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斑点叉尾鮰LEAP-2和NK-lysin抗菌肽在毕赤酵母中的串联表达被引量：1: 2015年; [目的]合成密码子优化的斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)LEAP-2与NK-lysin成熟肽的串联基因(LN),构建真核重组表达载体p PICZαA-LN,实现LN在毕赤酵母中的重组DNA表达并对其纯化。[方法]参考编码斑点叉尾鮰LEAP-2和NK-lysin成熟肽的c DNA序列,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏爱性,优化合成LEAP-2与NK-lysin成熟肽的串联基因LN,两者之间通过α因子信号肽酶切位点对应的核苷酸序列连接;选择表达载体p PICZαA,构建重组表达载体p PICZαA-LN;电转化至毕赤酵母X-33,29℃、p H 6.0条件下,采用1.0%甲醇诱导表达目的蛋白;采用阳离子交换层析对表达产物进行分离纯化。[结果]Tricine-SDS-PAGE分析显示,培养72 h的表达产物经阳离子交换层析,获得了重组体LEAP-2成熟肽、NK-lysin成熟肽和两者的串连表达物;LEAP-2成熟肽的分泌表达效率较NK-lysin成熟肽的高。[结论]实验构建了斑点叉尾鮰LEAP-2与NK-lysin串联基因的真核重组表达载体,并在毕赤酵母X-33中成功表达。; 宋长丰李雯陶妍; 关键词：斑点叉尾鮰成熟肽毕赤酵母

斑马鱼防御素defbl3的优化基因及其重组蛋白的制备方法: 本发明公开了斑马鱼防御素defbl3的优化基因，其重组蛋白的制备方法。本发明还提供了包含该优化基因的重组表达载体和酵母宿主细胞，该优化基因在生产斑马鱼防御素defbl3中的应用，和该重组蛋白在制备抗菌药物中的应用。本发明...; 陶妍宋长丰李雯

一种杂合抗菌肽及其制备方法和应用: 本发明涉及一种杂合抗菌肽及其制备方法和应用。所述杂合抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，编码该杂合抗菌肽的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。本发明通过体外构建多拷贝表达盒表达载体，获得含编码杂合抗...; 陶妍李雯宋长丰冯亚东; 文献传递

斑马鱼防御素defbl3的优化基因及其重组蛋白的制备方法: 本发明公开了斑马鱼防御素defbl3的优化基因，其重组蛋白的制备方法。本发明还提供了包含该优化基因的重组表达载体和酵母宿主细胞，该优化基因在生产斑马鱼防御素defbl3中的应用，和该重组蛋白在制备抗菌药物中的应用。本发明...; 陶妍宋长丰李雯; 文献传递

一种杂合抗菌肽及其制备方法和应用: 本发明涉及一种杂合抗菌肽及其制备方法和应用。所述杂合抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，编码该杂合抗菌肽的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。本发明通过体外构建多拷贝表达盒表达载体，获得含编码杂合抗...; 陶妍李雯宋长丰冯亚东

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宋长丰