- 重组表达天冬氨酸-β-脱羧酶及其酶学性质被引量：2
- 2015年
- 利用p ETDuet-1为载体在宿主细胞E.coli BL21(DE3)中重组表达了粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)来源的天冬氨酸-β-脱羧酶(Asd),研究了其酶学性质,考察了p H、p H稳定性、温度、热稳定性、底物浓度对酶活的影响。结果表明,天冬氨酸-β-脱羧酶重组表达成功;最适反应温度和p H分别为45℃和6.0;动力学常数Km和Vmax分别为0.72 mmol/L和10.52 mol/(L·min·g)。0.1 g菌体细胞在10 m L 0.2 mol/L磷酸缓冲溶液中催化2.0 g L-天冬氨酸,40℃,p H=6.0反应15 h,L-天冬氨酸的摩尔转化率达到98.6%。
- 吴四平陆阳张宏娟刘茜焦庆才刘均忠
- 关键词：L-天冬氨酸粪产碱菌L-丙氨酸生物工程
- 一种以富马酸为原料多酶偶联制备DL-丙氨酸的方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种以富马酸为原料多酶偶联制备DL-丙氨酸的方法。该制备方法以富马酸为原料，将分别含有天冬氨酸酶、天冬氨酸-β-脱羧酶和丙氨酸消旋酶的菌体细胞或该三种酶的粗酶液与一定浓度的富马酸铵水溶液混...
- 焦庆才刘均忠吴四平陆阳高亮刘茜
- 文献传递
- 一种对硅/锗的硅化学选择腐蚀方法
- 一种对硅/锗硅化学选择腐蚀方法,采用NH<Sub>4</Sub>OH溶液对硅/锗合金的硅进行化学选择性腐蚀。本发明所提出采用NH<Sub>4</Sub>OH溶液从锗硅上选择腐蚀硅的方法。此方法不仅具有很高的选择腐蚀比,而...
- 施毅郑有炓汪峰刘建林陆阳吴军张荣顾书林胡立群韩平江若琏朱顺明
- 文献传递
- L‑鸟氨酸酶法转化制备方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种L‑鸟氨酸酶法转化制备方法。该制备方法采用含有精氨酸的料液或精氨酸粗品或精氨酸盐粗品为底物配制酶转化液，加入具有精氨酸酶活性的菌体细胞或酶粗提液，在25～55℃、pH 7～11条件下进...
- 焦庆才刘均忠高亮陆阳刘茜
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- 双酶级联生物合成D-赖氨酸被引量：2
- 2015年
- 建立了氨基酸消旋酶和赖氨酸脱羧酶双酶级联高效生产D-赖氨酸的方法。利用氨基酸消旋酶全细胞催化消旋L-赖氨酸得到DL-赖氨酸,去除氨基酸消旋酶后再加入赖氨酸脱羧酶,将消旋产物中的L-构型脱羧生成1,5-戊二胺和CO2,剩下D-赖氨酸;最终,通过阳离子交换树脂吸附洗脱得到D-赖氨酸。经考察双酶级联催化的最佳条件为:反应温度40℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲溶液(p H=5.8),底物L-赖氨酸质量浓度为50 g/L,氨基酸消旋酶全细胞和赖氨酸脱羧酶全细胞质量浓度均为10 g/L,4 mmol/L磷酸吡哆醛,0.1 g/L Triton X-100,反应时间12 h,其中消旋反应2 h和脱羧反应10 h,最终D-赖氨酸收率达42%,对映体过量值(e.e.值)=98%。
- 陆阳吴四平张宏娟刘茜焦庆才刘均忠
- 关键词：生物工程
- 双酶级联生物合成D-氨基酸研究
- D-氨基酸广泛存在于微生物、植物和动物中，是非天然氨基酸，因其特殊的生物学性质，成为越来越重要的医药、食品添加剂和其他不同工业的中间体。D-氨基酸的制备方法有手性拆分外消旋体法、化学法、生物酶法和发酵法等，相较于化学合成...
- 陆阳
- 关键词：D-氨基酸生物合成
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- 两种不同来源富马酸酶酶学性质比较被引量：2
- 2016年
- 目前L-苹果酸已经工业化生产,但仍存在苹果酸产生菌株来源有限和产量不高等问题,为了拓展苹果酸产生菌的种类及酶活性,通过基因工程手段分别利用p ETDuet-1为载体在宿主细胞Escherichia coli BL21(DE3)中重组表达了谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)和大肠杆菌(E.coli)来源的富马酸酶,并对两者的酶学性质以及催化效率进行了比较。结果表明:两种来源的富马酸酶均构建成功,谷氨酸棒状杆菌来源的富马酸酶(fum Cc)最适温度和p H分别为30℃和8.0,大肠杆菌来源的富马酸酶(fum Ce)最适温度和p H分别为40℃和7.0;酶动力学分析表明,fum Cc酶催化效率(K_(cat)/K_m)是fum Ce的3.8倍。0.1 g菌体细胞在10 m L转化体系中催化1.5 g富马酸钠,在各自的最适条件下反应6 h,L-苹果酸的产率分别为85%和34%。
- 吴四平陆阳刘均忠刘茜焦庆才
- 关键词：L-苹果酸谷氨酸棒状杆菌大肠杆菌
- L-鸟氨酸酶法转化制备方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种L-鸟氨酸酶法转化制备方法。该制备方法采用含有精氨酸的料液或精氨酸粗品或精氨酸盐粗品为底物配制酶转化液，加入具有精氨酸酶活性的菌体细胞或酶粗提液，在25～55℃、pH 7～11条件下进...
- 焦庆才刘均忠高亮陆阳刘茜
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- 一种对硅/锗合金的硅化学选择腐蚀方法
- 一种对硅/锗合金的硅化学选择腐蚀方法，采用NH<Sub>4</Sub>OH溶液对硅/锗合金的硅进行化学选择性腐蚀。NH<Sub>4</Sub>OH溶液浓度控制在5-25%，腐蚀温度在60～85℃之间。此方法不仅具有很高的...
- 施毅郑有炓汪峰刘建林陆阳吴军张荣顾书林胡立群韩平江若琏朱顺明
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- 一种用SiGe/Si异质结构制备硅量子线的方法
- 一种利用SiGe/Si异质结构制备硅量子线的方法，其特征是在硅单晶上生长Si/SiGe/Si异质薄膜，光刻和反应离子刻蚀形成沟槽；采用选择化学腐蚀去除SiGe层并形成硅线，通过低温热氧化过程对硅线进行细化和光滑达到最终所...
- 施毅郑有斗刘建林张荣顾书林韩平汪峰陆阳朱顺民胡立群王荣华沈波
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