孙国军
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 供职机构：吉林省肝胆病医院更多>>
- 发文基金：长春市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 核包膜蛋白gp210自身抗原基因的克隆、表达、纯化及其临床应用被引量：3
- 2007年
- 目的研究核包膜蛋白gp210基因在大肠杆菌中的稳定表达、纯化和免疫学活性鉴定。方法从人外周血单个核细胞中提取细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增gp210蛋白中含优势表位的基因片段。将该段基因克隆入PET-30a表达载体并转化到大肠杆菌BL21中表达。融合蛋白经Ni-NAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过SDS-PAGE电泳及ELISA方法进行鉴定。结果在原核表达载体中成功构建了PET30a-gp210重组体。重组体诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析可见在相对分子量大约69 kD处有gp210融合蛋白的高效表达,经纯化获得纯度达90%的表达蛋白。ELISA检测结果显示该重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。结论应用基因工程方法,获得了gp210重组蛋白,为检测抗gp210抗体提供了特异性抗原,也为临床将抗gp210抗体作为PBC的特异性诊断指标奠定了基础。
- 孙庆国李永哲刘镭孙国军李军红
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化GP210基因表达重组蛋白
- 自体骨髓干细胞治疗终末期肝病24例临床观察被引量：6
- 2012年
- 目的探讨自体骨髓干细胞移植对肝衰竭及肝硬化失代偿期患者的治疗作用。方法 24例终末期肝病患者无菌抽取骨髓180～200 ml,用负收集法分离提取骨髓血干细胞,然后经肝动脉导管注入肝脏。术后定期检测肝功能、凝血功能、甲胎蛋白、肝脏储备功能、肝脏超声和肝脏CT,并观察同期的症状体征和不良反应情况。结果与术前比较,术后2周时ALT即明显下降,差异有统计学意义;Alb、CHE、PTA、AFP于术后4、8及12周增高明显,与术前相比,差异有统计学意义;TBil、吲哚青绿15 min滞留率(ICGR15%)于术后12周时明显下降,与术前相比,差异有统计学意义;术后12周时肝脏CT,其门脉一级分支平面面积与术前相比增加,差异有统计学意义。干细胞移植术后,所有患者精神、体力、食欲明显好转,均未发现细胞移植并发症。结论自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病近期安全有效,患者肝功能、凝血功能、肝脏储备功能改善明显,缩小的肝脏有所增大。
- 陈曦孙国军赵文静焦健刘松涛梁冰刘双燕
- 关键词：造血干细胞移植骨髓移植肝硬化肝功能衰竭
- 重型肝病患者血清诱导脐血间充质干细胞表达白蛋白和细胞角蛋白18被引量：2
- 2011年
- 背景:脐血富含间充质干细胞,刺激后进入细胞周期的速度以及自分泌生长因子的能力均强于骨髓及外周血干细胞。目的:观察肝衰竭患者血清对人脐血间充质干细胞的诱导分化作用。方法:密度梯度离心和贴壁培养法相结合分离纯化脐血间充质干细胞并鉴定,以20%肝衰竭患者血清诱导培养,培养7,14,21d采用免疫组织化学方法检测白蛋白和细胞角蛋白18的表达。结果与结论:实验分离获得了高纯度贴壁生长的间充质干细胞,人脐血间充质干细胞高表达CD44和CD29,不表达CD34,体外可以分化为脂肪细胞;人脐血间充质干细胞在肝病患者血清的低糖DMEM培养基中形态发生明显改变,镜下观察细胞变得稍大而扁平,呈类上皮样细胞,SP染色显示实验组培养7d时仅少数细胞表达白蛋白和细胞角蛋白18,培养14,21d,白蛋白和细胞角蛋白18表达阳性率逐渐升高,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。提示密度梯度离心和贴壁培养法相结合可以获得纯度较高的脐血间充质干细胞,肝衰竭患者血清可诱导间充质干细胞表达白蛋白和细胞角蛋白18。
- 赵文静孙国军陈曦王佳楠刘淑荣鞠红梅
- 关键词：脐血间充质干细胞白蛋白细胞角蛋白18肝衰竭血清
- 经十二指肠镜治疗左右肝管结石的疗效观察
- 2011年
- 目的探讨经十二指肠镜技术微创治疗左右肝管结石的临床意义。方法 86例确诊为左右肝管结石伴或不伴胆总管结石的患者应用十二指肠镜治疗性ERCP技术行胆总管取石后再行左右肝管取石治疗,观察成功率、并发症发生情况。结果 86例患者81例一次治疗成功,成功率94.1%,所有患者无出血、穿孔及重症胰腺炎发生,12例伴有高淀粉酶血症经禁食抑制胰液分泌治疗2～3d恢复。结论左右肝管结石经十二指肠镜微创治疗是一种创伤小、安全,有效的治疗方法。
- 邹永军杜雪梅王波张丽荣张晓云张淑芹孙国军
- 关键词：十二指肠镜
- 免疫细胞化学法检测咽拭、尿残渣麻疹病毒抗原试剂的研究
- 范庆杰孙国军张淑芹赵文静王莹孙庆国陈亚洁叶冬霞刘薇刘淑荣杨景华李新虹
- 该研究采用免疫细胞化学法检测长春地区麻疹患者咽拭、尿残渣麻疹病毒抗原，结果显示咽拭子麻疹病毒抗原的阳性率为73.5%，特异度为100%；尿残渣麻疹抗原的阳性率为为80.9%，特异度为100%。χ2检验统计结果显示咽拭子、...
- 关键词：
- 关键词：麻疹病毒抗原检测
- 自体间充质干细胞治疗慢性肝衰竭的研究
- 孙国军张淑芹赵振国赵文静刘薇孙庆国李军红王莹高宏英刘淑荣李秋莲
- 该研究分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，尾静脉注射入肝衰竭动物模型体内，并对注入的细胞体内定位示踪，摸索注入细胞的数量，注入细胞的功能，动物肝功能恢复情况，恢复时间，副作用，在体外动物实验基础上，选择慢性肝衰竭患者3-5例，...
- 关键词：
- 关键词：肝衰竭治疗骨髓干细胞移植治疗
- 脐血间充质干细胞的分离培养及生物学特性被引量：9
- 2011年
- 背景:脐血富含干细胞,刺激后进入细胞周期的速度以及自泌生长因子的能力均强于骨髓及外周血干细胞。目的:建立一种分离纯化、培养扩增脐血间充质干细胞的方法,并观察体外培养脐血间充质干细胞的生物学特性。方法:密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,分离纯化脐血间充质干细胞。观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,应用流式细胞仪测定细胞周期,以免疫组织化学法(SP 法)测定 CD29,CD44,CD34。采用体积分数 20%马血清诱导脐血间充质干细胞分化为脂肪细胞,以油红 O 染色鉴定;0.1 μmol/L 地塞米松,10 mmol/L β-甘油磷酸钠和 50 μmol/L 抗坏血酸诱导脐血间充质干细胞分化为成骨细胞,以碱性磷酸酶染色鉴定。结果与结论:分离获得了高纯度贴壁生长的间充质干细胞,间充质干细胞呈梭形,细胞传代稳定,在体外连续传代培养 9 代,未发生形态学改变,无衰老征象。第 3 代间充质干细胞体外可以分化为脂肪细胞和成骨细胞。提示采用淋巴细胞分离液密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,可以获得纯度较高的脐血间充质干细胞,脐血间充质干细胞体外增殖和传代能力强。
- 孙国军赵文静陈曦叶冬霞李晶
- 关键词：脐血间充质干细胞扩增生物学特性
