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一种与抗生素调控基因afsk高度同源的新基因——Spy1的克隆被引量：1: 2009年; 普那霉素是由始旋链霉菌产生的一种链阳性菌素类抗生素.目前国外对普那霉素的基因工程研究甚少,国内尚属空白,这阻碍了利用基因工程的方法来提高普那霉素产量的发展.本文通过对普那霉素产生菌——始旋链霉菌柯斯基因组文库的构建和菌落原位杂交,筛选出了与普那霉素高产密切相关的新基因所在的柯斯质粒,并通过酶切分析和Southern杂交确定了该基因所在的酶切片段,对酶切片段进行亚克隆测序,获得了与天蓝色链霉菌中抗生素调控基因afsk同源新基因的全长克隆,该新基因包含有1个2 127 bp的开放阅读框(ORF),编码708个氨基酸的蛋白,命名为Spy1.对该新基因的生物信息学初步分析表明,该基因编码的是丝/苏氨酸蛋白激酶.; 洪小伟金志华金庆超郑喜黄柯梅乐和; 关键词：普那霉素 SOUTHERN杂交

谷氨酰胺转胺酶生产菌种的选育和其基因的表达: 谷氨酰胺转胺酶（蛋白质-谷氨酸-γ-谷氨酰胺转移酶，EC2.3.2.13）是一种能够催化酰基转移的酶，它们广泛分布在各种生物，包括人类、动物、植物和各种微生物体内。通过这种酰基转移反应可以使得体外多种蛋白质、多肽和各种氨...; 黄柯; 关键词：谷氨酰胺转胺酶高产菌株发酵优化菌种选育

基于可拓创新的智慧物流人才培养模式研究被引量：2: 2018年; 基于可拓创新的理论和方法,探讨智慧物流人才的培养模式。通过五位一体协同联动机制,采用"一个中心、两大平台、五个抓手、多维协同联动"的培养模式,调整培养方案和优化课程设置,通过丰富教学手段、优化培养方法、创新教学模式、设计作业任务实现创新培养的路径选择和策略实施。构建动态监督反馈体系密切跟踪培养效果。; 黄柯; 关键词：智慧物流可拓学

多类型“互联网+”物流创新平台的商业模式比较研究被引量：14: 2019年; 数字经济时代,"互联网+"物流创新平台呈现多元化发展趋势。建立主导主体、资本战略的二维框架体系,将平台分为无车承运平台、生态线上线下融合(O2O)平台、软件即服务(SaaS)平台、公共服务平台四种类型。根据不同类型平台切入点和关注点差异,选取C. H. Robinson、货车帮、oTMS、国家交通运输物流信息平台作为研究样本,从目标市场、价值主张、关键资源、价值创造、商业价值、创新/突破、流程整合、赢利模式八个指标入手,比较多类型"互联网+"物流创新平台的商业模式。研究表明:平台类型是商业模式选择的基石,只有与平台类型动态适配、高度契合的商业模式才能保证平台的高质量发展;从价值共创视角分析,平台的价值创造模式将最终以生态系统服务簇的形式动态演化为生态系统包络。平台未来发展的着力点包括锻造数字化供应链、夯实消费者体验、洞察细分市场风口、打造生态赢利模式、高效协同跨界创新、融合创新机制体制。厘清和甄别不同类型的"互联网+"物流创新平台商业模式,对助推数字经济时代平台型物流企业创新升级,培育"互联网+高效物流"领域的独角兽企业,具有独特的理论价值和重要的实践意义。; 黄柯祝建军; 关键词：商业模式

谷氨酰胺转胺酶基因的融合表达被引量：3: 2010年; 运用基因工程手段在大肠杆菌中高效表达谷氨酰胺转胺酶基因。以茂原链霉菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到一条长为1224bp的谷氨酰胺转胺酶基因片段,成功构建原核表达载体pGEX-TGase,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌BL21/pGEX-TGase。重组菌经IPTG诱导产生GST-TGase融合蛋白,并对表达条件进行了优化,应用亲和层析方法纯化融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示目的蛋白获得了较高水平的表达。; 黄柯金志华金庆超洪小伟郑喜; 关键词：谷氨酰胺转胺酶融合蛋白

典型“互联网+”物流平台的经验借鉴及对宁波的启示研究: 2018年; 文章从运营主体视角将"互联网+"物流平台分为政府搭建、企业自建以及社会参与为主三类,分析了国家交通运输物流公共信息平台、INTTRA平台、长江经济带多式联运公共信息与交易平台三个典型案例,在经验借鉴的基础上,从顶层设计、标准化建设、企业创新升级、多主体协同四个方面归纳了对宁波的有益启示。文章的研究有利于促进宁波"互联网+"物流平台高端创新需求的满足与可持续发展。; 黄柯卢山唐斐

PPP项目全生命周期三维风险动态分析模型被引量：5: 2019年; 在PPP项目全生命周期中如何识别、评估和分担风险,已成为PPP项目能否成功实施的关键.基于全生命周期理论,借鉴霍尔的三维结构模型,以多维度、动态分析视角构建PPP项目全生命周期三维风险动态分析模型,并以东部地区某地下综合管廊PPP项目为例进行计算与分析,实现各方利益均衡和综合效用最大化.通过实例论证了模型构建的正确性以及风险分担的科学性和可操作性,对当前我国PPP项目持续稳健发展具有参考借鉴作用.; 黄柯祝建军; 关键词：PPP项目全生命周期理论风险分担

宁波“互联网+”物流平台的现状、成效与瓶颈研究: 2018年; 本文采用实地调研法结合文献研究法排摸了宁波的25个"互联网+"物流平台,在分析运营主体、现有服务功能和数据互联互通需求的基础上,归纳了物流平台取得的一系列成效,从顶层设计、数据共享、产业应用、运营机制、支撑体系视角提出了宁波物流平台所面临的关键瓶颈。本文的研究为制定宁波"互联网+"物流平台的创新发展政策提供了决策依据。; 黄柯徐岱卢山; 关键词：可持续发展

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黄柯