陈丽萍
- 作品数：53 被引量：55H指数：4
- 供职机构：中山大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学文化科学更多>>
- 表观遗传修饰在氧化-抗氧化平衡调控中的改变及作用被引量：1
- 2014年
- 机体氧化-抗氧化平衡对维持正常的生物学功能起着重要作用，外源刺激会打破该平衡，导致体内ROS的过量蓄积并诱导多种疾病的发生。表观遗传修饰通过影响ROS产生、清除及氧化还原平衡调控通路中关键分子的表达，从多个方面参与机体氧化-抗氧化平衡的调控，并在氧化应激相关疾病的发生发展中起着重要的作用。探讨表观遗传修饰在氧化-抗氧化平衡调控中的改变及其作用，为阐述外源刺激诱导机体氧化-抗氧化失衡及疾病发生的机制拓展了新的方向。
- 马璐陈丽萍陈雯
- 关键词：表观遗传ROS
- 细胞体外恶性转化过程中差异甲基化基因的筛选被引量：2
- 2011年
- 目的 筛选细胞体外恶性转化过程中差异甲基化基因,为毒作用效应以及肿瘤化学预防、生物监测寻找潜在的表观遗传生物标志物.方法 利用苯并[a]芘[B（a）P]诱导水生化人支气管上皮细胞（HBER）转化模型和猿猴空泡病毒小T抗原（SV40 ST）诱导HBER转化模型,采用甲基化DNA免疫沉淀-全基因组扩增法富集基因组甲基化DNA,应用甲基化芯片技术和信息学分析方法,寻找不同作用因素诱导细胞转化的共同差异甲基化基因,通过RT-PCR法检测这些基因在B（a）P诱导HBER细胞转化过程中mRNA表达水平的变化.结果 芯片检测发现,HBER、染毒后末转化细胞株（HBERNT）和转化细胞株（HBERT）中甲基化基因的数目分别为733、661、738个,83个基因在染毒前呈非甲基化状态,而在转化前和转化后呈甲基化状态,在这83个基因中,有25个基因在SV40ST诱导HBER转化细胞株（HBERST）中同样发生高甲基化.其中,序列相似性家族178A（family with sequence similarity 178,member A,FAM178A）、视黄酸受体应答子（他扎罗汀诱导）[retinoic acid receptor responder（tazarotene induced）,RARRES1]、泛素特异性肽酶28（ubiquitin specific peptidase 28,USP28）、Scm-like with four mbt domains 2（SFMBT2）、序列相似性家族59A（family with sequence similarity 59,member A,FAM59A）和核受体亚家族4组A3（nuclear receptor subfamily 4,group A,member 3,NR4A3）等6个基因在B（a）P诱导HBER细胞转化过程中mRNA表达水平下降.结论 细胞体外转化过程中筛查出来的特定基因高甲基化,可能成为化学毒物暴露监测及肿瘤预测的生物标志物.
- 曾君玲张波杨萍肖勇梅魏青王庆李道传邢秀梅陈丽萍陈雯
- 关键词：致癌物细胞转化DNA甲基化基因扩增
- 蛋白磷酸酶2AB5613全酶调控氯化镉诱导肝细胞毒性的作用研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨蛋白磷酸酶2A（proteinphosphatase2A，PP2A）B56β全酶调控CdCl2诱导肝细胞毒性的作用及其机制。方法采用改良四甲基偶氮唑盐（M啊比色法检测CdCl2对人正常肝细胞（L-02）、黄曲霉素诱导转化细胞（L-02RT—AFB1）及肝肿瘤细胞（Bel7402）的毒性，利用病毒感染法在L．02或Bel7402上构建丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶B（AKT）低表达（L-02SHAKT）、B56p低表达（L．02SHB5613）和B56p高表达（L-02RT-AFB1-B5613、Bel7402．B56p）的细胞株。在浓度为0、20、40、80、160μmol/L的CdCl2处理下，检测人正常肝细胞、转化的肝细胞和肝肿瘤细胞的相对细胞活力。在2．5、5．0μmol/L的渥青霉素和40μmol／LCdCl3共同作用下检测L-02细胞中各蛋白相对表达量。采用Westemblot法检测这些细胞株中B56B、金属硫蛋白（metallothionein，MT）、AKT、AKT磷酸化（P．AKT）的表达水平。结果在40μmol／LCdCl：作用下，L．02RT。AFB，和Bel7402细胞中MT表达水平分别为0．12±0．02、0．06±0．06，低于对照组（0．92±0．14）（F=I148．16，P〈O．001）。在40μmol／LCdCl2作用下，AKT干扰细胞株L．02SHAKT-1、L-02SHAKT．2中p-AKT水平分别为0．08＋0．02、0．08±0．05，低于对照组（0．18±0．15）（F=724．70，P〈O．001）；两种细胞MT的表达水平均为0．62±0．16，高于对照组（0．22±0．14）（F=94．73，P〈O．001）。在2．5、5．0μmol／L渥青霉素和40μmol／LCdCl：共同作用下，L-02细胞中D．AKT的表达水平分别为0．28±0．07、0．15±0．11，低于未用渥青霉素处理组（0．52±0．11）（F=578．57，P〈0．001）；MT的表达水平分别为1．62±0．80、1．08±0．15，高于未用渥青霉素处理组（0．69±0．18）（F=12．34，P〈O．001）。在40μmol／LCdCl2作用下，B56p低表达细胞株L．02SHB5613．1、L-02SHB5613—2中β—AKT的表达水平分别为0．57±0．13、0．59±0．02，高于对照细胞L-02SHGFP（
- 张劲苗马璐王珊陈雯陈丽萍
- 关键词：金属硫蛋白细胞毒性
- 代谢酶基因甲基化修饰调控的研究
- 目的：体外毒性评价系统的代谢酶活性低下是现代毒理学研究和安全性评价的瓶颈问题，然而相关机制仍不清楚。以往研究提示表观遗传机制可能在其中扮演重要的角色。本课题利用体外培养人源细胞系和小鼠原代培养细胞代谢酶失活模型获得代谢酶...
- 柏青陈丽萍陈雯
- 外周血miRNA表达改变是苯暴露致遗传损伤的潜在生物标志被引量：3
- 2016年
- 目的探究mi R-34a与mi R-146a的表达水平与苯暴露工人DNA损伤的关系。方法按照纳入和排除标准选取80名苯暴露组工人及91名非暴露组工人,收集研究对象的基本情况,采集工人血、尿样本,以HPLC-MS/MS检测尿的苯代谢产物苯巯基尿酸(SPMA)反映苯暴露水平,彗星实验检测DNA损伤,RT-PCR方法检测mi R-34a和mi R-146a的表达。结果暴露组工人外周血彗星实验tail DNA%、tail moment、olive tail moment结果均高于非苯暴露组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。与非苯暴露组相比,暴露组工人的mi R-34a表达量上调,mi R-146a表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析发现,mi R-34a的表达与DNA损伤的相关无统计学意义;mi R-146a的表达与tail DNA%、tail moment、olive tail moment均存在负相关,有统计学意义(P<0.05)。结论苯接触会导致工人外周血中mi R-34a和mi R-146a表达水平的改变,是苯暴露致DNA损伤潜在的早期效应标志物。
- 张欣洁肖勇梅魏青陈丽萍何志妮王庆张波孙清陈韵聪杨爱初黄明
- 关键词：MIMIR-146ADNA损伤
- 利用CRISPR/Cas9技术构建CYP2E1基因敲除的HEK293FT细胞系被引量：1
- 2017年
- 目的:利用CRISPR/Cas9系统在HEK293FT细胞系中敲除CYP2E1基因并探讨其在检测化学物毒性中的应用。方法:设计3对分别靶向CYP2E1基因第2、第3和第7外显子的sg RNA序列并构建PX461表达载体;将携带靶向CYP2E1的sg RNA表达载体转染至HEK293FT细胞中,通过SURVEYOR检测分析sg RNA的切割效率;利用有限稀释法获得CYP2E1敲除细胞株,通过实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测细胞株中CYP2E1的敲除效果;并检测其对N-(4-羟基苯基)乙酰胺和1,2-二氯乙烷的细胞毒性效应的影响。结果:SURVEYOR检测分析靶向CYP2E1基因第3外显子的sg RNA的切割效率为23%;成功构建了2株CYP2E1基因敲除的细胞株,实时荧光定量PCR结果显示CYP2E1 m RNA表达下降,蛋白印迹结果显示CYP2E1蛋白无表达;CYP2E1基因敲除会显著降低N-(4-羟基苯基)乙酰胺和1,2-二氯乙烷的细胞毒性。结论:通过CRISPR/Cas9构建出CYP2E1稳定敲除的肾细胞系,为研究CYP2E1的功能和作用机制提供了有效的工具。
- 范启明李若碧王飞郭涛王婷李道传邢秀梅陈丽萍陈雯王庆
- 关键词：CYP2E1基因敲除
- 含B56调节亚基的PP2A全酶在肿瘤信号通路中的调控作用
- 2011年
- 蛋白磷酸酶2A（protein phosphatase 2A,PP2A）是细胞中广泛表达的异三聚体全酶,调节许多重要的信号通路,它的表达异常所致的信号通路紊乱会引发肿瘤和促进肿瘤的发展.PP2A在特定的状态下能够发挥抑癌因子的作用,这种抑癌特性由B调节亚基与底物的相互作用来决定,因此B调节亚基在PP2A的抑癌功能中起关键作用.
- 朱小年陈丽萍陈雯
- 关键词：蛋白磷酸酶2A
- 人体细胞转化模型建立及其应用
- 本研究通过构建一系列基因改造的人上皮细胞株，利用已知的化学致癌物诱导细胞转化，构建转化不同阶段的细胞模型，应用于致癌物诱导细胞恶性转化活性的筛查、化学致癌表观遗传机制以及DNA损伤修复研究.利用逆转录病毒载体介导的基因转...
- 赖延东曾君玲李志芳陈雯李道传陈丽萍杨萍肖勇梅王庆张波魏青林育纯
- PP2A B56亚基调控DNA损伤修复的作用研究
- 目的:组蛋白H2AX磷酸化形成γH2AX是DNA损伤的早期事件。γH2AX作为DNA损伤起始信号,募集修复相关蛋白和周期蛋白到损伤位点,同时激活细胞周期检查点,阻滞细胞周期;在损伤修复结束后,γH2AX必须去磷酸化,否则...
- 陈丽萍赖延东朱小年肖勇梅张波王庆陈雯
- 文献传递
- 原代小鼠肝细胞培养方法的比较被引量：3
- 2016年
- 目的:比较3种不同培养条件下原代小鼠肝细胞的形态以及肝细胞功能,寻找适合于原代小鼠肝细胞体外培养的培养基配方。方法:采用改良Seglen两步胶原酶灌注法分离原代小鼠肝细胞,糖原染色观察细胞纯度,在贴壁4 h后用基础培养基、基础培养基加DMSO(DMSO组)、基础培养基加DMSO和EGF(DMSO+EGF组)等3种不同的条件培养肝细胞。镜下观察肝细胞形态,用MTT法检测细胞活力,生化分析仪检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平以及用ELISA法检测细胞培养上清液中白蛋白水平。结果:成功分离小鼠原代肝细胞,肝细胞纯度达95%以上;原代肝细胞培养至96 h时,DMSO组仍能较好地维持细胞形态,基础培养基组的细胞活力比DMSO组和DMSO+EGF组分别降低了66.87%和67.16%(P<0.05),且基础培养基组的LDH水平均高于DMSO组和DMSO+EGF组(P<0.05)。此外DMSO组在96 h时仍能维持较高水平的白蛋白分泌,比基础培养基组和DMSO+EGF组分别增加了185%和24.2%(P<0.05)。结论:小鼠原代肝细胞培养基中加入DMSO对于维持肝细胞的形态和功能有促进作用,本研究为体外原代肝细胞培养模型的建立和优化提供了实用的方法。
- 王珊柏青王方萍李慧瑶陈燊何志妮王庆陈雯陈丽萍
- 关键词：小鼠表皮生长因子
