高荣凯
- 作品数：68 被引量：205H指数：9
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- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划军队医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 血浆置换联合持续血液滤过治疗高脂血症性急性重症胰腺炎临床疗效观察被引量：8
- 2011年
- 目的观察血浆置换联合持续血液滤过治疗高脂血症性重症胰腺炎的效果。方法选择32例高脂血症性重症胰腺炎患者,随机分成两组。治疗组18例在常规治疗的基础上进行血浆置换联合持续血液滤过治疗,对照组14例进行常规内科治疗。比较2组患者住院后禁食时间、住院时间以及实验室数据恢复正常时间。结果治疗组各项指标优先于对照组,具有显著差异(P<0.05)。结论血浆置换联合持续血液滤过是治疗高脂血症性重度胰腺炎的有效方法。
- 杨亚莉史志红许明策李波班志芬赵瑞敏高荣凯樊和明
- 关键词：血浆置换持续血液滤过胰腺炎高脂血症
- 抗HBS-碱性磷酸酶双功能抗体的分析及试用
- 1998年
- 采用Western Blot对表达产物进行分析鉴定,重组抗HBsAg-碱性磷酸酶双功能抗体非还原态分子量为200KD左右,显示其为有活性的双聚体;为了评价重组双功能抗体在临床检测中的应用价值,设计两种ELISA方法,测定其敏感度,并对75例临床标本进行检测,结果与现用试剂盒方法一致,说明其在HBsAg的临床检测中具有较好的应用前景.
- 高荣凯王琰化冰朱迎春刘群英陈宇萍刘克金
- 关键词：碱性磷酸酶双功能抗体
- 9E10单抗Fab基因的克隆及噬菌体抗体的表达
- 2004年
- 高荣凯黎立王欲晓陈晓穗王琰
- 关键词：单抗基因克隆噬菌体抗体
- 用于制备基因Ⅲ缺失的辅助噬菌体的包装菌株的构建
- 2008年
- 目的利用λ噬菌体Red重组酶系统,构建用于制备基因Ⅲ缺失的辅助噬菌体的包装菌株。方法采用PCR方法,将完整的噬菌体基因Ⅲ和氯霉素抗性基因拼接,使其两端带有与四环素基因同源的36nt序列;利用λ噬菌体Red重组酶系统,将其整合到大肠杆菌XL1-Blue的附加体上,以替换掉四环素基因,经氯霉素抗性筛选及PCR鉴定,获得包装菌株XLe-pⅢ;将基因Ⅲ缺失的噬菌体基因组导入包装菌株,制备缺陷型辅助噬菌体,集落形成试验检测缺陷噬菌体的感染能力。结果所构建的包装菌株XLe-pⅢ经氯霉素抗性筛选及PCR鉴定,证明氯霉素抗性基因已与噬菌体基因Ⅲ一同整合到附加体上,重组菌不能在含有氨苄西林的LB培养基中生长,仍保留四环素抗性;该包装菌株能用于制备基因Ⅲ缺失的辅助噬菌体,制备的缺陷型辅助噬菌体的滴度为3.0×108。结论利用λ噬菌体Red重组酶系统,已成功构建用于制备基因Ⅲ缺失的辅助噬菌体的包装菌株,以其制备的缺陷型辅助噬菌体有望用于常规筛选或SIP体系。
- 高荣凯王芃王琰
- 关键词：Λ噬菌体辅助噬菌体
- 免疫捕捉PCR技术及其应用被引量：5
- 2006年
- 通过免疫捕捉结合PCR扩增来检测微量抗原的方法称为免疫捕捉PCR,它的检测对象是完整的病原体,具有非常高的特异性和敏感性,在传染病的诊断、流行病学调查以及环境微生物的检测等诸多领域有着广阔的应用前景。
- 高荣凯苏国富
- 关键词：PCR病原体病毒
- 基因治疗中的动物病毒载体
- 1996年
- 基因治疗是新近发展起来的一种新治疗技术,有着广阔的应用前景,它的迅猛发展与真核细胞基因转移技术的发展密切相关.目前常用的基因转移技术主要有:①病毒方法:包括RNA病毒和DNA病毒载体;②化学方法:如磷酸钙共沉淀法;③膜融合的方法:即利用包被着DNA分子的膜性载体,如脂质体、红细胞膜、原生质体等;
- 高荣凯王琰肖红
- 关键词：基因治疗病毒载体逆转录病毒
- 大肠杆菌CS3菌毛作为表面表达载体的改建
- 1999年
- 高荣凯张兆山李淑琴
- 关键词：肠毒素性大肠杆菌基因工程疫苗工程研究蛋白二级结构生物吸附剂
- 抗银环蛇毒素人源单链抗体的筛选及鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗银环蛇毒素的人源单链抗体(ScFv),并进行鉴定。方法以银环蛇毒素为靶抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性抗体,采用ELISA法检测其结合活性;与抗蛇毒素马血清进行竞争抑制ELISA,检测其中和活性;DNA指纹图谱分析和序列测定确定其抗体类型。结果经4轮筛选,获得了5株对银环蛇毒素具有结合活性的阳性克隆;其中1株结合活性高的单克隆抗体中和活性抑制率可达8.5%;DNA指纹图谱显示为3个不同的ScFv基因,序列分析表明其重链可变区均属于VHⅠ型,轻链可变区分别为VκⅡ、VκⅢ和VλⅡ。结论利用噬菌体抗体库技术获得了具有中和活性的抗银环蛇毒素人源单链抗体。
- 王欲晓周丽君张海荣曲佳乔媛媛赵晓航高荣凯
- 关键词：细菌噬菌体抗体
- 蛋白Ⅲ-α-银环蛇毒素融合蛋白表达质粒的构建及表达
- 2011年
- 目的构建适合选择感染性噬菌体(Selectivelyinfectivephage,SIP)技术筛选的蛋白Ⅲ-α-银环蛇毒素(α-Bungarotox-ins,α-BTXs)融合蛋白表达质粒。方法从银环蛇毒腺中提取总RNA,RT-PCR扩增α-BTXs基因,插入表达载体pTTMIN,转化E.coli XL1-Blue,IPTG诱导表达。经SDS-PAGE、Western blot及竞争抑制ELISA法检测融合蛋白的表达。结果获得的α-BTXs基因序列与相关报道完全一致;融合蛋白表达质粒构建正确;融合蛋白的表达量可达菌体总蛋白的20%,可与抗蛇毒素血清发生特异性反应,且保持了α-BTXs的抗原性。结论成功构建了蛋白Ⅲ-α-BTXs融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白,为利用SIP技术筛选抗α-BTXs人源抗体奠定了基础。
- 高荣凯王欲晓张海荣周丽君曲佳
- 关键词：Α-银环蛇毒素重组融合蛋白质类
- 选择感染性噬菌体技术及应用被引量：1
- 2008年
- 选择感染性噬菌体技术是在传统噬菌体表面展示技术的基础上发展而来的一种新方法,通过将噬菌体感染力的恢复与蛋白间的相互作用偶联起来进行筛选,有效提高了筛选效率,简化了操作过程,降低了本底,为后基因组学的研究提供了便利方法,特别是体内法在理论上适合于库-库筛选,更具有应用价值。
- 高荣凯赵晓航王琰
- 关键词：噬菌体表面展示
