郭晓榕
- 作品数：20 被引量：79H指数：5
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
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- 雨蛙肽诱导的实验性急性胰腺炎细胞模型中酶噬的变化
- 2014年
- 目的 观察雨蛙肽诱导的实验性急性胰腺炎（AP）细胞模型中酶噬的变化.方法 培养AR42J细胞株（胰腺外分泌细胞）,将细胞接种于6孔板培养至90％融合,分为AP组与空白对照组,AP组加入终浓度为1×10-8 mol/L的雨蛙肽建立AP细胞模型,空白对照组加入1640培养液.在雨蛙肽处理后1、4、6、8、12、24 h收集细胞及培养上清液,以ELISA方法检测上清液中炎性因子IL-1、TNFα、淀粉酶及胰蛋白酶原活化肽（TAP）水平.取各组细胞,采用RT-PCR和Western印迹法检测LC3、Beclin-1mRNA和 LC3B蛋白的表达.透射电子显微镜观察各组细胞酶噬小体的变化.组间比较采用方差分析.结果 空白对照组上清液中的IL-1、TNFα、淀粉酶和TAP分别为（18.83±7.10） pg/mL、（14.20±3.79） pg/mL、（10.03±2.85）U/L、（39.48±8.62） pg/mL,AP组在1h时即显著升高至（62.13±11.25） pg/mL,（30.98±7.11） pg/mL、（25.06±6.82） U/L、（128.51±18.30） pg/mL,差异均有统计学意义（F=3.32、3.05、2.90、2.62,P＜0.05或0.01）在4或6h时达到高峰[IL-1在4h为（71.96±15.82） pg/mL,F=7.25,P＜0.01;TNFα在6h时为（39.92±8.94） pg/mL,F=4.93,P＜0.05;淀粉酶在4h时为（28.83±8.31） U/L,F=2.06,P＜0.05;TAP在4h时为（146.29±29.36） pg/mL,F=0.14,P＜0.01],之后逐渐下降趋于稳定,AP组细胞中第4、6h的LC3 mRNA含量为3.18±0.82、1.71±0.14,第1、4h时的Beclin-1 mRNA含量为2.44±0.34、4.13±0.30,较空白对照组（0.21±0.04、0.30±0.08）均明显上升（LC3 mRNA,F=0.79、0.06 ;Beclin mRNA,F=2.31、0.36,P均＜0.05）,其余时间点差异均无统计学意义（P均＞0.05）.电子显微镜下可见AP组自噬体和酶噬小体数目显著多于空白对照组.结论 雨蛙肽诱导AP细胞模型时伴有酶噬的发生,提示酶噬可能参与了AP的发病机制.
- 李洁刘晓吴敏郭晓榕湛先保
- 关键词：急性胰腺炎自噬胰蛋白酶原
- 我国重症急性胰腺炎临床救治现状与思考被引量：7
- 2011年
- 经过国内外学者的共同探索和努力,重症急性胰腺炎的治疗理念日趋完善,疗效有显著提高,尤其是内镜和微创技术的广泛应用,带来了重症急性胰腺炎治疗策略上的变化.但仍面临着巨大的历史挑战如何进一步规范重症急性胰腺炎的治疗,提高救治成功率,同时真正规范地开展相关临床科研,提高该领域的研究质量。
- 郭晓榕李兆申
- 关键词：胰腺炎重症急性胰腺炎内镜治疗循证医学
- 高容量血液滤过对重症急性胰腺炎的治疗作用被引量：12
- 2009年
- 目的:观察高容量血液滤过(HVHF)治疗重症急性胰腺炎(SAP)的临床疗效,评价其在SAP治疗中的作用,探索治疗SAP的新方法.方法:采用回顾性对照临床研究,将我院2004-12/2008-12因SAP住院治疗的患者45例分为2组:对照组24例,HVHF组21例.所有患者均符合2004年中国急性胰腺炎诊治指南(草案)中SAP的诊断标准,发病后48h内入院,经CT证实均无明确胆道梗阻.自动生化检测仪检测2组SAP患者治疗前后血清淀粉酶及肾功能、常规检测血常规、CRP等,记录生命征、腹部症状并统计并发症及死亡率.结果:与对照组相比,HVHF组患者的APACHEⅡ评分明显降低,治疗第3天与第7天HVHF组显著低于对照组(6.6±1.5vs9.9±2.5,3.4±1.1vs6.4±2.0,均P<0.05);局部症状与体征缓解时间明显缩短,HVHF组腹痛缓解时间较对照组明显缩短(51±16hvs71±34h,P<0.05);腹部压痛缓解时间与对照组相比也显著缩短(71±16hvs102±34h,P<0.05);血尿淀粉酶指标、WBC、CRP及肾功能生化指标明显好转;并发症发生率和死亡率均降低(14.3%vs37.5%,4.8%vs20.8%,均P<0.05);平均住院时间显著缩短(P<0.05);住院费用无明显增加.结论:HVHF能迅速减轻SAP患者腹部症状与体征,改善器官功能,显著改善预后,其机制可能通过阻断SAP早期全身炎症反应综合征.
- 郏建臣程斌郑要初郭晓榕
- 关键词：重症急性胰腺炎全身炎症反应综合征高容量血液滤过
- 重症急性胰腺炎新分类再评价的单中心临床研究被引量：14
- 2014年
- 目的 探讨新的急性胰腺炎（AP）分类标准的临床应用价值.方法 回顾性分析2005年1月至2012年12月收治的649例重症急性胰腺炎（SAP）患者资料,按新的分类标准将其分为中度AP（MSAP）和重度AP（SAP）,比较两组患者的Ranson、APACHEⅡ、BISAP、MCTSI、Marshall评分,器官衰竭发生率,临床治疗情况,预后及病死率.结果 649例传统分类的SAP患者按照新分类标准分为MSAP559例和SAP 90例.两组患者的性别、年龄、病因差异均无统计学意义.新分类的MSAP患者入院时的Ranson、APACHEⅡ、BISAP、MCTSI、Marshall评分分别为（1.5±1.3）、（7.6±4.8）、（1.6±0.9）、（6.0±1.8）、（0.0±0.4）分,新分类的SAP患者分别为（3.4±1.7）、（16.8±5.7）、（2.7±0.9）、（6.9±2.1）、（4.3±2.0）分,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.01）.MSAP患者发生呼吸衰竭1例次,肾脏衰竭1例次,循环衰竭0例次,发生2个脏器衰竭0例,3个脏器衰竭1例,新分类的SAP患者分别为30、23、l例次和20、11例,两组差异具有统计学意义（P值均＜0.01）.新分类的SAP患者需要入住的重症监护病房（ICU）、血液净化、机械通气、介入引流、外科手术等例数的百分比均显著高于MSAP组,且需要时间也长于后者,两组间的差异均有统计学意义（P值均＜0.01）,但两组患者需要肠内营养支持的例数差异无统计学意义.新分类的SAP患者的院内病死率为35.6％（32/90）,显著高于MSAP组的2.0％（11/559）,平均住院时间为（36.3 ±30.2）d,也显著长于MSAP患者的（23.0±18.8）d,两组间的差异均具有统计学意义（P值均＜0.01）.结论 采用新的AP分类方法能更精确地反映病情的严重程度,更准确地判断预后并指导临床治疗.
- 宋新苗杜奕奇陈燕董元航于齐宏湛先保郭晓榕李兆申
- 关键词：胰腺炎国际疾病分类法预后
- 稳定表达EGFP-LC3的AR42J细胞系的建立被引量：2
- 2015年
- 目的 建立稳定表达增强型GFP （EGFP）-LC3的AR42J细胞.方法 利用慢病毒过表达载体Lentiviral-EGFP-LC3包装成慢病毒,感染大鼠胰腺腺泡细胞AR42J.以Lentiviral-EGFP感染作为阴性对照.通过倒置荧光显微镜观察及流式细胞分析仪检测病毒感染效率,蛋白质印迹法检测稳定传代细胞株的LC3蛋白表达.用毒胡萝卜素处理细胞建立内质网应激模型,采用蛋白质印迹法检测应激的AR42J细胞的LC3、PERK蛋白表达.结果 AR42J细胞的Lentiviral-EGFP-LC3感染效率＞85％,并能稳定传代.Lentiviral-EGFP-LC3感染的AR42J细胞的LC3 mRNA表达量为未感染细胞的（9.14±0.32）倍;LC3蛋白阳性表达并有EGFP-LC3融合蛋白的表达.Lentiviral-EGFP感染的AR42J细胞的LC3 mRNA表达量为未感染细胞的（1.08 ±0.07）倍,无LC3蛋白表达,仅有GFP表达.与未感染组比较,EGFP-LC3组的LC3 mRNA表达显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,而EGFP组的差异无统计学意义.结论 成功构建了稳定表达EGFP-LC3的大鼠胰腺外分泌细胞AR42J,为进一步研究急性胰腺炎与自噬的关系提供了新的细胞模型.
- 吴敏李洁刘晓李钦芳郭晓榕湛先保
- 关键词：慢病毒感染自噬细胞系
- HBx基因影响HepG2细胞生物学特性及DNA修复酶hMTH1、hMYHα与hOGG1表达的实验研究
- 目的：
(1)观察HBx基因对HepG2细胞增殖、周期和凋亡等生物学特性的影响，初步探讨细胞周期蛋白p21在其中的作用和意义。
(2)观察构建的HBx转基因细胞模型HepG2/HBx中8-OHdG含量及DNA...
- 郭晓榕
- 关键词：生物学特性
- 文献传递
- 器官功能维护在1064例重症急性胰腺炎救治中的价值研究
- 目的重症急性胰腺炎(SAP)起病凶险,常合并多器官功能不全(MOF),因此脏器功能维护是早期治疗的焦点问题。本研究通过总结长海医院近10年的SAP救治经验,探讨器官功能维护在SAP救治中的作用。方法本研究为回顾性临床研究...
- 杜奕奇李兆申湛先保董元航陈燕于齐宏郭晓榕郭杰芳
- 文献传递
- HBx基因对HepG2细胞DNA修复酶表达的影响被引量：1
- 2009年
- 乙型肝炎病毒X基因（HBx）可通过与宿主细胞的多种蛋白相互作用，参与肝细胞癌（HCC）的发生和发展。但其详细机制尚未完全阐明。8羟基鸟嘌呤是一种具有高度致突变作用的DNA氧化损伤产物，可导致G／C到T／A的碱基置换，进而诱发基因突变和肿瘤发生。人DNA修复酶1（hOGG1）可特异性地切除和修复DNA双链中与碱基C配对的80HdG；
- 程斌郭晓榕郑要初林松挺黎培员
- 关键词：HOGG1HEPG2细胞
- 暴发性胰腺炎合并急性肺栓塞两例临床分析被引量：3
- 2012年
- 重症急性胰腺炎（SAP）发病急骤，变化迅速，病情危重而复杂，其早期并发症包括急性肾功能衰竭、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）、腹腔问室隔综合征（ACS）、后腹膜出血等，发病72h内出现致命性并发症称暴发性胰腺炎（FAP）。有关SAP合并急性肺动脉栓塞在国内外报道较少，但该并发症一旦出现，预后极差，因此需要引起医护人员的高度重视。本文报道2例FAP合并急性肺动脉栓塞的病例，并进行文献复习，以供临床参考。
- 董元航谢沛杜奕奇湛先保陈燕郭杰芳于齐宏郭晓榕李建萍李兆申
- 关键词：暴发性胰腺炎急性肺栓塞急性呼吸窘迫综合征急性肺动脉栓塞早期并发症急性肾功能衰竭
- DNA修复酶hMTH1在乙型肝炎病毒x基因致人肝细胞系L02细胞恶性转化中的意义被引量：1
- 2008年
- 目的通过转基因细胞模型L02／HBx观察乙型肝炎病毒x基因（HBx）对DNA修复酶hMTH1转录表达的调控及其对人肝细胞系L02细胞生物学特性的影响。方法传代培养稳定表达HBx的转基因细胞模型L02／HBx及空白对照组L02细胞和空载体对照组L02／pcDNA3．1细胞，倒置显微镜下观察各组细胞的形态学特征，以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法、流式细胞术检测各组细胞增殖、细胞周期和凋亡状况，并进行软琼脂克隆形成实验观察细胞的恶性转化能力。同时应用实时定量PCR测定各组细胞DNA修复酶hMTH1的表达水平。结果镜下观察发现L02／HBx细胞与对照组L02细胞相比形态发生明显改变。MTT法显示L02／HBx细胞生长速度比两对照组显著加快。流式细胞术结果表明，HBx可加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡。软琼脂克隆形成实验发现L02／HBx细胞的克隆形成率明显高于L02细胞和L02／pcDNA3．1细胞（P〈0．05）。实时定量PCR检测发现hMTHI在L02／HBx细胞中的表达显著高于L02细胞和L02／pcDNA3．1细胞（P〈0．05）。结论HBx可诱导L02细胞发生恶性转化，在此过程中DNA修复酶hMTH1可出现反应性的上调表达。
- 程斌郑要初郭晓榕林松挺黎培员
- 关键词：乙型肝炎病毒X基因恶性转化
