孙悦
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- XELOX和卡培他滨单药口服治疗结直肠癌患者的效果比较及护理被引量：3
- 2013年
- 目的：比较奥沙利铂＋卡培他滨（XELOX）和卡培他滨单药口服治疗结直肠癌（CRC）患者的效果，并探讨手足综合征（HFS）的发生率及护理方法。方法采用随机数字表法将80例CRC患者随机分为XELOX组50例和单药口服组30例，比较两组总生存率（OS）和HFS发生率。结果XELOX组和单药口服组中位生存时间分别为24．2个月和22．4个月，总生存率分别为78．0％，76．7％，差异无统计学意义（P＞0．05）；HFS 发生率分别为34．0％，60．0％，差异有统计学意义（χ2＝8．8，P ＝0．02）。结论XELOX和卡培他滨单药口服疗效无明显差别；XELOX可降低HFS发生率；对HFS的有效护理可保证卡培他滨长期用药。
- 许珊珊王旭丹孙悦粱雪
- 关键词：手足综合征护理卡培他滨XELOX
- 重组阳离子抗肿瘤肽AIK的原核表达、纯化及活性测定被引量：5
- 2015年
- 利用Gateway克隆技术构建重组抗瘤肽AIK的原核表达体系,建立表达及纯化重组AIK的最优条件,为深入研究和利用AIK奠定基础。首先,设计含AttB重组位点的引物,通过重叠PCR技术扩增出Att B-TEV-FLAG-AIK序列,利用BP重组反应将目的序列TEV-FLAG-AIK克隆到供体载体pDONR223中,构建入门载体,再通过LR重组反应,将目的序列转移到目的载体pDEST15中,构建GST-AIK融合蛋白原核表达质粒。随后,在BL21(DE3)工程菌中优化诱导融合蛋白表达的条件。以谷胱甘肽磁珠纯化GST-AIK融合蛋白,再以rTEV酶切除GST,获得FLAG-AIK重组蛋白。最后以MTS法检测FLAG-AIK对白血病细胞HL-60的细胞毒性。菌液PCR验证和测序分析表明成功构建了重组抗瘤肽AIK的入门质粒和原核表达质粒。在BL21(DE3)工程菌中实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达。并测得在37℃下以0.1 mmol/L IPTG诱导工程菌(OD600=1.0)4 h,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的30%以上。经GST亲和层析、rTEV酶切除GST标签及二次GST亲和层析获得纯度高于95%的FLAG-AIK蛋白。MTS法测得所制备的FLAG-AIK蛋白抑瘤活性与化学合成的AIK相当。总之,本课题应用Gateway克隆系统成功构建了抗瘤肽AIK的原核表达质粒,实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达,经亲和层析获得了有生物活性的重组AIK多肽,为后续深入研究和大规模制备奠定了基础。
- 范芳芳孙慧莹徐晖刘佳玮张海员李亦兰宁雪莲孙悦白静傅松滨周春水
- 关键词：位点特异性重组GST融合蛋白抑瘤活性
- 芹菜素诱导胃癌SGC-7901细胞自噬及其对凋亡的影响被引量：12
- 2017年
- 目的:探讨芹菜素(API)是否诱导胃癌SGC-7901细胞发生自噬及其对细胞凋亡的影响。方法:采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)的API处理胃癌SGC-7901细胞24 h,MTT法检测API对细胞生长的抑制情况。分别采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)API处理细胞24 h,及60μmol/L的API处理不同时间(0、12、24、36、48 h),Western blot检测自噬标志蛋白微管相关蛋白l轻链3(LC3)、Beclin-1和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路中关键分子p-Akt、p-mTOR的表达;电子显微镜下观察细胞自噬情况。细胞经自噬抑制剂氯喹(CQ)或3-甲基腺苷(3-MA)预处理后再加入API,Western blot检测聚二磷酸腺苷-核糖体聚合酶(PARP)的表达;流式细胞术流检测细胞凋亡率。结果:API对胃癌SGC-7901细胞生长具有明显抑制作用并呈剂量-效应关系。随着API浓度和作用时间的增加,SGC-7901细胞LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达均增加,各剂量组与对照组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05);API处理后的细胞逐渐出现自噬囊泡和自噬溶酶体;p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低。采用自噬抑制剂抑制细胞自噬后,除API组LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达明显高于对照组外(P<0.05),各组蛋白表达无显著差异。API+CQ组和API+3-MA组的PARP蛋白剪切片段表达及凋亡率均高于对照组和API组(P<0.05)。结论:API可以诱导胃癌SGC-7901细胞发生自噬,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子p-Akt、p-mTOR活性有关;抑制API诱导的自噬能够增强API的凋亡诱导效应,从而增强对胃癌SGC-7901细胞的杀伤作用。
- 孙悦余洋吴坤
- 关键词：芹菜素胃癌自噬
- 抗PDCD4抗体在制备预测紫杉醇或其衍生药物个体化用药敏感性的检测试剂中的应用
- 本发明公开了抗PDCD4抗体在制备预测紫杉醇或其衍生药物个体化用药敏感性的检测试剂中的应用，本发明应用定量蛋白组学技术分析紫杉醇处理肿瘤细胞中全细胞蛋白质丰度的变化，发现紫杉醇下调PDCD4的表达水平，且肿瘤细胞对紫杉醇...
- 周春水张海员刘佳玮傅松滨白静徐晖孙慧莹范芳芳李亦兰刘宝刚刘通高民戴绍春宁雪莲孙悦
- 文献传递
- DNA损伤应答与细胞老化及癌变机制研究进展被引量：2
- 2017年
- 目的 DNA损伤是引起细胞老化的主要原因,细胞老化与肿瘤的发生发展密切相关。本研究旨在探讨DNA损伤应答和磷酸肌醇生物合成通路调控细胞老化及肿瘤发生的机制。方法以"肿瘤、DNA损伤、细胞老化和磷酸肌醇"等为关键词,检索PubMed、中国知网和万方数据库2000-01-2016-07的相关文献。纳入标准:(1)涉及到DNA损伤与细胞老化和肿瘤之间的相关性;(2)与磷酸肌醇生物合成通路对细胞老化和肿瘤的调控有关;(3)论述了细胞老化的相关表型及其产生机制。根据纳入标准,符合分析的文献42篇。结果 DNA损伤主要通过p53/p21、p16INK4a/pRB以及GATA4通路调控细胞老化进程。磷酸肌醇生物合成通路中的一些分子和蛋白激酶,如IP6、IP7和IP6K等也参与DNA损伤修复的调控,影响细胞老化及肿瘤发生。细胞老化既可以抑制肿瘤的发生也可以促进肿瘤的发生。结论DNA损伤应答和磷酸肌醇生物合成通路通过多种途径调控细胞老化及肿瘤的发生,为肿瘤的防治提供了新靶点。
- 何路平宁雪莲孙悦胡建东刘慧邱晓红周春水
- 关键词：肿瘤发生DNA损伤磷酸肌醇细胞老化
