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痘苗病毒天坛株非必需区TA25R…TA36L的两步重组表达载体的构建被引量：1: 1998年; 针对痘苗病毒天坛株非必需区ＴＡ２５Ｒ－ＴＡ３６Ｌ，构建了可去除ＴＡ２６Ｒ至ＴＡ３５Ｌ的１０个ＯＲＦｓ，并同时表达ＬａｃＺ基因的两步重组表达载体ｐＡ２４２７ＬａｃＺ。通过两种方法（一步重组和两步重组）获得了在该区域表达ＬａｃＺ基因的重组痘苗病毒ＲＶＡ２４２７ＬａｃＺ。实验表明，一步重组法获得重组病毒的机率大约为１‰，两步重组法的机率可达６２．５‰。由此可见，两步重组法可显著提高重组病毒的筛选机率。ＬａｃＺ基因可以在该区域中稳定表达，重组病毒与野毒株在繁殖能力上没有明显差别，表明ＴＡ２５Ｒ－ＴＡ３６Ｌ是较稳定的外源基因插入区域。上述结果对于深入研究该非必需区的功能特点。; 邹艳阮力娄元梅朱诚陆柔剑孙朝晖朱既明; 关键词：痘苗病毒

麻疹病毒L4株血凝素基因: 麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血凝素活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了血凝素HA基因,发现该基因的DNA序列在第1080、1474、1655及1799位的四个碱基与文献报道的Edmonston株不同,并导...; 阮力朱既明杨克俭徐水婵朱诚; 文献传递

麻疹病毒L4株血凝素基因: 麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血凝素活性，本发明从麻疹病毒L4株克隆了血凝素HA基因，发现该基因的DNA序列在第1080、1474、1655及1799位的四个碱基与文献报道的Edmonston株不同，并导...; 阮力朱既明杨克俭徐水婵朱诚; 文献传递

麻疹病毒L4株融合蛋白基因: 麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血溶活性，本发明从麻疹病毒L4株克隆了融合蛋白F基因，发现该基因的DNA序列中有七个碱基与文献报道的Edmonston株融合蛋白F基因的DNA序列不同，并导致这两种毒株的融合...; 阮力朱既明杨克俭徐水婵朱诚; 文献传递

人白介素6受体基因在痘苗病毒载体系统中的表达被引量：6: 1995年; 人ＩＬ－６受体是一个在各种细胞上广泛表达的跨膜糖蛋白分子，是ＩＬ－６发挥细胞效应所必需的。本文通过将ＩＬ－６ＲｃＤＮＡ重组到痘苗病毒的ＴＫ基因中构建成重组痘苗病毒ＶＩＬ６Ｒ。细胞原位杂交和ＡＰＡＡＰ染色结果表明，感染ＶＩＬ６Ｒ后的Ｖｅｒｏ细胞中，ＩＬ－６Ｒ在ｍＲＮＡ和蛋白水平上均呈现较强的表达。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析所表达的分子量为８０ｋＤ，表明所表达的产物是糖基化的。ＩＬ－６结合试验表明，表达的膜ＩＬ－６Ｒ能够结合ｒＩＬ－６，说明它是有功能的。利用ＶＩＬ６Ｒ免疫小鼠后，能够刺激较强的抗体产生。从而为进一步研究ＩＬ－６Ｒ的信号传导和构效关系提供了基础。; 董家新沈倍奋任蕴芳朱诚阮力; 关键词：白细胞介素6 受体痘苗病毒基因表达

麻疹病毒L4株融合蛋白基因: 麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血溶活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了融合蛋白F基因,发现该基因的DNA序列中有七个碱基与文献报道的Edmonston株融合蛋白F基因的DNA序列不同,并导致这两种毒株的融合...; 阮力朱既明杨克俭徐水婵朱诚; 文献传递

三种淋巴因子在重组痘苗病毒中的表达及其对重组病毒毒力和免疫效果影响的初步研究被引量：2: 1996年; 研究了巨噬细胞游走抑制因子（ＭＩＦ）、白细胞介素６（ＩＬ－６）及白细胞介素２（ＩＬ－２）等三种淋巴因子分别在含有甲型肝炎病毒基因的重组痘苗病毒中表达后，对病毒毒力及免疫效果的影响。使用Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠和家兔进行免疫的初步结果显示，表达ＩＬ－６的重组痘苗病毒免疫后特异性抗体反应明显增强，痘苗病毒抗体及甲型肝炎病毒抗体阳转小鼠数量分别由对照的３／１０和１／１０提高到８／１０和７／１０，痘苗病毒和甲型肝炎病毒抗体滴度也明显升高。家兔初次免疫痘苗病毒后，抗体平均滴度比对照病毒组提高约６倍，并能促使甲型肝炎病毒抗体阳转。而ＩＬ－２和ＭＩＦ重组痘苗病毒免疫后，特异性抗体反应升高不明显。重组痘苗病毒毒力变化结果显示，兔皮内接种ＩＬ－２和ＭＩＦ均显示了一定的减毒能力，二者的重组痘苗病毒毒力均比单纯ＴＫ病毒下降接近１个对数，而表达ＩＬ－６的重组痘苗病毒的毒力与单纯ＴＫ病毒对照无差别。; 王琴阮力陆柔剑孙朝晖朱诚马大龙朱既明; 关键词：淋巴因子 MIF IL-6 IL-2 重组痘苗病毒

同时表达麻疹病毒L4株HA和F蛋白及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株的构建被引量：8: 1996年; 构建了同时表达麻疹病毒ＬＡ株ＨＡ和Ｆ基因及人白细胞介素２（ＩＬ２）的重组痘苗病毒疫苗株ＲＶＪＭＬＨＡＦＫＩＬ２。Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ结果显示，ＨＡ、Ｆ和人ＩＬ２基因均在痘苗病毒中稳定有效表达，且产物与天然蛋白相近。ＨＡ分子有糖化的７９ｋＤ和非糖化的田ｋＤ两种形式；Ｆ分子以６０ｋＤ的前体Ｆ０、４３ｋＤ的Ｆ１和１８ｋＤ的Ｆ２三种形式存在。表达产物的血凝效价为１：８，血溶活性ＯＤ５４０的测定结果是Ｏ３７。该重组病毒免疫新西兰白兔及Ｃ５７小鼠，可以产生抗麻诊病毒ＨＡ和Ｆ蛋白的特异性ＥＬＩＳＡ（１：６４４～１６００）、血凝抑制（１：２５６～５１２）、血溶抑制（１：８０～１６０）和ＮＴ（１：６４０）抗体。接种兔及裸鼠后的毒力反应，明显低于只表达ＩＬ２的重组痘苗病毒疫苗株ＲＶＪ１２３，表现为兔皮肤红肿范围小，持续时间短，皮肤无坏死；裸鼠毒力的结果，表现出ＲＶＪＭＬＨＡＦＫＩＬ２病毒只存留于接种局部，而且滴度大大降低，未发现该病毒向其它脏器播散和增殖。麻疹重组痘苗病毒疫苗株的构建为该疫苗株的人体免疫观察奠定了基础。; 杨克俭阮力朱诚孙朝辉陆柔剑徐水婵朱既明; 关键词：麻疹病毒白细胞介素重组痘苗病毒

麻疹病毒L4株血凝素基因的克隆与表达及免疫原性被引量：2: 1996年; 从部分减毒的麻疹病毒Ｌ４株感染的Ｖｅｒｏ细胞中提取ｍＲＮＡ、进行逆转录及ＰＣＲ扩增。克隆到了长１．９ｋｂ的４个血凝素基因克隆。ＤＮＡ序列分析发现，Ｌ４株的血凝素基因有４个碱基与Ｅｄｍｏｎｓｔｏｎ株不一致，造成３个氨基酸差异。这４个克隆在重组痘苗中表达后，３个克隆的表达产物均表现出良好的血凝活性、助融合活性（Ｆｕｓｉｏｎｈｅｌｐｅｒ）和较强的免疫原性。表达血凝素分子量分别为未糖化的６８ｋＤ以及糖化的７９ｋＤ分子，免疫的兔血清显示出较高的ＥＬＩＳＡ（１：８００）～１：３２００）、ＨＩ（１：１６０－：１：１２８０）、ＨＬＩ（１：１６０～１：６４０）及ＮＴ（１：１００～１：４８６）滴度。麻疹病毒ＬＡ株的血凝素基因的克隆为麻疹重组疫苗的研究提供了重要材料。; 杨克俭阮力陆柔剑孙朝晖朱诚朱既明; 关键词：麻疹病毒基因表达免疫原性

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朱诚

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