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芹菜AgERF4转录因子基因的克隆与表达分析被引量：3: 2016年; 以‘六合黄心芹’芹菜为材料,克隆出编码乙烯反应元件结合蛋白基因AgERF4。序列分析表明,AgERF4含有1个长度为597 bp的开放阅读框,编码198个氨基酸,预测其蛋白质相对分子质量为21.43 kD,等电点为8.51。进化分析表明,ERF4转录因子在植物中高度保守。AgERF4属于亲水性蛋白。酵母单杂交和β–半乳糖苷酶活性测定结果确定AgERF4转录因子和乙烯应答元件GCC Box具有较高的结合活性。RT-qPCR分析表明,AgERF4在芹菜叶片中的表达水平较高,在根和叶柄中表达水平较低;高温和干旱条件下AgERF4的表达呈先上升后下降的趋势,在盐处理的24 h内AgERF4的表达始终高于对照。AgERF4转录因子在芹菜非生物逆境胁迫调控过程中起着重要作用。; 吴蓓李梦瑶王广龙黄蔚王枫熊爱生; 关键词：芹菜酵母单杂交非生物胁迫基因表达

芹菜赤霉素氧化酶基因AgGA2ox的克隆及非生物逆境下表达分析被引量：6: 2016年; 赤霉素(GAs)对植物生长发育有重要影响,赤霉素氧化酶基因(GA2ox)在GAs合成过程中起重要调控作用。本文从不同芹菜(Apium graveolens)品种‘六合黄心芹’和‘文图拉’中分别克隆得到编码赤霉素氧化酶的基因AgGA2ox,序列分析显示两个品种AgGA2ox基因均包含一个全长996 bp的开放阅读框,编码331个氨基酸,在核苷酸水平上有8个碱基位点的差异,氨基酸水平上有2个位点的差异。AgGA2ox蛋白在‘六合黄心芹’和‘文图拉’两个品种中的相对分子质量分别为37 044.6和36984.5,理论等电点均为8.31。进化分析表明,芹菜Ag GA2ox在植物进化间具有高度保守性,与西洋参(Panax quinquefolius)进化关系最为接近。实时定量PCR显示,AgGA2ox基因表达具有组织特异性,在芹菜叶柄中表达量最高;另外,AgGA2ox基因在4种非生物逆境条件[4°C低温、38°C高温、20%聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)及0.2 mol·L^(-1)NaCl]下均有响应,低温处理下AgGA2ox基因表达为明显上调,高温、干旱和盐处理下AgGA2ox基因表达为下调。‘六合黄心芹’与‘文图拉’AgGA2ox基因在逆境下的表达差异可能与不同品种抗逆性有关。; 冯凯王广龙黄莹徐志胜黄蔚熊爱生; 关键词：芹菜赤霉素非生物逆境

茶树两个Dof转录因子的分离及其在温度胁迫中的响应分析被引量：12: 2016年; 茶树是一种重要的经济作物,温度胁迫对茶叶生产影响较大.本研究以茶树品种迎霜为实验材料,克隆获得2个编码Dof转录因子的基因CsDof1和CsDof2.序列分析显示,CsDof1含有1 389 bp,编码463个氨基酸;CsDof2含有1 458 bp,编码486个氨基酸.CsDof1和CsDof2转录因子都具有典型的锌指结构域,分别位于第133-195和124-186个氨基酸位点之间.对CsDof1和CsDof2转录因子理化性质、亲/疏水性、二级和三级结构分析显示,两者都是亲水性蛋白且显偏碱性.空间结构分析显示,CsDof1和CsDof2均有1个α-螺旋,且Dof结构域的位点完全相同,均有4个半胱氨酸残基.实时定量PCR表明,CsDof1和CsDof2在不同茶树品种、不同温度胁迫下均能诱导表达,且表达呈现差异.; 李辉黄蔚刘志薇王永鑫吴致君庄静; 关键词：茶树锌指结构温度胁迫基因表达

胡萝卜AP2／ERF-B1亚族两个转录因子基因的克隆及其非生物胁迫响应分析被引量：7: 2014年; AP2/ERF是植物中普遍存在的一类重要转录因子,参与植物整个生命周期的生长发育和逆境信号转导。本研究以胡萝卜(Daucus carota)‘黑田五寸’为试验材料,基于其转录组和基因组数据,检索和拼接获得胡萝卜AP2/ERF家族2个转录因子基因序列g39811和g47170。采用RT-PCR方法,分别从‘黑田五寸’中克隆DcERF-B1-1(g39811)和DcERF-B1-2(g47170)转录因子基因。序列分析显示,胡萝卜DcERF-B1-1和DcERF-B1-2转录因子基因分别含有630个和594个开放阅读框,分别编码209和197个氨基酸;均含有相对保守的AP2结合域,具有典型的植物AP2/ERF类转录因子特征。从氨基酸组成成分、理化性质、亲水性/疏水性和三级结构上分析显示,胡萝卜DcERF-B1-1和DcERF-B1-2转录因子亲水性大于疏水性,其氨基酸序列可能属于亲水性蛋白。空间结构分析显示,它们都具有1个α螺旋和3个β折叠。进化树分析显示,二者均属于AP2/ERF家族转录因子中ERF亚族的B1组。实时定量荧光PCR显示,在低温、干旱、盐胁迫的条件下,DcERF-B1-2转录因子比DcERF-B1-1转录因子对逆境的响应更大;在高温的条件下,DcERF-B1-1转录因子比DcERF-B1-2转录因子对逆境的响应更大。; 黄蔚王枫谭国飞徐志胜李梦瑶熊爱生; 关键词：ERF 胡萝卜转录因子

胡萝卜肉桂醇脱氢酶基因的克隆及其对非生物胁迫的响应被引量：5: 2016年; 该实验采用RT-PCR技术,从胡萝卜‘黑田五寸’中克隆获得了编码肉桂醇脱氢酶(Cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)的基因DcCAD。DcCAD序列长1 074bp,编码357个氨基酸。亲水/疏水性分析表明,DcCAD属于亲水性蛋白。系统进化分析显示,DcCAD与番茄CAD(XP_010314515.1)亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,DcCAD基因在胡萝卜根、叶片和叶柄中的表达量差异显著,其相对表达量为叶片>根>叶柄。DcCAD基因对高温(38℃)、低温(4℃)、干旱(20%PEG)和盐(0.2mol·L-1 NaCl)胁迫均有响应,尤其对高温胁迫和低温胁迫响应明显,而且高温处理后1h和低温处理后2h表达量最高。研究推测,DcCAD基因对胡萝卜抗逆性具有一定的作用。; 刘堰珺马静王广龙黄蔚王枫熊爱生; 关键词：肉桂醇脱氢酶同源分析非生物胁迫胡萝卜

芹菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达分析被引量：7: 2016年; [目的]肉桂酰辅酶A还原酶CCR(cinnamoyl-Co A reductase)在植物木质素代谢中起重要的作用,能够将羟基肉桂酸还原生成肉桂醛。本文目的是研究不同芹菜中肉桂酰辅酶A还原酶基因AgCCR在芹菜中组织表达和非生物胁迫过程中的响应情况。[方法]以2个芹菜品种‘六合黄心芹’和‘文图拉’为材料,分别克隆出编码肉桂酰辅酶A还原酶的基因AgCCR。利用荧光定量PCR分析不同芹菜组织和2种芹菜在高温、低温、干旱和盐胁迫下AgCCR的表达情况。[结果]序列分析表明,‘六合黄心芹’和‘文图拉’中AgCCR基因均含有1个长度为1 014 bp的开放阅读框,编码337个氨基酸,二者的核苷酸位点有3个位点的差异,编码的氨基酸有1个位点的差异。对2个芹菜中的AgCCR基因进行多重比对并绘制进化树,发现其编码的氨基酸序列与其他15种植物的CCR蛋白同源性较高,氨基酸高度保守。荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,芹菜AgCCR基因在‘六合黄心芹’和‘文图拉’叶中的表达水平较高,AgCCR基因在高温和低温下表达上调,在干旱处理下表达下调。[结论]芹菜AgCCR基因对多种非生物胁迫均有响应。特别是低温下该基因响应明显,表明AgCCR基因或许与芹菜抗寒机制相关。; 吴蓓李梦瑶王广龙黄蔚熊爱生; 关键词：芹菜非生物胁迫基因表达

胡萝卜抗坏血酸过氧化物酶基因的分离及其对非生物胁迫的响应被引量：8: 2016年; [目的]抗坏血酸过氧化物酶(APX)利用抗坏血酸作为电子供体,清除植物中的过氧化物,在植物应对非生物胁迫中起重要作用。本文目的是研究胡萝卜Dc APX基因在抵御逆境胁迫过程中的响应情况。[方法]以胡萝卜‘黑田五寸’为研究材料,克隆获得胡萝卜Dc APX基因(Gen Bank登录号为KR364573),对该基因进行序列分析,并研究其主要非生物胁迫(高温、低温、干旱和盐胁迫)下的基因表达情况。[结果]序列分析表明,胡萝卜Dc APX基因全长753个碱基,编码250个氨基酸,预估其蛋白质相对分子质量为27.76×103,p I值5.65。进化分析表明,胡萝卜Dc APX在进化关系上与同属伞形科的短果茴芹同源性最高。空间结构分析表明,胡萝卜Dc APX的氨基酸二级结构由38.40%的α-螺旋、10.40%的延伸主链和51.20%的随机卷曲构成。胡萝卜Dc APX的氨基酸三级结构由10个α-螺旋和4个β-折叠构成。实时荧光定量PCR结果显示,胡萝卜‘黑田五寸’中Dc APX基因表达具有组织特异性,在叶中表达量最高。[结论]胡萝卜中Dc APX基因可以响应多种非生物逆境胁迫,在胡萝卜非生物逆境胁迫调控过程中起着重要作用。; 张馨月王广龙黄蔚王枫倪桢燚熊爱生; 关键词：抗坏血酸过氧化物酶基因克隆非生物胁迫胡萝卜

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黄蔚

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