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银杏叶提取物通过增强自噬改善高糖刺激对HK－2细胞活力的抑制作用被引量：1: 2015年; 目的：研究银杏叶提取物对高浓度葡萄糖培养的人近端肾小管上皮 HK －2细胞的保护作用及相关机制。方法将经高糖刺激的HK－2细胞在不同浓度的银杏叶提取物下培养72h，采用MTT法检测细胞活力。随后，采用免疫印迹法检测 cleaved caspase －3／9、LC3－Ⅱ、p62、AKT、p－AKT、mTOR和p－mTOR的蛋白表达水平。结果在高糖环境下培养72 h后，HK－2细胞的活力受到显著抑制。而给予银杏叶提取物后，高糖刺激对HK －2细胞活力的抑制被明显改善。免疫印迹法结果显示，银杏叶提取物处理后，高糖刺激的 HK－2细胞中cleaved caspase－3／9的表达明显减少。且随着银杏叶提取物浓度的增加，LC3－Ⅱ的水平明显增强，而p62的水平显著降低，同时AKT和mTOR的磷酸化水平显著减弱。结论银杏叶提取物通过增强自噬来改善高糖刺激对HK －2细胞活力的抑制作用，这可能与其抑制AKT －mTOR信号通路有关。; 郭昊李成林; 关键词：自噬银杏叶提取物高糖

小分子热休克蛋白AgsA过量表达提高大肠杆菌的抗热性: 2015年; 目的探讨来自鼠伤寒沙门氏菌的小分子热休克蛋白AgsA过量表达对大肠杆菌（E．coli）抗热性的影响。方法将重组质粒pET21a—agsA转化到E．coliBL21（DE3）感受态细胞中，表达AgsA蛋白，并对其进行纯化。分别以乙醇脱氢酶和过氧化氢酶作为底物，检测AgsA蛋白的分子伴侣活性。将过量表达AgsA的E．coli在不同温度下处理，检测AgsA对Ecoli的热保护作用。结果重组质粒pET21a—agsA转化到E．coliBL21（DE3）感受态细胞之后，诱导目的蛋白表达，经纯化，获得高纯度的AgsA蛋白。该蛋白可以在体外阻止乙醇脱氢酶和过氧化氢酶在高温条件下发生的聚集。体内过量表达AgsA蛋白可以显著提高大肠杆菌的抗热性。结论AgsA蛋白通过其分子伴侣活性阻止大肠杆菌体内蛋白在高温下发生的聚集，从而提高大肠杆菌在高温环境下的生存率。; 郭昊石小东; 关键词：小分子热休克蛋白抗热性

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郭昊