淡墨
- 作品数：34 被引量：85H指数：8
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学一般工业技术经济管理更多>>
- 不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒对A549细胞的毒性及DNA损伤被引量：1
- 2018年
- 目的:比较不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒(IONP_s)对A549细胞的细胞毒性、染色体和DNA损伤及其作用机制的差异。方法:比较相同粒径范围(约5nm)的胺基表面修饰的纳米氧化铁颗粒(Amine-IONP)和聚乙二醇表面修饰的纳米氧化铁颗粒(PEG-IONP)对A549细胞存活率和细胞周期的影响;使用高内涵法检测细胞经IONP_s处理后的胞内活性氧簇(ROS)含量、线粒体膜电位(MMP)和内质网(ER)状态的变化;采用体外胞质分裂法微核试验和彗星电泳评价IONP_s对染色体和DNA完整性的影响。结果:两种纳米氧化铁颗粒处理48h对A549细胞生长抑制率均小于20%。相同浓度条件下,PEG-IONP主要表现为对A549细胞G0/G1期阻滞,自20μg/mL起即明显减少S期细胞比率(P<0.01),320μg/mLPEG-IONP处理24h后可诱导p21与p53表达水平显著升高(P<0.05)。给药48h时,Amine-IONP作用后细胞ROS、MMP及ER水平显著性改变的起始浓度分别为20、20和80μg/mL,而PEG-IONP作用后产生显著性改变的起始浓度分别为40、40和160μg/mL。此外,与PEG-IONP比较,Amine-IONP可在较低浓度条件下诱导微核和彗星拖尾形成(Amine-IONP的起始浓度为20和80μg/mL;而PEG-IONP则为40和160μg/mL)。经氧自由基清除剂乙酰半胱氨酸和叔丁基对羟基茴香醚预处理后,两者导致的胞内ROS含量和尾部DNA百分率均明显降低(P<0.05)。结论:带正电荷的Amine-IONP更易于诱导A549细胞氧化应激及与之有关的DNA损伤;相比之下,PEG-IONP的细胞毒性和遗传毒性较弱,但除氧化损伤外也可通过抑制细胞周期干扰细胞增殖,作为肿瘤诊断试剂具有一定优势。
- 文海若郭雅娟郭雅娟黄芝瑛王雪
- 关键词：A549细胞微核试验彗星试验
- ADC药物A对中枢神经系统影响的研究
- 李芊芊唐文王超淡墨张颖丽王三龙汪巨峰
- 不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒诱导胶质瘤细胞自噬和凋亡的差异及自噬的调控作用
- 2018年
- 目的:研究不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒(iron oxide nanoparticles,IONPs)诱导胶质瘤细胞自噬和凋亡抑制杀伤作用的差异及自噬对凋亡的调控作用。方法:首先测定抑制自噬情况下,聚乙二醇表面修饰的氧化铁纳米颗粒(PEG-IONPs)、氨基表面修饰的氧化铁纳米颗粒(Amine-IONPs)和IONPs对人脑胶质瘤细胞(U87)生长的影响;然后利用高内涵的方法来评价3种IO NPs对诱导U87自噬能力的影响;最后用流式细胞术测定其引起细胞早晚期凋亡的差异,并同时评价诱导和抑制自噬对凋亡的影响。结果:3种IONPs在10、50和200μg·mL-1浓度时均可抑制U87的增殖,并呈明显剂量依赖性。Amine-IONPs诱导U87凋亡的能力显著性高于IONPs和PEG-IONPs。3种IONPs均可以显著性诱导U87产生自噬。抑制自噬可以显著性增强低剂量IONPs,特别是Amine-IONPs诱导的凋亡;然而抑制自噬反而降低高剂量IONPs和Amine-IONPs诱导的细胞凋亡。结论:不同表面修饰的IONPs诱导U87产生自噬和凋亡作用与其表面修饰密切相关。Amine-IONPs诱导的自噬在低高剂量显示出双向调节作用。
- 淡墨赵继云赵华琛张琳刘丽徐丽明
- 关键词：胶质瘤细胞凋亡自噬
- 高效液相色谱-串联质谱法定量测定大鼠血浆中LMV-12(HE003)及其代谢产物M4被引量：2
- 2021年
- 目的建立一种高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定SD大鼠血浆中LMV-12(HE003)(以下简称LMV-12)及其活性代谢产物M4的方法,并开展完整的生物分析方法学验证。方法采用蛋白沉淀提取血浆中LMV-12及M4,用HPLC-MS/MS方法进行定量分析。采用ACQUITY HPLC^(■)CSH C18色谱柱,以0.3%甲酸/40 mmol/L甲酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱实现快速分离。质谱采用电喷雾离子化电离源(ESI)、正离子检测模式和选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子反应为m/z 674.300→169.200(LMV-12),m/z 661.200→156.000(M4)和m/z 688.200→183.000(内标CH3-LMV-12)。结果完整的生物分析方法学验证结果显示,在本方法中LMV-12血浆浓度在20~8000 ng/ml范围内、M4浓度在5~2000 ng/ml范围内线性关系良好,方法的选择性、残留、准确度、精密度、基质效应、稳定性均满足生物样品定量分析要求。结论本方法检测快速、灵敏度高、操作简便、重现性好,能同时检测出LMV-12原型药及其代谢产物M4,适用于LMV-12的大鼠药代动力学和毒代动力学研究。
- 刘淑洁闻镍王宇黄舒佳淡墨汤瑶王晓霞陶琳耿兴超王三龙刘丽
- 关键词：高效液相色谱-串联质谱法SD大鼠生物分析蛋白沉淀
- MDCK/L02共培养模型评价小肠吸收对雷公藤甲素诱导肝细胞活性氧的影响被引量：3
- 2015年
- 目的建立MDCK/L02体外肝肠共培养模型,评价小肠吸收对雷公藤甲素(triptolide,TP)肝脏毒性的影响。方法利用Transwell培养体系,建立MDCK/L02模型。通过测定细胞间隙标记物荧光素钠的通透速率,评价共培养的模型,并进一步观察雷公藤甲素对小肠通透的影响。CCK-8法测定雷公藤甲素对MDCK的毒性。利用活性氧(ROS)探针结合高内涵,研究小肠吸收对雷公藤甲素诱导肝脏活性氧的影响。结果 MDCK/L02共培养模型形成良好的小肠吸收屏障,荧光素钠测得表观渗透系数为(4.10±0.36)×10-8cm·s-1。CCK-8法测定雷公藤甲素与MDCK孵育1、2和4 h的IC50分别为14、8和7μg·m L-1。雷公藤甲素加入MDCK/L02模型受池孵育1 h后,显著性增强小肠通透。经过小肠吸收后,雷公藤甲素对L02诱导活性氧的水平显著性降低。结论本实验成功建立MDCK/L02模型,并利用该模型评价显示雷公藤甲素显著性增强了小肠吸收通透,雷公藤甲素经小肠吸收后显著性减低雷公藤甲素的肝脏毒性。
- 淡墨于敏刘丽李佐刚
- 关键词：小肠吸收雷公藤甲素肝脏毒性
- 没食子酸通过内质网应激致HepaRG肝细胞毒性机制的研究
- 目的将对没食子酸（gallic acid,GA）致HepaRG肝细胞毒性的机制进行研究,阐明其产生内质网应激的具体通路,为何首乌中致肝损伤成分提供深入全面的探索基础和参考。方法采用CCK-8的方法检测GA对HepaRG细...
- 刘小茜淡墨耿兴超李波
- 关键词：没食子酸HEPARG肝毒性内质网应激
- 甘草酸二铵通过上调CYP3A4拮抗雷公藤甲素诱导肝细胞毒性被引量：8
- 2015年
- 目的:研究雷公藤甲素(triptolide,TP)诱导的肝细胞毒性及甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG)保护作用的潜在机理。方法:首先利用CCK-8法测定不同浓度DG预处理48 h后对TP诱导Hep G2细胞毒性的影响。然后利用活性氧(ROS)探针结合高内涵,研究不同浓度DG预处理对TP诱导肝脏ROS的影响。用ADMET Predictor(TM)软件预测TP对肝药酶(CYP3A4)的影响,进一步利用CYP3A4诱导剂和抑制剂确证肝药酶在DG解毒中的作用。结果:经CCK-8法测定,Hep G2经TP孵育1,2和4 h时,IC50分别为30,20和15μmol·L-1。当Hep G2经DG(10,100和1 000μmol·L-1)预处理48 h后,再与TP共同孵育1 h,IC50则分别升高至60,85和89μmol·L-1。此外,TP诱导Hep G2产生活性氧(ROS)呈现明显的剂量相关性。DG预处理48 h后可明显降低Hep G2诱导ROS的能力。ADMET Predictor(TM)预测结果表明TP是CYP3A4的底物并抑制CYP3A4的活性。用CYP3A4的诱导剂或DG预处理后,可显著性降低TP诱导ROS的能力。用CYP3A4的抑制剂和DG预处理,进一步反证诱导CYP3A4可能是DG保护作用的机制之一。结论:本研究提示DG可以显著性降低TP对肝细胞Hep G2的毒性。DG诱导CYP3A4上调在降低TP诱导肝细胞ROS起到了重要作用。
- 淡墨闻镍刘丽李佐刚
- 关键词：雷公藤甲素甘草酸二铵肝毒性CYP3A4
- 体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用
- 本发明涉及一种体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用，属于药物评价技术领域。该方法包括以下步骤：细胞培养：将HepaRG细胞和人肝星形细胞分别进行细胞培养，备用；细胞诱导：将上述HepaRG细胞接种于培养瓶内...
- 淡墨卢贤欢
- 文献传递
- 超高效液相色谱-串联质谱法测定Beagle犬血浆中抗肿瘤新药SM-1的方法研究及验证被引量：2
- 2020年
- 目的:SM-1为抗肿瘤创新药物,已经进入临床前研究。本研究建立并优化了超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定Beagle犬血浆中SM-1的分析方法,按照《生物样品定量分析指导原则》开展系统的方法学验证。方法:本研究采用蛋白沉淀方法对Beagle犬血浆样品中SM-1有效提取,采用Thermo Accucore C18色谱柱,以80%乙腈/甲醇溶液-0.1%甲酸/2 mmol·L^-1甲酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱分离,流速为0.3 mL·min^-1。进而采用电喷雾离子化电离源(ESI)、正离子检测模式和选择反应监测(SRM),以m/z 407.130→203.000(SM-1)和m/z 435.200→397.300(IS)为定量离子反应进行定量分析。结果:本方法在15~10000 ng·mL^-1定量范围内线性关系良好,准确度、精密度、稀释可靠性、选择性、残留、基质效应均符合要求,SM-1 Beagle犬血浆样品在室温放置6 h、-70℃条件下冻存37 d、经过4次冻融均稳定,样品提取液在自动进样器保存26 h稳定。结论:本研究建立并验证了测定Beagle犬血浆中SM-1浓度的方法,本方法操作简便、重现性好,为SM-1药动学、毒动学研究提供了良好的生物分析方法。
- 刘淑洁于敏王宇黄舒佳淡墨李佐刚耿兴超张河战杨进波刘丽
- 关键词：BEAGLE犬蛋白沉淀
- 体外肝脏3D模型在药物肝毒性评价中的优势
- ＜正＞目的:采用悬滴和凝胶支架技术建立肝脏体外3D模型,评价3D肝脏模型的肝脏功能相关指标与2D肝细胞培养的差异,并利用已建立的体外肝脏3D模型评价肝毒性药物,阐明体外肝脏3D模型在评价长期给药肝脏毒性的优势。方法:首先...
- 淡墨赵华琛吴宇苗玉发张迪杨艳伟刘丽李佐刚
- 文献传递
