高超
- 作品数：12 被引量：33H指数：3
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金吉林省教育科学规划课题公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 猪圆环病毒2型ORF2基因原核表达蛋白间接ELISA检测方法的建立及初步应用
- 猪圆环病毒2型/(Porcine circovirus type 2,PCV2/)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征/(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS/)等相关...
- 高超
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达间接ELISA方法
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒的制备被引量：7
- 2014年
- 为了制备鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒,本试验通过RT-PCR技术扩增出鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株JL株的VP2全长基因,并将其插入杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTA中,构建含有IBDV VP2基因的重组供体质粒pFast-VP2,转化DH10Bac E.coli感受态细胞中,经蓝白斑筛选,获得重组杆粒rBacmid-VP2,将重组杆粒rBacmid-VP2转染sf9细胞后得到重组杆状病毒vBac-VP2。rBac-VP2感染sf9细胞,提取DNA,经PCR电泳分析,得到1条与预期大小相符的特异性条带;间接免疫荧光检测,可见特异性荧光;Western-blotting分析,在大约53 000处出现1条特异性的蛋白条带;电镜观察感染重组杆状病毒的细胞上清和沉淀,均可见重组VP2蛋白自行组装形成的病毒样颗粒。试验结果表明IBDV VP2基因在昆虫细胞中得到了表达,并自组装成了IBDV病毒样颗粒。本试验为研制鸡传染性法氏囊病病毒样颗粒疫苗奠定了基础。
- 李芹王建忠黄楚荻穆昱周玉龙高超杨闽楠赛度丁壮
- 关键词：鸡传染性法氏囊病毒VP2真核表达病毒样颗粒SF9细胞
- 犬单核细胞分离和T细胞转化试验中最适PHA浓度测定
- 根据外周血液中各种细胞密度不同,采用密度梯度离心法,利用淋巴细胞分离液成功分离出单核细胞.淋巴细胞体外培养时,受到非特异性刺激因子的刺激,转化为淋巴母细胞.采用MTT比色法,测定OD值,计算SI≥2时所在组浓度即为最适P...
- 高超张晓东钱爱东
- 关键词：T淋巴细胞动物疫苗
- 文献传递
- 吉林省部分地区猪圆环病毒2型感染的血清学调查被引量：4
- 2010年
- 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对吉林省部分地区5个猪场的300份猪血清样品进行猪圆环病毒2型(PCV2)血清抗体的检测。检测结果,被检猪场中血清抗体总阳性率为51.67%,5个地区猪场均检测出阳性猪。其中30日龄内仔猪阳性率为12.77%;种公猪总阳性率为56.19%;经产母猪总阳性率为67.80%。结果证实,吉林省不同地区猪场均存在PCV2感染,且比较严重。
- 高超高瑞峰肖冲胡桂学
- 关键词：猪圆环病毒2型ELISA试验血清
- 猪圆环病毒2型ORF2基因原核表达蛋白间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- [目的]建立一种检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。[方法]从已构建的克隆质粒pMD-ORF2上酶切回收ORF2基因的羧基端部分ORFc片段,克隆到pGEX-6P-1表达载体上,构建原核表达质粒pGEX-ORFc,转化入大肠杆菌BL21进行原核表达,用Western-blot法检测纯化蛋白,将其作为抗原包被酶标板,优化间接ELISA试验条件,从而建立检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。[结果]重组表达质粒的酶切鉴定证明已成功构建重组表达质粒pGEX-ORFc,其在E.coliBL21中诱导5、6 h时表达效果最好。纯化后的蛋白条带与原重组菌位置一致均在40.0 kD处,证明重组蛋白得到良好纯化。试验确定抗原最佳包被浓度为12.85μg/m l,血清稀释度为1∶40。3次重复检测表明,变异系数最大为7.12%。[结论]建立的ELISA方法对检测PCV2感染具有良好的特异性及重复性。
- 高超肖冲高瑞峰胡桂学
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达ELISA
- 新城疫病毒3′及5′末端非编码区序列的反向遗传研究
- 2014年
- 以新城疫病毒(NDV)LaSota株感染性克隆PCI-La为平台进行反向遗传操作,并利用PCR技术将其3′端和5′端非编码区分别替换为鹅源NDV NA-1株3′端和5′端非编码区,以及3′端和5′端非编码区同时替换,通过生物学软件DNAStar对替换后的序列进行比对分析,所替换的序列未出现基因突变现象,证明非编码区替换成功,从而分别获得3株突变全长感染性克隆pCI-rL-NL、pCI-rL-NT、pCI-rL-NL-NT;将所获得的这3株突变感染性克隆分别与辅助质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L共转染BSR细胞,进行重组病毒的拯救。结果显示,pCI-rL-NL、pCI-rL-NT两种质粒表达系统均可拯救到有感染活性的病毒粒子,其HA效价为24,23,HI试验及间接免疫荧光试验结果均为阳性,并且通过电镜观察到具有典型副黏病毒科特征的、有囊膜的NDV颗粒。本试验成功构建了2株NDV LaSota突变株的反向遗传操作系统,为后期进行重组NDV致病性的研究奠定基础,也为进一步研究筛选新型分子标记疫苗、病毒活载体疫苗和抗病毒药物提供了可能。
- 李想高超李芹王建忠杨闽楠王泽张晓东丁壮
- 关键词：NDV拯救
- 断奶仔猪多系统衰竭综合征间接ELISA方法的建立及应用研究
- 胡桂学姜海龙冷雪崔晓华高超于清祥胡哲刘岩王锐王政业周英周亚宽赵金红
- 该研究采用无PCV污染的PK-15细胞，从来自吉林某猪场具有PMWS典型临床症状和剖检特征的死亡仔猪体内分离到1株病毒，经电镜负染观察、间接免疫荧光试验和PCR技术鉴定为PCV_2，并命名为PCV_2-JL01株。设计P...
- 关键词：
- 关键词：克隆ORF2基因猪圆环病毒2型
- 款冬功效成分提取及生理功能研究
- 以款冬叶为原料,超声波辅助提取总黄酮、总皂苷、总多糖,用Design-Expert8.06软件设计分析得到最佳的提取条件。并将提取的总黄酮、总皂苷、总多糖进行纯化或脱色处理,将处理后的款冬叶总黄酮、总皂苷、总多糖用于降脂...
- 高超
- 关键词：降脂抗氧化免疫
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型ORF2基因原核表达蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用被引量：16
- 2008年
- 对含有已构建的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET-ORF2s的BL21菌进行诱导表达,纯化重组蛋白包涵体,Western-blot检测纯化蛋白,将其作为抗原包被酶标板,优化间接ELISA试验条件,建立可检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。用该方法对吉林省多个种猪场收集的179份血清样品进行检测,总阳性率为42.5%。由此说明,本试验建立的PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,适用于大规模猪场血清学检测。
- 高超高云航么乃全胡桂学
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达间接ELISA
- 一例马小肠蛔虫阻塞致死的病例报告
- 2016年
- 2015年9月16日中午，九台市于某饲养12岁青色公马前来就诊。患马于今日上午外出拉车，卸车后，患马起卧不安，有时想打滚，时而拉少量粪便，近日，该马曾有腹痛，在粪便中可见蛔虫。
- 孙强高超吕岩丁雪梅成军肖冲
- 关键词：病例报告蛔虫小肠粪便腹痛
