邱帅
- 作品数：4 被引量：42H指数：4
- 供职机构：杭州市园林绿化股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 麝香百合小孢子母细胞减数分裂进程与花蕾大小相关性研究被引量：7
- 2008年
- 为了探讨花粉母细胞减数分裂进程与花蕾长度的对应关系，并确定诱导2。花粉的最佳时机，以麝香百合雷山（Lilium longiflorum‘Leishan’）的幼嫩花蕾为材料，观察了花粉母细胞的减数分裂过程。结果表明：同一花蕾花粉囊里的花粉母细胞大多处于同一分裂时期。花粉母细胞染色体在间期复制一次后，经历连续两次分裂．最后形成具有单倍染色体数目的花粉粒，属于连续型胞质分裂。花蕾长度与花粉母细胞所处的分裂时期具有对应关系，是估计花粉母细胞发育时期较为可靠的指标。当百合花蕾长度为1．0～2．5cm时花粉母细胞分裂处于旺盛期，花蕾长度为1．5～2．
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- 关键词：麝香百合减数分裂2N花粉
- 东方百合SRAP体系优化及引物筛选被引量：24
- 2013年
- 以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Taq聚合酶及引物浓度进行4因素4水平优化,并在此基础上对Mg2+、引物浓度和退火温度进行了单因素优化。结果表明,东方百合SRAP的最佳体系为:1×Buffer,Mg2+浓度2.7 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5μmol/min,模板DNA 60～100 ng。SRAP两步反应最佳退火温度为第1步35℃,第2步退火59.3℃。最后用‘索蚌’、‘康斯坦撒’和部分F1植株对优化体系进行稳定性检测,发现所筛选出的59对引物在优化的体系下均有稳定的扩增产物。
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- 关键词：东方百合引物筛选
- 东方百合ISSR-PCR反应体系的正交优化被引量：9
- 2012年
- 以东方百合‘Constanta’和‘Sorbonne’以及9份‘Constanta’בSorbonne’的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取百合嫩叶DNA,利用正交设计L16(45)对东方百合ISSR-PCR反应体系的Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs和引物5种因素在4个水平上进行优化试验,采用直观分析结合方差分析评价扩增结果。最终获得的最佳反应体系为:在20μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶0.5μmol/min、Mg2+1.75 mmol/mL、模板DNA 40～100 ng、dNTPs 0.15 mmol/mL、引物0.6μmol/L、10×PCR Buffer 2μL,不足部分以ddH2O补足。在获得最佳反应体系的基础上采用单因素实验确定了引物最佳退火温度范围为55～45℃,最佳循环次数为30次以及延伸时间为1.5 min。应用该优化的反应体系,对‘Constanta’和‘Sorbonne’以及9份‘Constanta’בSor-bonne’的F1代DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示优化的反应体系具有较高的扩增稳定性。
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- 关键词：东方百合ISSR-PCR正交设计
- 基于CE-SRAP标记的榉树优良单株指纹图谱构建被引量：5
- 2016年
- 建立了榉树SRAP分子标记技术体系,并在此基础上结合毛细管电泳技术（CE,capillary electrophoresis）对来自贵州、江西、浙江和日本京都的70个榉树优良单株进行指纹图谱构建和遗传聚类分析。筛选出13对SRAP引物,共扩增出2276个位点,均为多态性条带,多态性百分率达到100%,筛选出的任意一条引物在采用毛细管电泳技术的情况下均可将所有样本区分开。70个优良单株间的遗传距离变化范围为0.0078-0.3772,平均值为0.0629;遗传相似系数在0.9218-0.9565之间,平均值为0.9339,说明种源间遗传距离近,遗传相似性较高。SRAP遗传聚类分析结果显示,榉树的分类依次与其所生长的时间、地理位置以及秋季叶色和叶面光滑程度等性状相关。本研究可以为榉树优良单株无性系的分子鉴定、遗传资源管理及品种保护提供参考依据。
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- 关键词：榉树指纹图谱SRAP标记毛细管电泳技术
