余华军
- 作品数：11 被引量：37H指数：3
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蟾毒灵抑制胆总管癌细胞QBC-939增殖和诱导凋亡的实验研究被引量：1
- 2017年
- 目的观察蟾毒灵对人胆管癌细胞QBC-939增殖和凋亡的影响,以及凋亡相关蛋白表达量的变化。方法体外培养人胆管癌QBC-939细胞,运用MTT检测蟾毒灵对胆管癌细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测蟾毒灵对胆管癌细胞凋亡率和线粒体膜电位的影响;并采用Western blotting检测凋亡相关蛋白Caspase3、激活型的Caspase3(Cleaved-Caspase3)和Cleaved-PARP的表达量变化。结果蟾毒灵对人胆管癌细胞QBC-939增殖具有明显抑制作用,在一定浓度下表现出时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测显示:细胞的凋亡率明显增加;线粒体膜电位随蟾毒灵浓度增加,膜电位发生下调。Western blotting结果显示:蟾毒灵处理QBC-939细胞48h后,Caspase3蛋白被剪接活化,激活型的Caspase3(Cleaved-Caspase3)表达量升高;同时,Caspase3的作用底物多聚聚合酶PARP的降解产物(Cleaved-PARP)表达明显升高,且呈浓度依赖性。结论蟾毒灵能够明显抑制人胆管癌QBC-939细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性;线粒体凋亡途径在蟾毒灵的抗癌过程中发挥了作用。
- 郑亦胡胡伟建赵炜嘉余华军张启瑜
- 关键词：蟾毒灵凋亡增殖
- 大鼠脂肪干细胞对自体肝移植缺血再灌注损伤的保护机制研究被引量：7
- 2017年
- 目的探讨大鼠脂肪干细胞在大鼠自体肝移植缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤模型中的保护作用机制。方法分离并培养大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs),构建稳定细胞株。SD大鼠随机分为假手术组、自体肝移植缺血再灌注组(IR组)、自体肝移植缺血再灌注+脂肪干细胞回填组(ADSCs组),每组10只。假手术组上腹正中切口,暴露并离断肝脏韧带,不做其他处理。IR组用动脉夹夹闭肝门阻断血流,肝素注射液灌注15 min,不给药。ADSCs组在肝素注射液灌注后30 min尾静脉注射1×106 ADSCs。手术后24 h后处死大鼠,检测各组大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,以及线粒体活性;苏木素-伊红染色(HE)观察肝脏病理学改变;免疫印迹法(Western blotting)检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、Bax基因表达情况。结果与假手术组相比,IR组AST和ALT水平、MDA含量较高,SOD含量较低(P<0.05),线粒体活性较弱。病理切片结果显示,IR组肝细胞出现坏死,炎性细胞浸润严重。Western blotting结果显示IR组较假手术组ICAM-1、Bax表达增多。与IR组相比,ADSCs组AST和ALT水平、MDA含量较低,SOD含量较高(P<0.05),线粒体活性较强,炎性细胞浸润较少,ICAM-1、Bax表达减少。结论大鼠脂肪干细胞对大鼠自体肝移植缺血再灌注损伤模型有保护作用,其作用机制可能是通过减少炎症反应和氧化应激程度进而减轻肝脏缺血再灌注损伤。
- 倪孝龙何其宽赵炜嘉余华军鲍海力张启瑜
- 关键词：脂肪干细胞缺血再灌注损伤自体肝移植
- 一种新型大鼠胰腺去细胞化支架的制备研究被引量：1
- 2018年
- 目的通过经胃左动脉途径灌注,选择胰腺体尾部作为灌注主体,应用各种去细胞化灌注技术,以制备新型天然胰腺去细胞化生物支架,并全面评价其理化特性,以期为胰腺组织再生工程的研究提供良好的应用载体。方法选择健康成年雄性SD大鼠,离体获取胰体尾部作为灌注主体,采用胃左动脉作为灌注入路,通过物理冻融、酶解法及曲亚通(TritonX-100)为主辅以十二烷基硫酸钠(SDS)的洗脱剂组合进行顺行灌注,获取胰腺去细胞支架。并通过大体形态观察、美兰染色、组织病理学观察、基因组DNA定量分析、电镜观察、胶原蛋白成分鉴定、免疫原性分析等对去细胞化后的胰腺支架进行全面的评价。结果本研究方法可成功制备肉眼透明的胰腺去细胞化支架,组织学检测和电镜观察均表明去细胞支架内无细胞残留,内部脉管网络和空间结构保存完整;免疫荧光分析表明去细胞化后支架的细胞外基质成分保留得较为完整,且支架DNA残留量为(42.3±10.6)ng/mg,不足正常胰腺的5%;皮下移植实验证实获得的去细胞化支架具有良好的组织相容性。结论以胰腺体尾部作为灌注主体,经胃左动脉途径灌注的策略能够成功制备一种新型的去细胞化胰腺支架,并且支架的基质成分和理化特性较完整地保留,能够为胰腺组织工程研究提供一种良好的载体选择。
- 陈云志余华军孔鸿儒孙洪伟张启瑜周蒙滔
- 关键词：胰腺细胞外基质
- 干细胞来源外泌体对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用被引量：8
- 2018年
- 目的研究大鼠脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes,Exo)对肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)的保护作用。方法胶原酶法提取SD大鼠原代脂肪间充质干细胞,超速离心法提取干细胞来源的外泌体。SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IR)、缺血再灌注损伤外泌体治疗组(IR+Exo)。Sham组腹部正中切口,离断肝脏周围韧带,不做其他处理;IR组用动脉夹阻断70%肝脏血流60 min;IR+Exo组70%肝脏血流阻断60 min后,尾静脉注射外泌体观察其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)含量。检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)含量。Western blotting法检测氧化应激指标醌氧化还原酶(NQO-1)、血红素氧合酶1(HO-1),凋亡相关指标Bcl-2、Bax,HE染色观察肝组织病理变化。结果相比IR组,IR+Exo组血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量明显下降(P<0.05)。NQO1、HO-1、Bcl-2表达量显著升高,Bax显著下降(P<0.05),肝组织病理损伤明显改善。结论外泌体能够减轻肝脏缺血再灌注损伤,其可能通过缓解氧化应激、抑制炎症反应、抗凋亡而发挥作用。
- 何其宽戴宁高叶瑞凡洪重余华军郭鹏毅张杰张启瑜
- 关键词：脂肪间充质干细胞外泌体肝脏缺血再灌注损伤
- 选择性脾胃区减断术治疗门脉高压症被引量：2
- 2014年
- 肝硬化门脉高压症常引起脾功能亢进症与食管胃底静脉曲张破裂出血,严重影响患者的生活质量,甚至威胁生命.如何缓解脾亢和控制出血是治疗门脉高压症的最主要目的与难题.迄今,各种外科手术方法,如断流术与分流术等疗效始终不能令人完全满意[1-2].自2000年以来,我院张启瑜教授采用选择性脾胃区减断分流术（selective decongestive devascularization shunt of gastrosplenic region,SDDSGSR）治疗门脉高压症患者取得了较好的近期与远期疗效[3].鉴于不同患者门脉高压症的临床病理状态不尽相同,我们对上述术式进行了改良,即采用选择性脾胃区减断术（selective decongestive devascularization of gastrosplenic region,SDD-GSR）.该术式仅作减断流而不作分流术,大大简化了手术难度.现将我院近年来实施此手术的情况报道如下.
- 吴晓段建文余华军叶海林张启瑜
- 关键词：肝硬化门脉高压症食管胃底静脉曲张破裂出血外科手术方法脾功能亢进症远期疗效
- miR-21调节缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬的研究
- 2016年
- 目的探讨miR-21在缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬中的作用。方法体外培养肝卵圆细胞,慢病毒转染肝卵圆细胞构建稳定的细胞株,分别提取各组细胞RNA逆转录后行SYBR Green实时荧光定量PCR,检测各组miR-21的表达,以转染好的稳定的细胞建立缺血缺氧模型,共分为3组:miR-21空载体慢病毒转染HOC自噬组,miR-21增强慢病毒载体转染HOC自噬组,miR-21-inhibition慢病毒载体转染HOC自噬组。Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;应用丹(磺)酰戊二胺(Monodansylcadaverine,MDC)染色荧光定位法、观察各组细胞的自噬;免疫印迹法(Western blotting)检测各组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达情况。结果与空载体组比,增强组miR-21基因水平表达增强,而MDC染色减弱(自噬减少),蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值减少;而抑制组miR-21基因水平表达减少,MDC染色增强(自噬增强),蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值增多。结论抑制miR-21过表达可以增强缺血缺氧引起的肝卵圆细胞的自噬,有利于肝卵圆细胞在缺血缺氧微环境中稳定细胞内环境,维持细胞的存活。
- 高胜强陈冬冬黄立栋戴瑞杰胡伟建余华军张启瑜单云峰
- 关键词：MICRORNA-21自噬肝卵圆细胞
- CT评估的脂肪肝与高脂血症性急性胰腺炎严重程度的相关性被引量：3
- 2021年
- 目的:探讨CT评估的脂肪肝与高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)病情严重程度的相关性。方法:回顾性分析223例HLAP患者资料,根据肝/脾CT值将患者分为无、轻度脂肪肝组及中重度脂肪肝组。采用单因素和多因素logistic回归分析影响HLAP严重程度的独立危险因素。结果:有184例(82.5%)HLAP患者合并脂肪肝。与无、轻度脂肪肝患者相比,中重度脂肪肝患者住院时间超过2周的比率增高(55.7%vs.39.3%,P<0.05)。中重度HLAP组患者的平均血甘油三酯(TG)水平高于轻度HLAP组(P<0.01),而肝/脾CT值比低于HLAP组(P<0.01)。单因素logistic回归分析显示,合并中重度脂肪肝及TG水平高是中重度HLAP的危险因素(均P<0.05)。经多因素logistic回归分析校正后,合并中重度脂肪肝仍是中重度HLAP的独立危险因素(P<0.05)。此外,合并中重度脂肪肝HLAP患者经治疗后,67.0%转为无或轻度脂肪肝。结论:基于CT平扫评估的脂肪肝严重程度与HLAP患者严重程度和住院时间有关。
- 陈丽芳余华军黄颖宝孙文娜孙洪伟金尹吴恩福
- 关键词：高脂血症性急性胰腺炎脂肪肝
- 脂氧素A4改善肺微血管内皮细胞炎症损伤的体外实验研究被引量：1
- 2019年
- 目的观察脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)炎症损伤的治疗作用。方法体外培养人PMVECs,第一阶段:分为空白对照组(完全培养基培养)和TNF-α组(分别以5、10、20 ng/mL共培养24 h),采用MTT法检测各组PMVECs存活率,用针头式滤器检测TNF-α损伤前后PMVECs的单层通透性。第二阶段:分为TNF-α组(20 ng/mL处理24 h)和LXA4干预组(1、10、100μg/L处理24 h),检测PMVECs存活率和单层通透性,RT-PCR检测PMVECs IL-1β、VCAM-1、NF-κB p65 mRNA的表达。结果 (1)5、10、20 ng/mL TNF-α组的PMVECs存活率分别是(76.39±9.3)%、(61.87±11.7)%、(49.54±12.6)%,与空白对照组比较,均显著降低(P <0.05),而经1、10、100μg/L三种浓度LXA4干预后,20 ng/mL TNF-α组的PMVECs存活率均得到提高,其中100μg/L LXA4干预后的PMVECs存活率为(82.32±8.7)%,有统计学差异(P <0.01);(2)与损伤前[(0.021±0.011)mL/min·cm^2·kPa]比较,TNF-α处理60、90min后PMVECs单层通透系数(Kf值)显著增高[(0.067±0.007)和(0.096±0.007)mL/min·cm^2·kPa,P <0.05)],而LXA4干预60、90 min时Kf值则显著降低[(0.039±0.008)和(0.058±0.011) mL/min·cm^2·kPa,P <0.05)];(3)与对照组比较,TNF-α组的IL-1β、VCAM-1、NF-κB p65 mRNA的表达水平均有显著升高(P <0.01或P <0.05),而LXA4干预组显著改善(P <0.01或P <0.05)。结论 TNF-α能引起PMVECs的急性炎症损伤,LXA4对TNF-α引起的PMVECs急性炎症损伤有改善作用。
- 陈云志连泽来余华军孔鸿儒戴胜杰黄超豪孙洪伟
- 关键词：脂氧素A4肺微血管内皮细胞炎症损伤
- BCAT1对HSC-LX2人肝星状细胞纤维化相关基因表达的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)对HSC-LX2人肝星状细胞纤维化相关基因表达的影响。方法构建携带BCAT1基因的慢病毒载体,将病毒转染HSC-LX2细胞,运用q RT-PCR和Western blotting检测转染BCAT1过表达病毒后的HSC-LX2细胞中BCAT1、ACTA2、TIMP1、MMP2和COL1A1基因的表达情况。结果携带BCAT1基因的慢病毒转染HSC-LX2细胞后,实验组(转染p-BCAT1)HSC-LX2细胞和对照组(转染Vec)HSC-LX2细胞相比,促进纤维化的ACTA2、TIMP1、COL1A1基因的m RNA及蛋白表达均升高,抗纤维化的MMP2基因的m RNA及蛋白表达均下降,两者的差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 BCAT1增强HSC-LX2人肝星状细胞中ACTA2、TIMP1、COL1A1促纤维化相关基因的表达,抑制抗纤维化相关基因MMP2的表达。
- 赵炜嘉郑亦胡洪重余华军戴宁高叶瑞凡张启瑜
- 关键词：肝星状细胞肝纤维化
- 选择性脾胃区减断术治疗肝硬化门静脉高压症的临床价值分析被引量：1
- 2021年
- 目的比较选择性脾胃区减断术(SDD-GSR)与脾切除联合贲门周围血管离断术治疗肝硬化门静脉高压症的临床疗效。方法回顾分析温州医科大学附属第一医院收治的134例肝硬化门静脉高压症患者资料,男性102例,女性32例,平均年龄51岁。其中61例行SDD-GSR纳入SDD-GSR组,73例行脾切除联合贲门周围血管离断术纳入对照组。比较两组手术时间、术中出血量、自由门静脉压力(FPP)、肝功能Child-Pugh分级、术前和术后白细胞计数与血小板计数、术后并发症等。结果SDD-GSR组手术时间165(110,198)min、术中出血量280(100,650)ml,少于对照组190(135,605)min、895(300,3500)ml,差异有统计学意义(均P<0.05)。术后SDD-GSR组和对照组FPP分别为39(35,44)cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)和38(34,44)cmH2O,均低于本组术前,差异有统计学意义(均P<0.05)。SDD-GSR组术后血小板计数与白细胞计数均低于同期对照组水平,差异有统计学意义(均P<0.05)。SDD-GSR组患者术后近期肝功能Child-Pugh分级优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SDD-GSR组腹腔感染、门静脉系统血栓发生率低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论与脾切除联合贲门周围血管离断术相比,SDD-GSR具有术中出血少,肝功能改善明显,并发症少的优点,是治疗肝硬化门静脉高压症的一种有效术式。
- 段建文余华军叶海林陈永胜张启瑜
- 关键词：肝硬化断流术脾切除术
