- 鞘内注射重组大鼠脂质运载蛋白-2对大鼠吗啡镇痛效能的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 观察鞘内注射重组大鼠脂质运载蛋白-2（LCN2）对大鼠吗啡镇痛效能的影响,并探讨其分子机制。方法 健康雄性SD大鼠32只,体重150~180g,采用随机数字表法将鞘内置管成功的大鼠随机分为四组（n=8）：Ⅰ组为对照组：鞘内注射MES缓冲液10μl,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别鞘内注射10μl含LCN2蛋白0.02、0.2、2μg的MES溶液,每天1次,连续5d。分别在鞘内给药前和给药后第6、7、8天皮下注射吗啡10mg/kg,吗啡注射前和注射后45min测定大鼠热辐射缩足潜伏期（PWTL）,并计算最大可能镇痛效应百分比（MPE）。第8天行为学测试结束后处死动物,取脊髓腰膨大,采用Western blot法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）的表达;采用免疫组织化学法检测星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果 与Ⅰ组和给药前比较,Ⅱ组大鼠鞘内给药后基础PWTL和MPE差异无统计学意义,Ⅲ组、Ⅳ组鞘内给药后第6、7、8天基础PWTL和MPE均明显降低（P〈0.05）;与Ⅰ组比较,Ⅱ组鞘内给药后脊髓腰膨大内pp38 MAPK、脊髓背角GFAP表达差异无统计学意义,Ⅲ组、Ⅳ组脊髓腰膨大内p-p38MAPK、脊髓背角GFAP表达明显增加（P〈0.05）。结论 大鼠连续5d鞘内注射LCN2蛋白0.2、2μg能够诱导热痛敏并导致吗啡镇痛效能下降,其机制可能与活化脊髓内星型胶质细胞和p38 MAPK有关。
- 王芬谢滔江姿潞刘清珍刘健李伟彦
- 关键词：磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶星型胶质细胞
- 脊髓缝隙连接蛋白-30在大鼠吗啡耐受形成中的作用
- 目的：观察鞘内注射针对脊髓缝隙连接蛋白-30(CX-30)的小干扰RNA(siRNA)对正常大鼠吗啡耐受形成的影响及相关的分子机制。 方法：选取48只雄性Sprague Dawley大鼠，体重区间180-220g，随机...
- 谢滔
- 关键词：吗啡耐受星形胶质细胞
- 文献传递
- 甲烷对小鼠神经炎症损伤的影响及其可能机制
- 目的： 神经炎症反应是神经退行性疾病及认知功能障碍的主要病理机制。神经退行性疾病导致的认知功能障碍，主要表现为学习和记忆能力受损，严重影响患者的生活质量，并增加家庭和社会负担。神经炎症反应的病理特征主要包括中枢神经系统...
- 谢滔
- 关键词：甲烷气体小胶质细胞促炎因子
- 文献传递
- 脊髓脂质运载蛋白-2对大鼠吗啡耐受形成的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探索用RNA干扰（RNAi）法沉默脊髓脂质运载蛋白-2（lipocalin-2,LCN2）的表达及其对正常大鼠吗啡耐受形成的影响。方法 鞘内置管成功的♂SD大鼠48只,体质量180～220g,随机均分为4组,每组12只：Ⅰ组对照组、Ⅱ组吗啡耐受组、Ⅲ组错义小干扰RNA（mismatch siRNA,MMsiRNA）组、Ⅳ组LCN2小干扰RNA（LCN2siRNA）组。所有大鼠鞘内置管术后d6确定导管位置,记为d0。d2～8连续7d,每天2次进行皮下注射,每次注射剂量10μg.g-1,Ⅰ组大鼠皮下注射生理盐水（normal saline,NS）,Ⅱ-Ⅳ组大鼠皮下注射吗啡建立吗啡耐受模型。各组大鼠每天皮下给药前分别鞘内注射10μLDEPC溶液、10μLDEPC溶液、10μL含4μgMM siRNA的DEPC溶液和10μL含4μgLCN2siRNA的DEPC溶液。d1、d9,测定所有大鼠的基础热缩足反应潜伏期（paw withdrawal thermal latency,PWTL）及皮下注射吗啡后45min的PWTL,并计算吗啡的最大可能镇痛效应百分比值（%maximal possible effect,%MPE）。d9行为学测试结束后,取脊髓腰膨大,用Western blot法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38MAPK）及LCN2蛋白表达水平,用免疫组织荧光染色法检测小胶质细胞标记物Iba1的表达。结果 d9,与Ⅰ组比,Ⅱ、Ⅲ组大鼠%MPE值明显下降（P〈0.05）,腰段脊髓LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显增加（P〈0.05）。与Ⅱ组比,Ⅳ组大鼠的%MPE值明显增加（P〈0.05）,脊髓LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显下降（P〈0.05）。结论 鞘内注射LCN2siRNA沉默脊髓LCN2的表达能够部分抑制吗啡耐受的形成,该现象可能与其抑制脊髓背角小胶质细胞的活化及脊髓p-p38MAPK的表达有关。
- 王芬刘清珍刘健江姿潞谢滔李伟彦
- 关键词：吗啡耐受小干扰RNA小胶质细胞磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶脊髓
- 脊髓缝隙连接蛋白-30在大鼠吗啡耐受形成中的作用
- 2015年
- 目的观察鞘内注射针对脊髓缝隙连接蛋白-30（CX30）的小干扰RNA（siRNA）对大鼠吗啡耐受形成的影响及其相关的分子机制。方法雄性SD大鼠48只,随机分为空白对照组（Ⅰ组）、吗啡耐受组（Ⅱ组）、错配siRNA对照组（Ⅲ组）、CX30siRNA处理组（Ⅳ组）,所有大鼠鞘内置管,手术后确定导管位置并记为第0天。第1天上午测定大鼠热刺激缩足反应基础潜伏期（PWTL）（P1）及背部皮下注射吗啡5mg/kg后30min的PWTL（P2）,计算30min的最大可能镇痛效应比值MPE。第2～8天上午8：30,Ⅰ、Ⅱ组鞘内注射DPEC溶剂15μl,Ⅲ组鞘内注射错配siRNA 15μl,Ⅳ组鞘内注射CX30siRNA 15μl;9：00及17：00Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组背部皮下注射吗啡10mg/kg,Ⅰ组注射等量生理盐水。第9天行为学测试计算MPE,方法同第1天。随后处死大鼠取腰段脊髓采用Western blot检测CX30、ERK及p-ERK蛋白的表达,免疫荧光分析星型胶质细胞标记物GFAP的表达。结果第9天,与Ⅰ组比较,其余各组P2及MPE值明显降低（P〈0.05）;与Ⅱ组比较,Ⅳ组P2及MPE值明显升高（P〈0.05）。与Ⅰ组比较,其余各组p-ERK及CX30表达明显升高（P〈0.05）;与Ⅱ组比较,Ⅳ组p-ERK及CX30表达明显降低（P〈0.05）。与Ⅰ组比较,其余各组GFAP的表达明显增多（P〈0.05）,其中Ⅱ组与Ⅲ组GFAP表达最多;与Ⅱ组比较,Ⅳ组GFAP表达明显降低（P〈0.05）。结论鞘内注射CX30siRNA可以部分缓解大鼠吗啡耐受的形成,其机制可能与抑制脊髓CX30的表达,ERK磷酸化的下调,减少星型胶质细胞的活化有关。
- 谢滔刘清珍王芬江姿璐李伟彦
- 关键词：吗啡耐受星型胶质细胞缝隙连接蛋白小干扰RNA
- 分泌脂质蛋白-2激活小胶质细胞对大鼠抑郁症发病机制的影响被引量：6
- 2015年
- 目的分泌脂质蛋白-2(Lipocalin-2,LCN2)能促进小胶质细胞的M1途径,文中旨在探讨LCN2通过激活小胶质细胞在大鼠抑郁症发病中的影响及其相关机制。方法根据慢性应激反应抑郁模型(Mitogen-activated protein kinase,UCMS),将40只成年雄性SD大鼠分成4组(n=10):正常对照组、UCMS组、UCMS+LCN2 SiRNA组、SiRNA对照组。对UCMS组和UCMS+LCN2 SiRNA组的大鼠进行21 d的应激刺激建立抑郁模型。从应激刺激第7天开始,UCMS+LCN2 SiRNA组和SiRNA对照组的大鼠腹腔注射0.4 mg的10%水合氯醛麻醉,并予0.015μL/g的LCN2 SiRNA,3次/周,鞘内注射,至应激结束时(21 d)停止。正常对照组,UCMS组在同一时间同样的方法给予相同体积的等渗盐水。测定大鼠的体重进行蔗糖偏爱实验、强迫游泳实验测行为学。取大鼠的海马,于实验开始时及开始后第3周分别用免疫荧光法和免疫印迹法测定小胶质细胞特异标记物Iba1和LCN2的表达情况。结果第3周时,UCMS+LCN2 SiRNA组大鼠体重高于UCMS组[(262.82±0.01)g vs(179.98±0.08)g,P<0.05];正常对照组、SiRNA对照组大鼠体重较UCMS组、UCMS+LCN2 SiRNA组均升高(P<0.05)。UCMS组大鼠的蔗糖偏爱值(0.25±0.04)较UCMS+LCN2 SiRNA组(0.81±0.01)、正常对照组(0.82±0.01)及SiRNA对照组(0.82±0.01)显著降低(P<0.05)。UCMS+LCN2 SiRNA组的强迫游泳实验不动时间较UCMS组显著缩短[(4.64±0.8)s vs(23.11±2.63)s,P<0.05]。UCMS组大鼠海马中的LCN2的表达量较其他3组明显升高(P<0.05)。UCMS组大鼠海马中的Iba1较其他3组表达活跃。结论 LCN2与慢性应激反应诱导的抑郁症发病有关系,其机制可能与大鼠中枢系统中小胶质细胞的激活有关。
- 江姿潞王芬谢滔李伟彦
- 关键词：抑郁症小胶质细胞
