金刚
- 猪内源性反转录病毒整合拷贝数检测方法的建立
- 本研究的目的是建立猪内源性反转录病毒(porcine endogenousretrovirus，PERV)在基因组中整合拷贝数的检测方法。设计并合成了检测PERV pol基因的引物，采用基于SYBR Green I的实时...
- 马玉媛杨勇贤吕茂民颜奇坡郑霖丁芳吴健敏田克恭章金刚
- 关键词：小型猪猪内源性反转录病毒拷贝数荧光定量PCR
- ELISPOT检测高致病性PRRSV感染后猪γ-干扰素的分泌情况
- 郑霖马玉媛颜奇坡叶小丽郭逸田克恭章金刚
