孙静波
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 表皮生长因子和干细胞因子对小鼠生精细胞增殖与分化的作用被引量：1
- 2014年
- 目的：观察表皮生长因子（EGF）和干细胞因子（SCF）体外促小鼠生精细胞增殖、分化的效应。方法：对7~8日龄雄性昆明小鼠生精细胞进行混合细胞体外培养,在培养液中分别添加不同浓度（5、10、20、40、100 ng/ml）的EGF和SCF,并进行EGF和SCF的交互实验,观察生精细胞的存活率和形态学变化,并对粗线期精母细胞特异性磷蛋白基因（P19）、单倍体精子细胞特异性转化蛋白基因（TP1）及染色体倍性进行检测。结果：加入EGF或SCF 2-4 d,各组均可见不同程度的细胞增殖,细胞呈团或族状,以20 ng/ml EGF组和40 ng/ml SCF组最为明显;培养第7天,单一添加20 ng/ml EGF或40 ng/ml SCF组生精细胞数和存活率显著高于与其它各组（P〈0.05）,且40 ng/ml SCF组P19/TP1基因表达显著低于其它各组,单倍体细胞率显著高于其它各组（P〈0.05）。EGF与SCF配伍时,可显著增加体外培养后生精细胞数（P〈0.05）。结论：在混合生精细胞体外培养体系中,添加一定浓度的EGF和SCF可显著提高生精细胞数和存活率,而且SCF可提高单倍体精子的形成率;两者交互实验时,对细胞增殖有一定的叠加效应。
- 汪存利姜宏孙静波
- 关键词：生精细胞表皮生长因子干细胞因子体外培养RT-PCR流式细胞术
- 曲细精管片段培养法和混合细胞共培养法对小鼠生精细胞的增殖分化效应被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨曲细精管片段培养法和混合细胞共培养法对体外培养生精细胞的增殖、分化效应。方法采用曲细精管片段培养法和生精细胞-支持细胞共培养法对7～8d小鼠生精细胞进行体外培养，通过细胞形态学观察、细胞存活率和精母细胞特异性基因P19、单倍体精子细胞特异性基因TP1检测及染色体倍性分析，比较两种培养法生精细胞的存活、增殖以及分化情况。结果两种培养方法均可见生精细胞增殖，P19／TP1比值呈降低趋势，并可获得少量带鞭毛的精子细胞和长形精子，但共培养法生精细胞增殖速度及存活时间均优于片段法。体外培养各阶段，共培养法所获细胞数和存活率及单倍体精子细胞形成率均显著高于片段培养法（P＜0．05）；P19／TP1比值显著低于组织片段培养法（P＜0．05）。结论生精细胞-支持细胞共培养法的细胞增殖速度、存活率、存活时间及单倍体精子细胞形成率均优于曲细精管片段培养法，是较为理想的小鼠生精细胞体外培养方法。
- 汪存利姜宏孙静波
- 关键词：生精细胞
