田思
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 硫利达嗪诱导人卵巢癌细胞凋亡及其机制研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨多巴胺受体阻断剂硫利达嗪(thioridazine)对卵巢癌细胞株SKOV3、A2780增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法用不同浓度硫利达嗪(0、5、10、15、20μmol/L)作用SKOV3、A2780细胞,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪及DAPI染色检测细胞凋亡,DCFH-DA法染色检测ROS水平,彗星实验观察细胞核DNA损伤情况,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,Western blot检测P53、Bax、Bcl-2、细胞色素C、active Caspase-3蛋白的表达。结果硫利达嗪可抑制人卵巢癌细胞SKOV3、A2780的增殖,呈一定的剂量效应关系(P<0.05),浓度为15μmol/L时,可产生明显增殖抑制效应;流式细胞仪检测显示处理组(15μmol/L硫利达嗪作用24 h)凋亡率明显高于对照组(P<0.05);DAPI染色结果:处理组出现明显细胞核固缩、碎裂及凋亡小体;DCFH-DA染色处理组ROS水平升高(P<0.05);彗星实验结果提示处理组出现明显的DNA损伤;JC-1染色发现处理组线粒体膜电位较对照组下降(P<0.05);Western blot实验发现处理组P53、Bax、胞质细胞色素C、active Caspase-3表达上调,Bcl-2、线粒体细胞色素C表达下调。结论硫利达嗪可能通过诱导细胞内ROS升高损伤DNA,激活线粒体凋亡途径而诱导人卵巢癌SKOV3、A2780细胞凋亡。
- 雍敏田思朱江胡丽娜于廷和
- 关键词：硫利达嗪活性氧物质DNA损伤线粒体凋亡途径
- 胶质瘤对MPPa-PDT敏感性研究中ABCG2的作用被引量：1
- 2017年
- 背景与目的:三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)在多种肿瘤细胞中表达,能通过外排抗癌药物参与肿瘤耐药。本研究的目的旨在探讨人胶质瘤细胞对焦脱镁叶绿酸甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤效应的敏感性及其与ABCG2的关系。方法:选取处于对数生长期的胶质瘤细胞株U87、A172,分别经MPPa-PDT或MPPa-PDT+烟曲霉毒素C(fumitremorgin C,FTC)处理后,采用CCK-8法检测细胞活性;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞内ABCG2的表达;流式细胞技术法检测未光照前各组细胞内MPPa的含量;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果:MPPa-PDT能抑制A172、U87细胞的活性,且呈一定的光能量依赖性,A172达到半数致死量所需光能量密度为U87的8倍;A172较U87细胞对MPPa-PDT不敏感;A172细胞内高表达的ABCG2影响MPPa在细胞内的聚集;抑制ABCG2后,不仅可以增强MPPa-PDT对A172细胞的杀伤作用,同时可增加MPPa-PDT触发产生的ROS的量及细胞对MPPa的摄取。结论:人胶质瘤细胞株A172对MPPa-PDT相对不敏感,并且产生这种现象的机制可能是ABCG2外排MPPa,减少MPPa的细胞内聚集,进而减弱光敏剂活化后对肿瘤细胞的杀伤作用。
- 潘黎田思张利林海丹苟慧陈青李开庭白定群孔渝菡欧云生虞乐华
- 关键词：三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2光动力疗法胶质瘤
- 光敏剂MPPa介导光动力诱导人乳腺癌细胞MCF-7的内质网应激途径凋亡被引量：1
- 2015年
- 目的探讨光敏剂MPPa(pyropheophorbide-a methyl ester)介导的光动力作用于人乳腺癌细胞MCF-7,诱导内质网应激途径凋亡的机制。方法给予不同浓度光敏剂MPPa(0、0.5、1、2、4μmol/L),以及不同能量光照(0、0.9、1.8、2.7、3.6 J/cm2)处理MCF-7细胞,用CCK-8法检测细胞活力。确定2μmol/L MPPa及1.8 J/cm2光能量为实验剂量。激光共聚焦显微镜观察光敏剂MPPa(2μmol/L)内质网亚细胞器定位。将MCF-7细胞进行完全随机化分组,分为MPPa-PDT组(给予2μmol/L MPPa及1.8 J/cm2光能量)、空白对照组、单纯MPPa组(2μmol/L MPPa)和单纯光照组(1.8 J/cm2光能量)。应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞的凋亡率。Flou-3/MA流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度变化。Western blot检测内质网应激标志蛋白BIP和内质网应激途径相关凋亡蛋白caspase-12、CHOP的表达。结果 MPPa介导光动力对MCF-7细胞有显著杀伤作用,抑制其生长,且抑制作用呈明显的剂量效应关系(P<0.05);MPPa可富集在内质网上;MPPa-PDT组凋亡率显著高于各对照组(P<0.05);MPPa-PDT组细胞内Ca2+荧光强度较对照组增高(P<0.05);Western blot检测发现BIP、caspase-12、CHOP蛋白在MPPa-PDT组中各时间点表达升高,而在各对照组中表达较低。结论 MPPa介导的光动力可诱导MCF-7细胞发生内质网应激途径凋亡。
- 朱江陈青田思贾功伟白定群虞乐华
- 关键词：内质网应激凋亡光动力治疗
- Mppa介导的光动力疗法诱导人卵巢癌细胞凋亡
- 2015年
- 目的探讨焦脱镁叶绿酸甲酯(methyl pyropheophorbide-a,Mppa)介导的光动力疗法(Mppa-PDT)抑制人卵巢癌SKOV3细胞活性、触发其凋亡的机制。方法将处于对数生长期的人卵巢癌SKOV3细胞随机分为Mppa-PDT处理组(加光敏剂Mppa和LED光照处理)和对照组(空白对照、仅加光敏剂Mppa单药对照、仅接受LED单光对照)。Mppa-PDT作用于人卵巢癌SKOV3细胞后,CCK-8法检测细胞活性;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DAPI染色观察细胞凋亡的核的形态学改变;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(ROS)的产生;单细胞凝胶电泳观察DNA损伤情况;蛋白质印迹法检测p53、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达变化。结果 (1)Mppa-PDT能显著抑制人卵巢癌SKOV3细胞的活性,其抑制作用具有一定的剂量依赖性;(2)Mppa-PDT诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡率高于空白对照、单药对照和单光对照组(P<0.05),且空白、单药、单光3组对照组间凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);(3)Mppa-PDT作用于人卵巢癌SKOV3细胞后,DAPI细胞核荧光染色可见细胞核深染的凋亡细胞;DCFH-DA荧光染色发现Mppa-PDT组细胞内ROS水平高于3个对照组;单细胞凝胶电泳显示Mppa-PDT组的DNA损伤情况高于3个对照组;蛋白质印迹法检测发现p53、Caspase-3、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论 Mppa介导的光动力疗法能够抑制人卵巢癌SKOV3细胞活性并诱发其凋亡,且伴随有DNA损伤及线粒体凋亡途径的激活。
- 田思雍敏朱江陈青白定群虞乐华于廷和
- 关键词：光动力疗法活性氧DNA损伤线粒体凋亡途径
- 芦荟大黄素复合光动力处理对人乳腺癌细胞抑制增殖和促进凋亡的体外观测被引量：9
- 2014年
- 目的探讨芦荟大黄素(aloe emodin,AE)介导的光动力对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法 AE介导的光动力(PDT)作用于人乳腺癌细胞株MCF-7,采用CCK-8法检测细胞增殖状态;Hoechst细胞核染色观察细胞凋亡的形态学变化;Anne-V/PI双染流式细胞技术检测细胞的凋亡率;DCFH-DA染色检测活性氧物质(ROS)产生;JC-1染色检测线粒体膜电位变化情况;Western blot检测Caspase-3、Bcl-2蛋白表达的变化。结果 AE介导的光动力作用显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞的生长,其抑制作用呈一定的剂量效应关系(P<0.05);AE介导的光动力作用人乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡和继发性坏死的比率均显著高于单纯光照射组、单纯AE光敏剂处理组和空白对照组(P<0.05),而后3组间无明显差异(P>0.05);AE介导的光动力在能量密度为12 J/cm2(药物浓度10μmol/L,光功率密度40 mW/cm2持续照射时间为300 s)作用后Hoechst细胞核荧光染色可观察到细胞核固缩、碎裂,可见凋亡小体;DCFHDA荧光染色发现PDT组细胞内ROS水平升高;JC-1荧光染色发现PDT实验组较对照组细胞膜电位下降;Western blot检测发现Caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达略有降低。结论 AE介导的光动力能有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞生长并诱导其发生凋亡,且线粒体通路参与了AE介导的光动力诱导人乳腺癌细胞凋亡的过程。
- 陈青李开庭田思白定群于廷和虞乐华
- 关键词：光动力治疗芦荟大黄素凋亡线粒体膜电位
