谢春
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金：国家生猪现代产业技术体系建设项目国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪流行性腹泻病毒HeB10/2014株的分离与鉴定被引量：6
- 2016年
- 为确定2014年河北某猪场哺乳仔猪群腹泻的病原,本研究从该发病猪场采集了22份临床样品,采用PCR方法进行腹泻病原的检测。结果显示其中17份样品为猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性,而猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)均为阴性。选取其中5份PEDV阳性样品在Vero细胞中进行病毒的分离,结果显示,仅一份样品在接种细胞24 h后即可观察到细胞病变。对病变细胞进行RT-PCR及间接免疫荧光鉴定均为PEDV阳性。将分离的病毒株命名为He B10/2014。将其在Vero细胞中传至F5代次后病毒增殖明显增快,病毒滴度于感染细胞24 h达到峰值。对分离株的S基因进行克隆和测序分析,结果显示该病毒分离株符合国内近年来流行病毒株S蛋白的变异特征,即在S蛋白中存在4个连续氨基酸的插入(^(59)QGVN^(62))和3个氨基酸的缺失(^(14)0N和^(163)NI^(164))。本研究结果表明分离获得的HeB10/2014株为国内近年来新的PEDV流行株。
- 王康王鑫杨德强侯怡轩谢春虞凌雪姜一峰杨莘高飞李丽薇黄勤峰童光志周艳君
- 关键词：猪流行性腹泻病毒
- 猪流行性腹泻病毒SHpd/2012株S蛋白的表达鉴定被引量：1
- 2017年
- 猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种可致仔猪严重腹泻的高度接触性肠道传染病。S蛋白在病毒感染和入侵宿主细胞的过程中具有重要作用。为了研究S蛋白的特点,本研究扩增了PEDV新流行毒株SHpd/2012的纤突蛋白S基因分段片段S11、S12、S13、S21和S22,将得到的目的片段导入原核表达载体pGEX-6P-1中,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达、鉴定,获得了正确的PEDV S的分段蛋白S11(24-277aa)、S12(272-571aa)、S13(560-797aa)、S21(793-1109aa)及S22(1102-1384aa),为后续单克隆抗体的制备和致病机制的研究奠定了基础。
- 谢春王康王鑫赵玉婷丁思嘉谢洋洋童光志周艳君杨志彪
- 关键词：S基因克隆
- 仔猪感染猪轮状病毒的鉴定及基因分析被引量：6
- 2014年
- 为弄清2013年年初上海某猪场发生的仔猪腹泻疫情病因,本研究随机采集发病猪场的仔猪腹泻样品9份,利用RT-PCR方法对采集样品进行病原检测。结果显示,9份临床样品中有4份为猪轮状病毒阳性,而猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒均为阴性。根据GenBank公布的猪轮状病毒参考株序列设计两对引物,对其中阳性样品的VP6和VP7基因进行RT-PCR扩增、基因克隆和序列测定分析。结果显示,4份阳性样品的VP6基因大小为1356 bp,VP7基因大小为1100 bp;序列分析结果显示,VP6基因与A群代表株OSU的氨基酸同源性为64.1%~87.0%,与代表株Gottfriend的氨基酸同源性为26.3%~60.8%;VP7基因与不同G型代表株的氨基酸同源性为71.8%~97.3%。根据上述结果分析,我们推测引起此次仔猪腹泻疫情中的主要病原是由属于A群G9血清型的猪轮状病毒引起,本研究为此次仔猪腹泻疫情的诊断提供了依据。
- 苏雪侯怡轩王康虞凌雪程群谢春姜一峰杨志彪李云章童光志周艳君
- 关键词：猪轮状病毒VP6基因VP7基因
