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家蚕二分浓核病毒VD1-ORF4基因在两类表达系统中的表达分析: 2015年; [目的]为获得家蚕二分浓核病毒(Bm BDV)VD1-ORF4编码的可溶性蛋白,对该序列在两类表达系统中进行表达。[方法]在原核系统中,将靶基因克隆入载体p MAL-c2X中,使麦芽糖标签序列与靶基因5’端融合,将融合后的重组质粒转化大肠杆菌BL21,进而对其进行IPTG诱导,对诱导后的表达产物进行Western blotting分析;在真核表达系统中,以笔者实验室改造的Ac-Bacmid为分子载体,通过转座,将多角体启动子控制的VD1-ORF4表达盒定点插入到载体中,在脂质体的介导下,将整合型重组杆粒转染Sf-9细胞,将转染上清感染Sf-9细胞,并对其总蛋白进行Western blotting分析。[结果]在两类表达系统中,都只鉴定到Bm BDV VD1-ORF4部分序列的表达,其融合表达产物大小都约70 kDa。[结论]获得Bm BDV VD1-ORF4截短蛋白,为其功能研究奠定基础。; 李国辉周倩徐五胡朝阳姚勤; 关键词：杆状病毒

非物质文化遗产传承方式创新与发展研究——以宋代点茶项目为例被引量：1: 2023年; 宋代点茶在中国茶史上具有举足轻重的地位,因历史渊源与当代努力,宋代点茶已列入镇江市润州区非物质文化遗产名录。本文通过对宋代点茶的传承现状进行研究,发现由于受众少、点茶粉难获取、点茶课程宣传力度小等问题,使得点茶的传承与发展遭遇瓶颈。建议增强“非遗+”观念并灵活运用数字化技术、有效衔接网络媒体平台、加大政策扶持等,从而促进更多的非物质文化遗产在新时代进行有效传播。; 周倩李宁馨石宝岩

丝氨酸蛋白酶在昆虫先天免疫中的功能和作用机制研究进展被引量：5: 2017年; 昆虫先天免疫系统包括细胞免疫和体液免疫。细胞免疫主要通过昆虫血液中的浆细胞对入侵的微生物进行吞噬;体液免疫比较复杂,涉及到昆虫体内许多蛋白质之间的相互作用,其中丝氨酸蛋白酶及其同源物与血淋巴黑化和抗菌肽合成等过程密切相关,如参与胞内酚氧化酶原及Toll免疫信号途径的激活等,因而在昆虫的体液免疫中发挥着重要作用。本文就昆虫丝氨酸蛋白酶及其同源物的类型、结构与功能以及家蚕丝氨酸蛋白酶的研究进展进行综述,为促进家蚕、蜜蜂等经济昆虫先天免疫的分子机制研究提供参考。; 唐琦周倩邱立鹏李东李国辉; 关键词：昆虫丝氨酸蛋白酶分子结构先天免疫家蚕

家蚕二分浓核病毒可恢复基因组末端结构的复制系统研究: 家蚕二分浓核病毒(Bombyx mori bidensovirus,BmBDV)归属2012年ICTV新设立的二分DNA病毒科,它是动物二分体病毒.BmBDV具有高度的宿主组织特异性,主要感染家蚕中肠柱状上皮细胞,能使家...; 张盼盼胡朝阳张晓龙周倩姚勤

病毒非经典途径合成蛋白质的分子机制: 2015年; 病毒增殖过程涉及到病毒与宿主蛋白之间复杂的相互作用。为充分利用病毒基因组的有限资源,使病毒基因组编码的蛋白质数量最大化,除经典途径之外,病毒还可通过非经典途径来合成蛋白质。现就非经典途径中,对病毒蛋白质合成的起始、延伸以及终止过程的类型及特征进行综述,为深入研究病毒蛋白质合成的分子机制及抗病毒分子靶标的开发提供参考。; 李国辉周倩胡朝阳唐琦邱立鹏姚勤; 关键词：病毒基因蛋白质

家蚕二分浓核病毒ns1基因序列的改造、表达和鉴定: 2017年; 探讨翻译起始区(TIR)部分密码子发生同义突变后,对家蚕二分浓核病毒(BmBDV)ns1基因表达的影响,以及对BmBDV NS1蛋白毒性进行鉴定,设计特异性上游引物,对BmBDV ns1基因中第3、4、9和10个密码子进行同义突变,利用原核表达系统对野生型和改造后的ns1序列进行表达,通过SDS-PAGE电泳对这两种序列的表达产量进行分析。利用Protein Iso^(TM)GST Resin从超声破碎的菌液上清中纯化融合有GST的NS1蛋白,进而对纯化的靶蛋白在细胞水平和家蚕体内进行毒性分析。结果表明:TIR突变后的BmBDV ns1序列,其与野生型序列的表达产量之间没有明显差异;BmBDV NS1蛋白具有抑制细胞增殖和诱导家蚕致死的生化活性。; 徐五周倩胡朝阳李国辉姚勤; 关键词：翻译起始区 NS1蛋白

果蝇先天免疫分子机制研究进展被引量：5: 2015年; 以果蝇为模式生物,在胚胎发育、基因表达调控、疾病发病机制以及昆虫先天免疫等方面的研究发挥了重要的作用。果蝇的先天免疫系统包括细胞免疫和体液免疫,当其遭受细菌、真菌和病毒等病原体攻击时,果蝇能通过细胞吞噬、集结、包囊作用以及产生抗菌肽等方式来清除入侵的微生物。结合近年来果蝇先天性免疫分子机制的研究进展,对其在病原体识别、信号转导途径及效应机制方面进行综述,为深入研究家蚕、蜜蜂等经济昆虫的免疫机制以及提高它们的经济效益提供参考。; 李国辉周倩胡朝阳唐琦邱立鹏姚勤; 关键词：果蝇先天免疫体液免疫细胞免疫

磷酸化病毒蛋白的生物学功能及形成机制被引量：2: 2015年; 磷酸化是病毒蛋白常见的一种翻译后修饰,在调控病毒与宿主的代谢中起重要作用。生物体内的代谢活动与细胞内的信号转导密切相关,通过磷酸化和去磷酸化修饰可改变蛋白生物活性,从而调控胞内生物信号的传递。磷酸化修饰的病毒蛋白参与调控病毒复制、病毒增殖和病毒粒子装配等一系列病毒的代谢活动,同时也影响宿主细胞内的信号转导,抑制宿主基因组复制和表达。本文就病毒蛋白的磷酸化修饰位点、其生物学功能及磷酸化修饰的分子机制进行综述,为病毒感染性疾病的防控治疗及药物开发提供参考。; 李芒芒周倩王鹏李国辉; 关键词：病毒蛋白磷酸化修饰信号转导代谢调节

利用优化改造的家蚕杆状病毒表达系统提高NS1表达产量被引量：1: 2015年; 为优化家蚕杆状病毒表达系统,提高外源基因的表达产量。文中通过同源重组技术,用串联的氯霉素基因(Cm)表达盒和绿色荧光蛋白基因(egfp)表达盒将其替换,从而获得Chitinase和Cystein Protease两个基因缺失的家蚕杆状病毒载体。通过转座,将多角体启动子控制的家蚕二分浓核病毒(Bm BDV)ns1基因表达盒,定点插入到改造后的该分子载体中。将重组载体转染Bm N细胞,获得能表达家蚕二分浓核病毒(Bm BDV)NS1的缺失型重组病毒;另外,将多角体启动子控制的ns1基因转座到野生型Bm-bacmid中,获得能表达Bm BDV NS1的野生型重组病毒。将这两种病毒分别皮下注射家蚕,对感染后的家蚕血液中NS1表达水平进行比较,发现缺失Chitinase和Cystein Protease重组病毒感染的家蚕血液中,NS1的表达量是对照组的3倍,从而建立了一种高效表达可溶性NS1蛋白的方法,为靶蛋白的结构与功能研究奠定基础。; 李国辉李芒芒周倩胡朝阳唐琦姚勤; 关键词：NS1

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周倩