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李青岭: 作品数：20 被引量：66H指数：5; 供职机构：重庆医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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β3整合素作为汉坦病毒受体的鉴定以及其它候选受体的筛选: 一般来说，病毒与细胞膜上特异性受体结合是病毒感染细胞的起始环节，对于病毒能否成功感染细胞具有重要意义。病毒受体具有特异性、高亲和性、结合位点有限性及相关生物学功能等特征。识别和鉴定病毒特异性结合的细胞膜受体不仅有益于了解...; 李青岭; 关键词：Β3整合素病毒感染基因重组技术; 文献传递

B和C基因型乙型肝炎病毒对阿德福韦酯治疗的病毒学应答比较被引量：10: 2008年; 目的阐明不同基因型HBV对阿德福韦酯治疗反应是否存在差异。方法首先利用型特异引物PCR法结合型特异核苷酸分析法检测HBV基因型，然后根据基因型对阿德福韦酯Ⅲ期临床资料进行分析及统计学处理（计量资料用t检验，计数资料用卡方检验）。结果177例临床标本检出B基因型HBV感染者102例，C基因型感染者65例，B＋C混合型感染者6例，B＋D混合型感染者4例。治疗第12、24周时，B基因型组和C基因型组血清HBVDNA下降均值分别为2.2log10拷贝／ml、2.1log10拷贝／ml和2.7log10拷贝／ml、2．4log10拷贝／ml，两组差异均无统计学意义（P〉0．05），第48周时两组HBVDNA分别下降3.6log10拷贝／ml和3．1log10拷贝／ml，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗结束时（48周）B基因型组和C基因型组分别有43例（42．2％）和22例（33．8％）出现血清HBVDNA转阴，差异有统计学意义（P〈0．05）；两组患者HBeAg阴转率和抗-HBe血清转换率分别为30．4％、29．2％和21．6％、20．0％，差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者血清ALT复常率在治疗第12、24、36周和48周时分别为35．3％、33．9％，51．0％、53．9％，63．4％、61．5％和83．3％、81．5％，各时间段两组ALT复常率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎48周时，部分病毒学指标（如血清HBVDNA下降均值和HBVDNA阴转率）B基因型优于C基因型HBV感染者。但由于阿德福韦酯起效较慢，抑制病毒作用相对较弱，有必要延长治疗时间进一步证实这一现象。; 曾爱中邓惠彭凤英辛小娟杨春李青岭郭进军张祯祯赫美君袁喆黄文祥黄爱龙; 关键词：肝炎乙型肝炎病毒基因型阿德福韦酯

型特异引物PCR法分析238株乙肝病毒基因型被引量：5: 2008年; 目的:研究乙肝病毒(HBV)感染者HBV基因型分布状况,并建立一套HBV病毒株分型的简便可靠的分析法。方法:设计型特异引物,采用基因型特异引物聚合酶链反应(PCR)法分型。结果:238株HBV中218株得到分型。其中B型149例(男115例、女34例);C型63例(男47例、女16例);B+C混合型6例(男4例、女2例)。B型、C型和B+C混合型检出率分别为68.3%(男69.3%、女65.3%)、28.9%(男28.3%、女30.8%)和2.8%(男2.4%、女3.8%)。未检出A、D、E、F、G、H基因型。结论:HBV感染者以B基因型为主。基因型B检出率显著高于其它基因型,其差异具有统计学意义(P<0.01)。HBV各基因型分布与性别无关(P>0.01)。; 曾爱中黄爱龙郭进军黄文祥李青岭张祯祯郝美君; 关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应

骨碎补总黄酮联合淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响被引量：1: 2011年; 目的:研究骨碎补总黄酮(TFRD)联合淫羊藿苷(ICA)对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:应用组织块法体外培养hPDLCs,以MTT法测定TFRD、ICA单独以及联合作用对hPDLCs增殖的影响;用酶动力学方法测定TFRD、ICA单独以及联合作用对hPDLCs、ALP活性的影响。结果:TFRD、ICA、TFRD+ICA均可促进hPDLCs增殖和ALP活性增加,其中TFRD+ICA作用效果优于TFRD与ICA。结论:TFRD与ICA联合应用,具有协同作用。; 李春光钟晓波仲琳李青岭; 关键词：骨碎补总黄酮淫羊藿苷牙周膜细胞增殖碱性磷酸酶活性

RtS246T变异对HBV恩替卡韦敏感性的影响--一种新的HBV体外表型分析策略: 胡接力黄爱龙崔静郭进军张文露袁作为李青岭邓小燕曾爱中唐霓

一个约30kD膜蛋白作为汉坦病毒候选受体的筛选: 2008年; 目的:筛选汉坦病毒包膜糖蛋白G2可能的候选受体或受体辅助分子,方法:根据汉坦病毒76～118株M基因序列设计引物,PCR扩增和基因重组获得G2全长及各功能片段的GST融合表达质粒,SDS-PAGE检测它们在BL21菌中诱导表达及纯化的效果。生物素标记汉坦病毒易感细胞Vero E6和非允许细胞CHO的细胞膜蛋白。将在BL21裂解上清中有表达的G2蛋白N端81～140位氨基酸片段(G2N81-140)纯化后与含有生物素标记的Vero E6细胞膜裂解液进行孵育,同时以非允许细胞CHO和无关蛋白GST-TLM做为阴性对照,通过GST Pull-down分离与G2蛋白特异性结合的细胞膜蛋白。结果:一个约30kD的Vero E6细胞膜蛋白与G2N81～140片段之间存在着特异性的相互作用。结论:该30kD蛋白可能是汉坦病毒细胞膜候选受体或受体辅助分子之一,是病毒入侵细胞的一个相关分子。; 李青岭冯涛郭进军黄爱龙; 关键词：GST

上皮细胞黏附分子阳性的正常成体小鼠肝祖细胞向肝干细胞转化及HBx蛋白对肝干细胞稳定性的影响被引量：3: 2015年; 目的观察上皮细胞黏附分子（EPCAM）阳性的正常成体小鼠肝祖细胞转化为多项分化潜能的肝干细胞，并探讨HBx蛋白对肝干细胞的影响。方法改良型两步灌流法消化肝组织，差异性离心法联合密度梯度离心法筛选肝祖细胞；在表皮生长因子和胶原蛋白作用下，观察肝祖细胞向肝干细胞转化，并经细胞免疫荧光法鉴定干细胞中CD133、EPCAM、CD49f及细胞角蛋白19表面标志物的表达情况。添加二甲基亚砜，过碘酸雪夫氏染色、细胞免疫荧光、流式细胞术检测干细胞向肝细胞和胆管上皮细胞分化情况。转染HBx蛋白后，PCR检测细胞转染效率，并观察HBx转染后干细胞形态学差异性及其增殖能力。两组间数据比较采用t检验。结果肝祖细胞存活率为78．67％±4．04％，在表皮生长因子和胶原蛋白作用下，铺路石样贴壁生长的肝祖细胞中部分细胞聚集成细胞球，具有干细胞样性质，高表达CD133、CD49f、细胞角蛋白19，低表达EPCAM。在二甲基亚砜作用下，能够向肝细胞和胆管上皮细胞分化。HBx转染后肝干细胞能维持干细胞形态，克隆能力增强。结论EPCAM阳性的正常成体小鼠肝祖细胞能够向肝干细胞转化，同时HBx蛋白对维持肝干细胞的稳定性、促进增殖有重要作用。; 于黎明罗娜李青岭陈姝何松; 关键词：干细胞细胞分化上皮细胞黏附分子 HBX

熊果酸对舌鳞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的作用研究被引量：1: 2015年; 目的探讨熊果酸对舌鳞癌Tca8113细胞增殖、凋亡的作用及可能机制,为临床治疗提供理论依据。方法经不同浓度熊果酸(10、20、40μmol/L)处理体外培养的舌鳞癌Tca8113细胞24 h后,采用MTT法检测细胞增殖活性,荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化,Real-time PCR法检测Bcl-2和Bax m RNA的表达,酶联免疫吸附试验测定caspase-3蛋白酶活性。结果与对照组比较,不同浓度的熊果酸均可明显抑制Tca8113细胞增殖,诱导细胞DNA损伤,促进细胞凋亡,降低Bcl-2/Bax的表达比例,增高细胞线粒体膜电位(△Ψm),增强caspase-3蛋白酶活性,且具有一定的剂量依赖性。结论熊果酸可以抑制Tca8113细胞增殖并促进细胞凋亡,其机制可能与调控细胞线粒体凋亡途径有关。; 李青岭吴建勇赵德璋; 关键词：舌肿瘤肿瘤蛋白质类细胞增殖熊果酸

布洛芬对肝癌细胞HepG2增殖及wnt/β-catenin信号通路的影响被引量：3: 2009年; 研究非甾类抗炎药布洛芬对肝癌细胞增殖和β-catenin信号通路的影响,探讨布洛芬影响肝癌细胞增殖的可能机制。体外培养HepG2细胞,MTT法检测不同浓度布洛芬分别作用24、48和96h后细胞增殖情况;应用RT-PCR检测布洛芬处理HepG248h后β-catenin、cyclinD1和c-myc转录水平的变化;western blotting检测布洛芬对HepG2中β-catenin1蛋白表达量的影响;免疫细胞化学法观察布洛芬处理组HepG2细胞β-catenin的亚细胞定位。结果表明0.7mmol/L的布洛芬处理细胞48h后能明显见到细胞增殖受到抑制,抑制率达到53.8%,且抑制作用有时间、剂量依赖性;经布洛芬处理后细胞的β-catenin、cyclinD1和c-myc转录也受到显著抑制;布洛芬处理组细胞β-catenin蛋白表达低于对照组;布洛芬处理后β-catenin在胞核中定位减少,胞浆定位增多。因此,布洛芬能抑制肝癌细胞的增殖,且随着处理时间和药物浓度的增加,其抑制作用逐渐增强,其抑制作用可能与调控β-catenin信号通路,影响β-catenin的表达和定位,调节下游相关靶基因的转录有关。; 马骏飞赵迎泽李青岭吴明军冯涛; 关键词：布洛芬肝癌细胞 HEPG2 Β-CATENIN

过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)调控HBV微染色体重塑与病毒复制被引量：3: 2017年; 目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)是否参与调控乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)微染色体重塑与病毒复制。方法:HepG2细胞单独转染、共转染线性HBV单体与PPARα表达或PPARα沉默载体;Southern blot检测转染细胞质内HBV核心颗粒DNA;实时定量PCR定量检测细胞质HBV核心颗粒DNA及细胞核内HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)水平;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测转染细胞上清中乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)和e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg);染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation,ChIP)检测与cccDNA结合的PPARα、组蛋白和染色质修饰酶。结果:与单独转染线性HBV单体相比,共转染PPARα增加了PPARα与HBV cccDNA的结合,增加了HBV开环DNA(open circular DNA,OC DNA)及HBsAg和HBeAg水平,同时也增加了cccDNA微染色质中组蛋白H3和H4的乙酰化水平及乙酰转移酶p300的水平;共转染PPARα沉默载体则有相反的结果。结论:PPARα能直接与cccDNA结合并有助于乙酰转移酶p300募集到cccDNA上,从而调控HBV微染色质的表观遗传学和HBV复制。这一发现对HBV与宿主转录因子间相互作用的相关分子机制提供了新的机制。; 谢冰珏郭进军张燕李青岭

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