肖飞
- 作品数：30 被引量：128H指数：6
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- 氧化应激及其评价指标在慢性阻塞性肺疾病中的作用被引量：15
- 2014年
- 慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）是以持续气流受限为特征的疾病,气流受限呈进行性发展,与气道和肺对有毒颗粒或气体的慢性炎症反应增强有关[1].慢阻肺的发病率、致残率和致死率较高,且造成严重的社会和经济负担[2].在全球范围内,40岁以上人群的慢阻肺发病率为9％～10％.世界卫生组织预计,到2030年慢阻肺将成为全球死亡的第四大病因[3].慢阻肺的发病机制尚不清楚,目前认为与气道和肺部慢性炎症、氧化应激和蛋白酶-抗蛋白酶失衡有关,氧化应激不仅可以直接损伤气道和肺组织,且可导致蛋白酶-抗蛋白酶失衡,促进炎症反应,在慢阻肺的发生和发展中起重要作用.本文对氧化应激在慢阻肺发病机制中的作用进行综述,并阐述氧化应激指标在评价慢阻肺严重程度、治疗反应及判断预后中的应用前景.
- 钟琳晔杨汀肖飞
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病氧化应激慢性炎症反应抗蛋白酶气流受限慢阻肺
- 氧化应激在肺血栓栓塞症及肺动脉高压中的作用
- 2014年
- 正常情况下,机体氧化与抗氧化反应处于动态平衡状态,当二者间的平衡被打破时,即发生氧化应激.氧化应激可发生于多种病理生理过程中,肺血栓栓塞症（pulmonarythromboembolism,PTE）和肺动脉高压的发生发展中均存在氧化应激环节,了解氧化应激的具体作用,有助于更深刻地理解PTE和肺动脉高压的发病机制,寻找可用于其诊断、危险分层、治疗效果监测及预后的新型生物标志物,开拓PTE和肺动脉高压治疗的新思路.现将氧化应激在PTE及肺动脉高压中的作用及相关研究进展综述如下.
- 张帅肖飞翟振国杨媛华王辰
- 关键词：肺动脉高压肺血栓栓塞症氧化应激病理生理过程平衡状态生物标志物
- DNA测序技术与仪器的发展被引量：11
- 2009年
- 由于分子生物学近年来的迅速发展,很多临床实验室开展了分子诊断实验项目。虽然目前由于操作复杂和高昂成本的原因,DNA测序技术尚没有大规模走进临床实验室,但是在众多分子诊断方法中,DNA序列测定和分析无疑是最权威的金标准。DNA测序技术在这几十年来从手工到自动化,从复杂到简单,但是近几年的高通量测序技术使之重新复杂起来,本文将介绍一下DNA测序技术与仪器的历史沿革与最新进展。
- 聂志扬肖飞郭健
- 关键词：分子诊断基因测序高通量
- 循证医学及其实践被引量：15
- 2000年
- 近年来 ,循证医学 (evidencebasedmedicine ,EBM)和循证检验医学 (evidencebasedlaboratorymedicine ,EBLM)在医学领域中迅速兴起 ,为以往以经验医学为主的临床医学注入了新的活力。循证医学的核心思想 ,是在最好的临床研究基础上 ,结合个人的临床经验做出医疗决策。“证据”是循证医学的基础 ,它主要来源于医学文献的研究报告 ,特别是采用随机对照实验、设计合理、方法严谨的临床研究数据。针对临床医学提出的问题 ,EBM采用系统回顾 (systematicreview)和荟萃分析等方法 ,对相关研究结果进行科学地评价以获取最佳证据 ,并用于解决临床医学问题。循证医学在中国仍处于发展初期 ,但其重要性受到愈来愈多的医学工作者的重视。为使实验室检验结果更好地为临床诊断、治疗和疾病监测服务 ,促使临床研究工作和撰写研究报告的规范化 ,我们将为读者陆续选编数篇此类文章 ,期望EBM和EBLM能在检验医学领域中发挥应有的效用。
- 郭健肖飞赵海舰
- 关键词：循证医学循证检验医学EBM
- 人胱抑素C参考物质制备方法的建立
- 2018年
- [目的]建立重组人胱抑素C(cystatin C)表达体系,获得可溶、稳定、高纯度的胱抑素C。[方法]密码子优化并人工合成人胱抑素C编码序列,与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至PRSF-Duet载体以构建重组人p MBP-CYSC PRSF表达质粒。使用大肠杆菌E. coli BL21(DE3) p Lys S对其进行诱导表达,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度和分子量,全自动生化仪测定纯化蛋白浓度及稳定性。[结果]成功构建重组人p MBP-CYSC PRSF表达质粒并诱导表达,胱抑素C蛋白浓度可达500 mg/L,纯度可达90%,在4℃和-20℃储存条件下监测64 w,胱抑素C蛋浓度稳定,均在允许相对偏差5%以内。[结论]通过密码子优化,成功获得浓度为500 mg/L、纯度为90%、存储稳定性至少达到64 w的胱抑素C蛋白,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。
- 邹丽辉邹丽辉王萌张恩毅黄薇张恩毅肖飞
- 关键词：重组蛋白表达
- 前列腺特异膜抗原对前列腺疾病的临床诊断意义被引量：3
- 2010年
- 目的评价血清中前列腺特异膜抗原(PSMA)浓度对前列腺疾病的辅助诊断意义。方法采用Western印迹分析检测患者血清中PSMA的浓度,前列腺特异抗原(PSA)检测采用通用的免疫化学发光法检测。分析二者在不同分组中的浓度差异及相关性。结果前列腺癌患者的血清中PSMA浓度显著高于正常人群,良性前列腺增生和前列腺炎的患者则低于正常人群,而PSA浓度无论是前列腺癌还是前列腺良性病变均高于正常人。结论前列腺特异膜抗原浓度可以作为区分前列腺癌和良性前列腺增生的辅助诊断标志物。
- 王大光杨晓枫佟大伟肖飞
- 关键词：前列腺特异性膜抗原血清浓度前列腺癌
- 一种高效制备人乳酸脱氢酶LDH_5参考物质的方法及应用
- 2017年
- [目的]研究高效、廉价制备人乳酸脱氢酶LDH5参考物质的方法。[方法]选取人乳酸脱氢酶基因(LDHA)CDS序列进行分析及优化,合成优化后的基因,克隆至表达载体pRSF-Duet中构建重组乳酸脱氢酶LDH5表达载体。使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株对目的基因进行表达,异丙基硫代半乳糖苷酶(IPTG)诱导,镍离子亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定酶纯度,BCA法分析酶浓度,全自动生化仪分析酶活性、稳定性。[结果]经优化后的LDHA基因的大肠杆菌密码子适应指数为1;纯化蛋白达到电泳纯,比活性达19.01 U/mg,在4℃及25℃可稳定保存8 d。[结论]重组乳酸脱氢酶的表达效率为100 mg/L,酶活性、稳定性、纯度达到临床生化检测的参考物质的条件,可以作为血清乳酸脱氢酶检测的标准物质。
- 刘赪阳王玉梅黄薇王萌张恩毅郭健肖飞
- 关键词：乳酸脱氢酶基因重组密码子
- 前列腺组织中p16基因的甲基化程度定量分析
- 本文首先建立一种称之为亚硫酸氢盐和限制性内切酶组合分析法(combined bisulfate restriction analysis，COBRA)，并通过该方法比较p16基因在正常前列腺细胞和前列腺癌细胞中甲基化情况...
- 王大光杨晓枫郭健肖飞
- 关键词：前列腺组织P16基因
- 文献传递
- IL-6、TNF-α、GR-α、GR-βmRNA与常见眼眶疾病患者对糖皮质激素敏感性的关系
- 2021年
- 目的分析白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α亚型(GR)及β亚型(GR-β)mRNA与常见眼眶疾病如甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)和特发性眼眶炎性假瘤患者(idiopathic orbital inflammatory pseudotumor,IOIP)与糖皮质激素(glucocorticoid,GC)敏感性的关系。方法收集首都医科大学附属北京同仁医院眼肿瘤门诊TAO患者62例及IOIP患者36例,包括糖皮质激素敏感组和抵抗组。收集EDTA-K 2外周抗凝血,将标本一分为二,分为处理组和对照组。处理组加入终浓度为100 nmol/L的地塞米松,对照组加入等体积的二甲基亚砜,室温下处理7 h。实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q-PCR)法检测患者外周血白细胞GR-α、GR-β、IL-6及TNF-α的mRNA表达量,分析其与患者对GC敏感性的关系。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价GR-α/β指标区分患者对GC敏感性的效能。结果TAO敏感组和抵抗组IL-6、TNF-α、GR-α及β的差异无统计学意义(P>0.05);GR-α/β的差异有统计学意义(P<0.05);GR-α/β的ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.70(95%CI:0.54~0.87),临界值取1.255,此时灵敏度和特异度分别为85%和53%。IOIP敏感组与抵抗组IL-6、TNF-α及GR-α的差异无统计学意义(P>0.05);GR-β及GR-α/β在两组之间差异有统计学意义(P<0.05);GR-α/β的AUC为0.77(95%CI:0.58~0.95),临界值取1.005,此时灵敏度和特异度分别为90%和72%。结论GR-α/β有望成为预测TAO和IOIP患者对GC敏感性的指标。
- 赵珂马建民肖飞肖飞
- 关键词：敏感性甲状腺相关性眼病特发性眼眶炎性假瘤糖皮质激素受体
- VanB表型-vanA基因型VRE分子特征及遗传背景研究被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨VanB表型-vanA基因型VRE耐药转座子结构、分子特征及遗传背景,并与VanA表型-vanA基因型VRE进行比较分析,以确定基因型与表型不一致的形成机制.方法 收集2008年3月至2009年1月卫生部北京医院临床标本中21株VRE菌株,用Etest法对10种抗生紊进行MIC测定,并通过PCR、序列测定、接合试验、耐药转座子结构、PFGE及MLST进行分子特征和遗传背景研究.结果 21株VRE均为vanA基因型,其中3株菌呈现VanB表型（万古霉素耐药,替考拉宁敏感）;21株菌属于9个不同PFGE型,6个不同MIST型;多对引物对转座子的不同区域PCR扩增并进行序列拼接、比对,发现Tn1546结构中vanX、vanY的缺失及ISEfa4的插入与VanB表型-vanA基因型VRE菌株形成相关.结论 VanB表型-vanA基因型VRE菌株在国内较为罕见,Tn1546结构的改变与菌株的基因型与表型不一致相关.
- 许宏涛陈东科肖飞陶凤蓉艾效曼胡云建李金明
- 关键词：肠球菌属脉冲场细菌分型技术
