陈少琅
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:南方医科大学生物技术学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 抗ANXA2单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2014年
- 目的制备ANXA2特异性单克隆抗体(McAb),为研究ANXA2的生物学功能和检测该蛋白提供有力的抗体工具。方法用经IPTG诱导表达的基因重组PGEX-4T-1-ANXA2抗原免疫BALB/c小鼠.利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法筛选抗ANXA2杂交瘤细胞,用ELISA法鉴定所得单抗腹水的效价及Western blot鉴定McAb特异性。单抗纯化和Eu3+标记后,分别包被聚苯乙烯板及作为铕标单抗,利用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)筛选出检测ANXA2蛋白的最佳配伍单抗。结果经细胞融合、筛选、克隆化,获得了16株可分泌高效价单抗的杂交瘤细胞,间接ELISA显示16株McAb与空载体PGEX.4T.1均未发生交叉反应.抗体特异性良好.16株抗体腹水效价为1:8000,1:256000,培养上清效价为1:256~1:512,纯化的腹水单抗经配对试验,2D6和9H9-Eu3+配对最佳。结论获得16株能稳定分泌高特异性抗ANXA2的杂交瘤细胞.能用于后续研究。
- 尹江丽陈少琅万勇李明
- 关键词:单克隆抗体ELISA
- 狂犬病毒核蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒研制被引量:4
- 2013年
- 目的研制狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立RV NP TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒准确度好,线性范围为5~2 500mEU/mL,灵敏度为1.018mEU/mL,精密度良好,分析内精密度为2.7%~9.3%,分析间精密度为3.5%~12.2%。将15份疫苗样品用本法与国内常用ELISA检测试剂盒同时检测,其相关系数r为0.85,稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定半年,37℃稳定7d。结论试剂盒各项已检测指标达到临床检验要求,有望进一步作临床检测试验。
- 黄黉林冠峰陈少琅刘天才李明吴英松
- 关键词:狂犬病毒核蛋白
- 人附睾分泌蛋白4光激化学发光免疫分析法的建立被引量:1
- 2015年
- 目的采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人附睾分泌蛋白4(HE4)的方法。方法用两株配对的HE4单克隆抗体,一株HE4单克隆抗体包被受体微球,另一株HE4单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂。结果自制HE4试剂分析灵敏度为0.81 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3%~7.2%和6.1%~7.7%,均低于10%,与癌抗原15-3(CA15-3)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)无明显交叉反应,120份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,其相关系数为0.95。结论自制HE4光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。
- 肖俐霞林冠峰陈少琅吴英松
- 关键词:免疫分析
- 血清人附睾分泌蛋白-4(HE4)时间分辨免疫荧光分析检测试剂的研制被引量:4
- 2014年
- 目的利用时间分辨免疫荧光分析技术(TRFIA)建立血清人附睾分泌蛋白-4(HE4)的检测试剂。方法采用双抗体夹心法建立血清HE4-TRFIA检测试剂并对试剂的各项指标进行评价。结果HE4-TRFIA检测试剂的灵敏度为0.73pmol/L,测量范围为0.73~1000pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.6%~7.5%和8.3%~14.4%。与CA15.3、CEA、AFP、HBsAg和CA125无交叉反应。317份正常女性血清标本测试结果提示本试剂的正常参考值范围是0~90pmol/L。与进口的同类试剂检测,检测结果的相关系数R^2为0.976。结论本HE4-TRFIA检测试剂各项指标均能达到临床检测要求,可望替代国外同类产品用于临床检测。
- 陈少琅万勇张琼周健伟徐伟文吴英松
- 人附睾分泌蛋白4(HE4)及癌抗原--125(CA125)双标记时间分辨荧光免疫分析定量检测试剂的研制
- 研究背景及目的 卵巢癌是最常见的妇科肿瘤之一,其致死率占各类妇科肿瘤的首位。国际癌症研究机构的数据显示,估计2008年的新发病率为6.3/10万,死亡率为3.8/10万。我国肿瘤登记地区资料表明,2009年我国卵巢...
- 陈少琅
- 关键词:时间分辨荧光免疫分析
- 文献传递