丁晓华
- 作品数：50 被引量：105H指数：6
- 供职机构：武汉大学基础医学院病毒学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 汉滩病毒RT-PCR扩增及核苷酸序列的进化树分析
- 为了了解湖北地区引起肾综合征出血热(HFRS)的汉滩病毒基因组的变异情况,从而为湖北地区HFRS的致病性研究,病毒的流行规律,HFRS的诊断疫苗研制提供理论依据.本实验拟应用RT-HFRS的致病性研究,病毒的流行规律,H...
- 杨占秋丁晓华肖红陈晓香徐芳玲侯炜文利
- 关键词：汉滩病毒基因分析核苷酸序列
- 文献传递
- RT-PCR扩增汉滩病毒及其核苷酸序列的发生树分析被引量：1
- 2003年
- 目的 用RT PCR方法扩增肾综合征出血热病人血样品中的汉滩病毒RNA ,对扩增产物进行测序并分析汉滩病毒基因组的变异。方法 用引物PⅠ PⅡ对 2 2例血样品中的汉滩病毒RNA进行第一次PCR扩增 ,PⅠ PⅡ扩增样品再用PⅠ 1 PⅡ 2引物进行槽式RT PCR扩增 ,将扩增效果良好的PCR产物进行测序 ,对测序结果用生物化学软件进行同源性比较和进化树分析。其中HV2 2 6样品用引物P1 P2进行RT PCR扩增。结果 2 2例肾综合征病人血样品用PⅠ PⅡ和P1 P2引物扩增有 19例阳性 ,其中编号W6 13、W1141样品用PⅠ 1 PⅡ 2进行槽式扩增后对其扩增产物直接进行测序。HV2 2 6号样品用引物P1 P2进行扩增后 ,其扩增产物也直接进行测序。对该 3株序列测定结果进行比较分析发现 ,编号W6 13、W1141样品核苷酸序列与HV114株的同源性为 84% ,而与HTN76 118株的同源性为 99%。HV2 2 6号样品与HV114有 95 %的同源性 ,而与HTN76 118有 82 %的同源性。进化树分析表明 ,W6 13,W1141与HTN76 118株位于同一分枝 ,而HV2 2 6与HV114、A9株处于同一分枝。结论 湖北地区汉滩病毒至少存在 2个亚型 ,其中W6 13、W1141与HTN76 118的核苷酸序列高度同源 ,属于同一亚型。而HV2 2 6与HV114属于另一亚型。
- 丁晓华杨占秋肖红陈晓湘徐芳玲侯炜文利
- 关键词：RT-PCR汉滩病毒核苷酸肾综合征出血热
- P21作为宫颈癌标志物和P21单抗临床应用的研究被引量：1
- 1991年
- 以人宫颈癌为材料,同一份样品用四个实验指标来检测和分析癌蛋白P21的表达变化。结果发现:宫颈癌组织中存在有P21的表达;表达蛋白的分子量约为21KD;表达的主要部位在恶变细胞胞浆和胞膜中;表达水平高于慢性炎症约六倍。实验结果在临床应用中得到了验证。54例宫颈石蜡切片用ABC免疫酶标法进行了检测。宫颈癌组P21阳性率和阳性强度明显高于慢性炎症组,二者有显著性差异(P<0.05)。
- 伍欣星赵文先杨平林宜先刘薇茜丁晓华邱小萍魏赛男戴天力谭云
- 关键词：子宫肿瘤标志物单克隆抗体
- 一种乙型肝炎和庚型肝炎病毒基因检测方法
- 本发明公开了一种肝炎病毒基因检测方法，提取RNA和DNA，包括下列步骤：1、取血清；2、加溶液；3、离心取上清(保留剩余液体)；4、加乙醇；5、沉淀溶于水中，提取RNA；6、加STE于保留的剩余液体中；7、离心取上清；8...
- 伍欣星郑义丁晓华赵旻邱小萍谭云赵文先
- 文献传递
- HPV16 E2基因各区域缺失与宫颈病变相关性的研究被引量：1
- 2010年
- 目的：检测湖北地区HPV16阳性宫颈标本E2基因碳端（C）、铰链区（H）、氮端（N）的缺失状态,探讨其与CIN及宫颈癌的关系。方法：将122例宫颈标本按病变程度分为宫颈癌组、CINⅡ~Ⅲ组、对照组。应用多重聚合酶链反应（PCR）将各组HPV16感染标本E2基因的C、H、N分别与E6基因同时扩增,检测E2基因各区域的缺失状态,并应用Scion Image4.0软件半定量分析E2、E6基因条带灰度值,判断HPV DNA的整合状态。结果：宫颈癌组E2基因C、H、N缺失率分别是22.5%,50%,77.5%;CIN组为30.77%,69.23%,92.31%;对照组为9.09%,27.27%,27.27%。E2基因C、H缺失率在3组的任两组间比较无统计学差异（P〉0.05）,而E2基因N端缺失率在宫颈癌组与对照组之间及CIN组与对照组之间差异有统计学意义（P均〈0.01）。结论：HPV16病毒E2基因N端缺失状态与CIN及宫颈癌有内在关系。在检测HPV感染同时检测E2基因N端缺失状态,对间接判断预后及指导后续治疗有重要意义。
- 张帅蔡红兵丁晓华
- 关键词：宫颈肿瘤宫颈上皮内瘤样病变E2基因人乳头瘤病毒
- 湖北地区22例宫颈癌组织中HPV 16型LCR基因变异特点分析被引量：1
- 2013年
- 目的:研究人乳头瘤病毒(HPV)16型LCR基因在湖北地区部分宫颈癌组织中的变异特点,通过系统发生学分析探讨宫颈癌患者感染的HPV16型变异株的流行型别及特征。方法:从22例宫颈癌手术切除标本中提取组织DNA,用HPV16LCR特异性引物进行PCR扩增,对扩增的LCR产物片段进行测序,用Paup 4.0软件使用邻接法对HPV16变异株进行系统发生学分析。结果:在22例宫颈癌组织中LCR基因存在着12个位点的基因变异。高频率突变位点有5个。其中第7 521位核苷酸由G变异为A,变异频率为100%;第7 730位核苷酸由A变异为C,变异频率为86.4%,第7 842位核苷酸由G变异为A,变异频率为77.3%,第7 714位由T变异为G,变异频率为31.8%;第7 930位核苷酸由C变异为T,变异频率为31.8%。HPV 16LCR中的5个高频位点,均位于可与多个转录因子结合的区域。对LCR基因进行的系统发生学分析表明,湖北地区流行的HPV16病毒株主要为亚洲型(As)变异体(77.2%),其次为欧洲型(E)(22.8%),没有发现非洲-1型(Af-1),非洲-2型(Af-2)和亚洲美洲型(AA)HPV16变异体。结论:湖北地区宫颈癌组织中LCR存在着一定程度的基因变异,其中一些高频位点与国内、外报道的结果有明显差异,可能是湖北地区LCR的突变热点。
- 张帆丁晓华熊斌
- 关键词：子宫颈癌系统发生学
- 宫颈癌中C-Ha-ras癌基因点突变的研究
- 1990年
- 宫颈癌是妇女生殖系统最常见的恶性肿瘤,严重威胁着我国妇女的身体健康和生命安全,对宫颈癌癌基因的研究有助于宫颈癌的早期诊断、防治以及肿瘤的分型。我们在国内首次将体外基因扩增技术(即PCR技术)应用于宫颈癌癌基因的研究,先人工合成两个特异性的寡核苷酸引物,在耐热DNA多聚酶的催化下,将宫颈癌DNA中C-Ha-ras癌基因第一个外显子的核苷酸序列放大百万倍左右,再以同位素标记的特异寡核苷酸探针杂交。
- 刘学锋赵文先杨平伍欣星丁晓华
- 关键词：基因点突变寡核苷酸探针多聚酶生殖系统
- 胃肠肿瘤中H-ras癌基因第十二位密码子点突变的研究
- 1992年
- 采用聚合酶链反应和寡核苷酸探针杂交法检测20例胃肠肿瘤中H-ras癌基因第十二位密码子的G→T点突变,结果在1/1贲门癌和4/13胃癌中发现有这种点突变的存在,而6例大肠癌中无1例发生突变,提示H—ras癌基因的点突变可能是贲门癌和胃癌中癌基因的激活方式之一。
- 刘学锋杨平田竞生伍欣星赵景枫丁晓华陈华珍赵文先
- 关键词：肠肿瘤基因胃肿瘤
- 聚合酶链反应扩增结核杆菌的临床应用被引量：8
- 1993年
- 采用PCR技术扩增人型结核分枝杆菌特异的158 bp DNA片段靶基因,检测60例肺结核病人痰标本,结果表明,阳性率达58.3%,对照的常规培养法阳性率为11.7%。20例非结核病患者痰标本两种检测结果均为阴性.研究结果表明,PCR 扩增检测结核杆菌技术比常规检验方法快速敏感,且有较高的特异性。
- 蔡建斌梅国华潘慧可杨平丁晓华刘薇茜
- 关键词：聚合酶链反应结核杆菌
- p53基因第72位密码子基因多态性与HPV16相关宫颈癌被引量：5
- 2012年
- 目的探讨湖北地区汉族女性人群中p53基因第72位密码子基因多态性与HPV16相关宫颈癌发生的关系。方法随机选取经PCR检测证实HPV16阳性的宫颈病变病例228例,其中病理证实为宫颈浸润癌的156例作为宫颈癌组,宫颈上皮内瘤变或宫颈炎72例为对照组。用直接PCR法检测新鲜组织标本中p53基因第72位密码子的基因型在宫颈癌组与对照组的分布情况,分析p53codon72基因多态性与HPV16阳性宫颈癌之间的相关性。结果所有样本均成功检测出p53codon72基因型。Pro/Pro、Arg/Pro、Arg/Arg在HPV阳性宫颈癌样本中所占比例分别为22.2%、47.2%、30.6%;在对照组中的比例分别为32.7%、53.2%、14.1%。两组总构成比差异有统计学意义(P=0.010)。与其他两种基因型相比,p53codon72Arg/Arg基因型在HPV16阳性宫颈癌样本检出率明显高于在HPV16阳性宫颈上皮内瘤变及宫颈炎组中的检出率(P=0.004,OR=2.680)。结论 p53codon72Arg/Arg基因型是湖北地区汉族女性发生HPV16相关宫颈癌的遗传易感因素。
- 陈长春丁晓华蔡红兵
- 关键词：宫颈癌P53基因基因多态性
