胡慧敏
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部卫生公益性行业科研专项首都卫生发展科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- FISH技术检测胶质瘤患者PTPRZ1-MET融合基因的表达及临床意义被引量：2
- 2017年
- 目的建立检测胶质瘤患者PTPRZ1-MET融合基因的荧光原位杂交（FISH）方法，并探讨其用于标本诊断的可行性。方法本研究取材于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行手术治疗的9例胶质瘤患者，采用双色FISH方法检测肿瘤组织中PTPRZ1-MET融合基因的表达率，并与聚合酶链式反应／Sanger测序（PCR／Sanger）的检测结果进行比较，分析两者的相关性。结果9例患者中，PCR扩增30个和50个循环均未获得目的条带的3例，计为阴性患者；PCR扩增50个循环获得目的条带的3例，计为50个循环阳性／测序阳性（50^＋／Sanger^＋）患者；经过30个和50个循环均可获得目的条带的3例，计为30个循环阳性／测序阳性（30^＋／Sanger^＋）患者。对比FISH与PCR／Sanger检测结果，30^＋／Sanger^＋患者的PTPRZ1-MET融合基因阳性细胞百分率〉20％；50^＋／Sanger^＋患者的PTPRZ1-MET融合基因阳性细胞百分率约为10％；阴性患者的阳性细胞百分率〈5％，各组间的差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论FISH方法检测胶质瘤患者PTPRZl一MET融合基因的表达与PCR／Sanger检测结果具有较好的一致性，可补充或作为患者诊断的初步筛选方法。
- 曾凡姚坤王宽宇黄若愚胡慧敏王永志江涛
- 关键词：神经胶质瘤原位杂交
- 慢病毒介导的异柠檬酸脱氢酶1基因R132H突变过表达抑制脑胶质瘤LN229细胞的成球能力被引量：2
- 2017年
- 目的研究慢病毒介导的异柠檬酸脱氢酶1（IDHl）R132H突变体过表达对脑胶质瘤LN229细胞成球能力的影响。方法构建IDH1 R132H突变型慢病毒载体介导的LN229、U87和}14脑胶质瘤细胞株，经嘌呤霉素抗性筛选，获得稳定表达IDH1 R132H的细胞株，以IDH1野生型（WT）的胶质瘤细胞株为对照。利用荧光显微镜和Western blot的方法检测稳定转染IDH1 R132H细胞株的表达情况。使用无血清培养基培养LN229细胞，并加入B27添加剂、表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）后，观察IDH1 R132H突变对LN229细胞成球能力的影响。结果经测序分析，成功构建了IDH1 R132H突变型慢病毒表达载体。慢病毒包装后体外感染脑胶质瘤细胞株LN229、U87和H4，荧光显微镜下均可见绿色荧光蛋白的表达；Western blot检测结果显示，与转染IDH1 WT对照组相比，转染IDH1 R132H突变型载体的3种细胞株IDH1 R132H均表达阳性；转染IDH1 R132H慢病毒载体的LN229细胞的成球能力较转染IDH1 WT的对照组明显减弱（P〈0．05）。结论慢病毒介导的IDH1基因R132H突变过表达抑制脑胶质瘤LN229细胞的成球能力，IDH1基因R132H突变可能在脑胶质瘤干性中起关键作用。
- 刘玉清胡慧敏江涛
- 关键词：神经胶质瘤慢病毒载体
- 异柠檬酸脱氢酶1突变的原发性胶质母细胞瘤差异表达基因的生物学功能分析被引量：6
- 2016年
- 目的探讨异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）突变的原发性胶质母细胞瘤患者差异表达基因的生物学功能。方法肿瘤标本来自中国脑胶质瘤数据库中2005年1月至2009年12月接受手术切除并随后接受放疗和烷化剂化疗的原发性胶质母细胞瘤患者69例。提取肿瘤组织RNA后进行全基因组微阵列芯片分析；提取组织DNA后进行焦磷酸测序，检测IDH1基因突变状态。按照IDH1基因有无点突变将组织样本分为IDH1突变型和IDH1野生型2组。使用BRB Array Tools对样本的RNA表达谱数据进行分析，得到2组间的差异表达基因。利用组学分析软件OmicsBean对2组的差异表达基因进行生物学功能注释和蛋白互作分子网络分析。结果IDH1突变型与IDH1野生型2组样本中共有525个基因表达的差异有统计学意义，其中在IDH1突变型原发性胶质母细胞瘤中表达水平上调的148个基因主要反映了IDH1突变后能量代谢和蛋白质代谢的变化（如三羧酸循环及多种氨基酸代谢）。而表达水平下调的377个基因主要涉及细胞粘连、细胞外基质与受体的相互作用等生物学过程。结论IDH1突变引起了胶质瘤中能量代谢、蛋白质代谢及一些癌症相关基因表达水平等生物学过程的变化。
- 胡慧敏王政江涛
- 关键词：胶质母细胞瘤异柠檬酸脱氢酶突变生物学过程
- 骨髓间充质干细胞抑制小胶质细胞介导的炎症反应被引量：1
- 2014年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMMSCs)对小胶质细胞介导的炎症反应的抑制作用。方法实验分为四组:组一:小胶质细胞(BV2)生长于DMEM(High Glucose)培养液中;组二:BV2细胞生长于加入脂多糖(LPS)的上述培养液中;组三:BV2细胞、BMMSCs共培养于加入LPS的上述培养液中;组四:骨髓间充质干细胞(BMMSCs)生长于加入LPS的上述培养液中。观察BV2细胞的生长状态、电镜超微结构变化及其分泌的炎症因子TNF-α表达量的变化。结果光镜下BV2细胞密度依次为:组一>组三>组二,组四中BMMSCs生长状态良好;电镜下可见组二BV2细胞内出现大量肿胀及空泡化的线粒体、内质网等细胞器,少见生长活跃多核仁细胞,同时可见大量崩解细胞,组三细胞状态明显好于组二;BV2细胞分泌的炎症因子TNF-α表达量依次为组二>组三>组一>组四。结论 BM-MSCs抑制小胶质细胞介导的炎症反应,进而发挥神经保护作用。
- 张凯华王飞胡慧敏黄华安沂华
- 关键词：骨髓间充质干细胞小胶质细胞炎症反应
- 恶性增殖和浸润性生长相关分子变化在胶质瘤不同病理学分型中的差异被引量：9
- 2016年
- 目的探讨细胞周期改变和细胞迁移及浸润性生长生物学进程和相关遗传学变化在各级别和各分子亚型胶质瘤中的差异。方法收集中国脑胶质瘤数据库中WHOⅡ-Ⅳ级的胶质瘤组织标本300例，分别提取RNA和DNA。利用Sanger测序检测PTEN、p53及端粒酶逆转录酶（TERT）启动子的突变情况，从全基因组RNA微阵列表达谱中调取MET和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达水平。比较PTEN、p53、TERT启动子突变及MET和MMP．9高表达在各级别和各分子亚型胶质瘤中的分布差异。结果（1）在WHOⅡ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤中，PTEN的突变率分别为2．8％（2／72）、5．0％（1／20）及23．0％（20／87），p53的突变率分另0为28．0％（21／75）、10．0％（2／20）及20．7％（18／87），TERT启动子的突变率分别为30．2％（26／86）、47．1％（8／17）及46．8％（29／62）；MET高表达率分别为28．9％（35／121）、33．3％（17／51）及37．5％（48／128）；MMP一9高表达率分别为3．3％（4／121）、39．2％（20／51）及59．4％（76／128）；各级别胶质瘤中PTEN的突变率和MMP-9高表达率的差异有统计学意义（均P〈0．01）。（2）前神经元型、神经元型、经典型和间质型胶质瘤分子亚型中，PTEN的突变率分别为1．9％（1／52）、12．5％（4／32）、15．0％（3／20）及20．0％（15／75），p53的突变率分别为34．0％（18／53）、6．1％（2／33）、40．0％（8／20）及17．1％（13／76），TERT启动子的突变率分别为37．5％（21／56）、34．5％（10／29）、31．3％（5／16）及45．1％（23／51）；MET高表达率分别为25．6％（21／82）、34．5％（19／55）、28．9％（11／38）及40．0％（38／95）；MMP-9高表达率分别为9．8％（8／82）、1．8％（1／55）、44．7％（17／38）及68．4％（65／95）；各分子亚型中PTEN、p53突变率及MMP-9高表达率差异有统计学意义（�
- 胡慧敏刘彦伟江涛
- 关键词：神经胶质瘤病理学分子分型恶性增殖浸润性生长
- BICD货物接头蛋白1基因作为胶质瘤级别进展分子标志物的研究被引量：2
- 2018年
- 目的检测BICD货物接头蛋白1(BICD1)基因在中国人群各级别胶质瘤样本中的表达水平,并探讨其在低级别胶质瘤向高级别胶质瘤进展过程中的潜在作用。方法从中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)的全转录组表达谱芯片数据库和全转录组测序数据库中收集BICD1的mRNA表达数据,结合胶质瘤的世界卫生组织(WHO)级别、分子亚型、患者无进展生存期和总生存期及经典分子标志物的表达与突变数据,分析BICD1表达与胶质瘤的级别进展及恶性程度的相关性。收集WHOⅡ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤组织各10例,提取RNA并反转录为c DNA进行实时荧光定量PCR(qPCR),分析各级别胶质瘤样本中BICD1在转录水平上的表达差异。结果 CGGA全转录组表达谱芯片和全转录组测序数据库中提取的表达数据显示,BICD1的表达水平随着胶质瘤的级别升高而升高(WHOⅢ及Ⅳ级vs WHOⅡ级:t=7.901,P<0.01)。qPCR结果显示较高级别的胶质瘤组织中BICD1的表达水平更高(WHOⅢ级vs WHOⅡ级:t=3.514,P<0.01;WHOⅣ级vsⅢ级:t=2.128,P=0.037 6)。BICD1高表达与胶质瘤患者更短的无进展生存期和总生存期均有关(P均<0.01)。BICD1在前神经元型、神经元型、经典型和间质型胶质瘤样本中的表达水平不同(F=21.8,P<0.01),其中间质型胶质瘤样本中BICD1表达水平最高,前神经元型胶质瘤样本中表达水平最低。BICD1的表达水平与异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变、染色体1p19q联合缺失、人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)突变等指示胶质瘤恶性程度的经典分子标志物相关,其中IDH1突变胶质瘤样本中BICD1的表达水平低于野生型样本(t=7.769,P<0.01)。结论 BICD1可能是指示低级别胶质瘤发生级别进展和恶性进展的潜在分子标志物。
- 胡慧敏李阳芳
- 关键词：肿瘤分期恶性程度
- PDPN蛋白在脑胶质瘤中的表达及临床意义被引量：3
- 2017年
- 目的 分析Podoplanin（PDPN）蛋白在脑胶质瘤患者中的表达,并探讨与患者临床特征及预后的关系.方法 纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划（CGGA）mRNA芯片数据库中301例脑胶质瘤患者的临床资料及mRNA芯片数据,分析PDPN蛋白的表达特征.将298例脑胶质瘤患者按照PDPN蛋白表达量分为高表达组和低表达组,每组各149例.同时以GSE16011 mRNA芯片数据库、TCGA RNA测序数据库及REMBRANDT mRNA芯片数据库作为对照,验证PDPN蛋白在不同数据库脑胶质瘤患者中的表达特征.利用Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归分析评价PDPN蛋白对脑胶质瘤患者预后的作用.通过基因本体（GO）分析获得PDPN蛋白正相关表达基因的功能.结果 在CGGA mRNA芯片数据中,301例脑胶质瘤患者的PDPN蛋白在Ⅳ级脑胶质瘤中表达最高（0.62±0.07,均P＜0.05）,而在Ⅱ级脑胶质瘤中表达最低（-0.59±0.06,均P＜0.05）;297例脑胶质瘤患者中,异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）野生型PDPN蛋白表达量较突变型高（分别为0.48 ±0.07、-0.58±0.07,P＜0.05）.PDPN蛋白高表达组的脑胶质瘤患者累积生存率明显低于低表达组（P＜0.05）.PDPN蛋白的上述特征在GSE16011 mRNA芯片数据库、TCGA RNA测序数据库及REMBRANDTmRNA芯片数据库中均得到相似的结果.多因素分析结果显示,年龄、病理级别、PDPN蛋白表达量和放疗为影响脑胶质瘤患者生存期的独立因素（均P ＜0.05）,可用于预后判断.PDPN蛋白可能与脑胶质瘤细胞的免疫反应、细胞外基质调控、细胞黏附和迁移等生物学过程有关.结论 PDPN蛋白促进脑胶质瘤发展,可作为患者预后判断的指标及潜在的治疗靶点.
- 曾凡王宽宇胡慧敏黄若愚王永志江涛
- 关键词：神经胶质瘤基因表达预后
- 儿童晚期肝母细胞瘤综合治疗的疗效观察
- 目的 通过对儿童晚期肝母细胞瘤患儿的临床治疗结果的回顾总结,探讨晚期肝母细胞瘤的临床疗效及诊疗经验.方法 回顾分析自2006年4个月-2012年8个月北京同仁医院儿科收治的40例经病理确诊及分期明确晚期肝母细胞瘤患儿(男...
- 张伟令韩涛张谊黄东生洪亮王一卓朱霞胡慧敏张品伟易优
- 核糖体结合糖蛋白2在脑胶质瘤中的表达及其在预后评估中的作用被引量：9
- 2018年
- 目的探讨核糖体结合糖蛋白2（RPN2）在脑胶质瘤中的表达模式，以及其与患者的临床特征及预后的关系。方法回顾性分析309例来自中国脑胶质瘤基因组图谱数据库（CGGA）的脑胶质瘤患者的临床资料及其mRNA测序数据，分析RPN2基因的表达模式。对2016-2017年首都医科大学附属北京天坛医院收治的30例脑胶质瘤患者肿瘤样本采用实时荧光定量PCR验证RPN2基因的表达情况。根据RPN2基因的表达水平，将所有样本分为低表达组（154例）和高表达组（155例）。以癌症基因组图谱数据库（TCGA）的mRNA测序数据和REMBRANDT的mRNA芯片数据作为独立验证数据集。采用方差分析和t检验分析RPN2基因的表达特征。应用Kaplan—Meier生存曲线、Log—rank检验以及Cox回归分析方法评价RPN2基因在脑胶质瘤患者预后评估中的作用。通过DAVID软件分析RPN2基因参与的GO生物学过程和KEGG信号通路。结果CGGAmRNA测序数据显示，在世界卫生组织（WHO）Ⅱ、Ⅲ以及Ⅳ级脑胶质瘤中，RPN2的表达水平呈升高趋势（分别为-0．55±0．61、0．05±0．66以及0．36±1．20，P〈0．0001）；实时荧光定量PCR也证实，RPN2的表达水平随胶质瘤WHO等级的升高呈逐渐升高的趋势。在TCGA脑胶质瘤的4个分型中，RPN2在神经元型中表达最低，在间质型中表达最高（分别为-0．80±0．56和0．68±1．02，P〈0．001）。RPN2在IDH突变型脑胶质瘤中的表达低于其在野生型中的表达（分别为-0．22±0．77和0．22±1．18，P〈0．001）。RPN2基因高表达组脑胶质瘤患者的总体生存期小于低表达组（P〈0．001）。RPN2基因的上述特征均在TCGAmRNA测序数据及REMBRANDT mRNA芯片数据集中得到类似的结果。多因素Cox分析显示，RPN2基因的表达水平是脑胶质瘤患者预后的独立预测因子（P=0．004）。RPN2基因可能参与脑胶质瘤细胞的凋亡、分裂、增殖、黏附、血管生�
- 赵征张克难孙思王政王宽宇黄若愚胡慧敏黄华张莹
- 关键词：神经胶质瘤基因表达谱生物学过程
