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荔枝核总黄酮对活化大鼠肝星状细胞的增殖抑制作用及TLR4表达的影响被引量：7: 2015年; 目的研究荔枝核总黄酮(TFL)在体外对活化的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法使用转化生长因子β1(TGF-β1)(5 ng/ml)激活HSC-T6,显微镜下观察HSC-T6和激活的HSC-T6形态变化;CCK8试剂盒(CCK8)法观察TFL作用24、48、72 h后活化的HSC-T6的增殖情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSC-T6中TLR4的表达;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果显微镜下观察HSC-T6和激活的HSC-T6形态有明显变化;CCK8结果显示TFL可以抑制HSC-T6的增殖(P<0.05),并且随着TFL浓度和作用时间增加,HSC-T6增殖明显下降,呈浓度依赖性;RT-PCR结果显示随着TFL浓度增加,HSC-T6中TLR4表达下降,与实验对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果表明TFL阻滞细胞于S期,G0/G1期细胞减少(P<0.05),S期细胞增加(P<0.05),促进细胞的凋亡(P<0.05),呈浓度依赖性。结论 TFL可以抑制HSC-T6的增殖,其作用机制可能是通过降低TLR4在HSC-T6中的表达,阻滞其细胞增殖和诱导细胞凋亡,达到抗肝纤维化效果。; 董勇赵永忠肖绪华刘燕秀李彩成秋宸; 关键词：荔枝核总黄酮肝星状细胞流式细胞术

荔枝核总黄酮干预大鼠肝星状细胞核因子κB核转位及相关蛋白表达的研究被引量：5: 2018年; 目的研究荔枝核总黄酮（TFL）对体外由转化生长因子p1（TGFD1）诱导活化的大鼠肝星状细胞T6细胞株（HSC-T6）中核因子KB（NF-κB）核转位及相关蛋白表达的影响，探究该药抗肝纤维化的作用机制。方法体外培养HSC-T6，通过TGFD1诱导24h后以125、250、500μg／ml的TFL干预48h，采用激光共聚焦显微镜观察TFL对HSC-T6内NF-κB核转位的影响，并以Westernblot法检测TFL对细胞中TLR4、P-IκBCt、P-NF-κBp65、NF-κB及CollagenI蛋白表达水平的影响，免疫荧光法检测TLR4、P-NF-κBp65的表达。数据采用均数±标准差表示，先进行方差齐性检验，再行单因素方差分析（ANOVA），组间多重比较采用LSD检验，P〈0．05为差异具有统计学意义。结果激光共聚焦显微镜可见TFL抑制活化HSC-T6中NF-KB的核转位，并具有浓度依赖性。TFL可下调HSC-T6中TLR4、P-IKBQ、p-NF-κBp65、NF-κB及CollagenI的蛋白表达水平，同时具有浓度依赖性。结论TFL的抗肝纤维化的机制可能与其抑制活化HSC-T6内NF-κB的核转位，下调HSC-T6中TLR4、P-IKBQ、D-NF-κBp65、NF-κB及CollagenI的表达相关。; 覃桂金赵永忠刘燕秀李彩曹杰成湫宸肖绪华卢青; 关键词：荔枝核总黄酮肝星状细胞核转位

荔枝核总黄酮对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞内NF-κB、α-SMA表达的影响: 目的研究荔枝核总黄酮(Total Flavone of Litchi Chinensis Sonn,TFL)对转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)诱导的大鼠肝星...; 赵永忠刘燕秀李彩董勇覃桂金成秋宸郑清华; 关键词：荔枝核总黄酮大鼠肝星状细胞核转录因子-ΚB Α-平滑肌肌动蛋白

荔枝核总黄酮对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞内NF-κB、α-SMA表达的影响被引量：2: 2015年; 目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞T6(HSC-T6)细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法 0.25%胰蛋白酶消化收集细胞,用含10%FBS的DMEM+5μg/L TGF-β1培养液配成单细胞悬液。(1)MTT法检测细胞增殖活力。将细胞接种于96孔培养板中,设TGF-β1组,对照组(含5‰DMSO),TFL80、160、320、640、800组(80、160、320、640、800 mg/L TFL),每组设3个复孔。加药24、48、72 h后,采用酶标仪测定490 nm处各孔吸光度(A)值并计算细胞抑制率;根据半数抑制质量浓度(IC50)确定后续实验的药物浓度组及药物作用时间。(2)采用PCR和Western blot分别检测HSC-T6细胞核转录因子(NF)-κB、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白的表达。将细胞接种于10 cm培养皿中,设TGF-β1组,对照组(含5‰DMSO),TFL125、250、500组(125、250、500 mg/LTFL),分组培养48 h后测定。结果同一作用时间点,随着TFL浓度的增高,HSC-T6细胞的A值基本逐渐降低,细胞抑制率逐渐上升。TGF-β1组NF-κB、α-SMA mRNA和蛋白表达量与对照组差异均无统计学意义,TFL125组与TGF-β1组、对照组差异均无统计学意义。随着TFL浓度的增高,HSC-T6细胞NF-κB、α-SMA mRNA和蛋白表达量基本逐渐降低。结论 TFL可抑制活化的HSC-T6细胞增殖,其可能通过抑制NF-κB、α-SMA的表达来发挥抗肝纤维化作用。; 刘燕秀赵永忠李彩董勇覃桂金成秋宸郑清华; 关键词：荔枝核总黄酮肝星状细胞 Α-平滑肌肌动蛋白

荔枝核总黄酮对体外活化肝星状细胞-T6增殖、凋亡及TLR4/NF-κB途径的影响被引量：8: 2016年; 目的:研究荔枝核总黄酮(TFL)在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及TLR4/NF-κB途径的影响,探究该药抗肝纤维化的作用机制。方法:体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺激24h后以不同浓度的TFL干预24、48、72h,用MTT法检测TFL对HSC-T6增殖的影响,Hoechst 33258荧光染色观察凋亡细胞形态学变化,采用流式细胞术、荧光定量PCR检测TFL对细胞凋亡及α-SMA、TLR4、NF-κB、Survivin m RNA表达水平的影响。结果:TFL以时间和浓度依赖性抑制活化的HSC-T6增殖,并以作用48h最为显著。TFL可促进细胞凋亡,下调HSC-T6中α-SMA、TLR4、NF-кB和Survivin m RNA表达水平,并具有浓度依赖性。同时Hoechst 33258染色显示TFL各组细胞可见细胞核固缩、边聚和裂解、凋亡小体形成等凋亡形态学变化。结论:TFL在体外可以抑制活化的HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与降低活化的HSC-T6内TLR4、NF-кB和Survivin m RNA的表达有关。; 韦铮武李彩林丽馨肖绪华刘燕秀董勇覃桂金赵永忠; 关键词：荔枝核总黄酮增殖凋亡

荔枝核总黄酮抑制人肝星状细胞增殖作用机制的研究被引量：3: 2016年; 目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞(HSC-LX2)增殖与核因子-k B(NF-кB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,TGF-β1刺激24 h后给予不同浓度的TFL(80、160、320、640、800μg/ml)干预;给药后24、48、72 h,用MTT法分别检测TFL对HSC-LX2增殖的影响;采用半定量PCR检测各组NF-кB、α-SMA mRNA的表达;Western blot检测NF-кB、α-SMA蛋白的表达情况。结果 MTT检测结果显示TFL呈时间依赖性抑制TGF-β1诱导HSC-LX2增殖,以作用48 h最为明显,其半数抑制浓度(IC50)为302μg/ml。TFL各剂量组作用48 h后,HSC-LX2细胞中NF-кB和α-SMA基因和蛋白的表达水平都降低,尤以300μg/ml和600μg/ml药物浓度组较明显,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论 TFL在体外对TGF-β1诱导的HSC-LX2的增殖有抑制作用,其作用机制可能是通过抑制细胞中NF-кB的表达,从而起到抗肝纤维化的作用。; 李彩林丽馨肖绪华刘燕秀成秋宸董勇覃桂金霍群卢青赵永忠; 关键词：荔枝核总黄酮人肝星状细胞细胞增殖

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刘燕秀

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