曾梦
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- KLF14过表达促进肝细胞糖摄取的机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的观察Kruppel样因子14（KLFl4）基因过表达对肝细胞胰岛素信号通路以及AMP活化的蛋白激酶（AMPK）关键信号分子的影响，探讨KLFl4影响糖代谢的分子机制。方法建立KLFl4过表达的Hepal-6肝癌细胞模型，分为空载组、胰岛素组、KLFl4转染组和胰岛素＋KLFl4处理组，采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法检测肝癌细胞对葡萄糖的摄取率。以Western印迹检测KLFl4过表达对胰岛素信号通路中各信号分子的磷酸化水平及磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）蛋白表达的影响。结果胰岛素处理Hepal-6细胞后，KLFl4转染组与未转染组相比，葡萄糖摄取率明显升高（P〈0．01）；胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物（IRS）1、蛋白激酶B（Akt）、AMPK、CREB转录共激活因子2（TORC2）的磷酸化水平均明显增加（P〈0．01）；而且，糖原合成酶激酶3B的磷酸化水平亦明显增加，而PEPCK的蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论KLFl4过表达可能通过活化胰岛素InsR／IRS／Akt经典通路，从而改善肝细胞的胰岛素抵抗，且可能通过AMPK／TORC2／PEPcK信号通路抑制肝糖异生，并促进糖摄取和肝糖原的合成，从而改善糖代谢。
- 任艳李伶杨刚毅代继桓贾彦军罗小河冉文侠曾梦
- 关键词：胰岛素信号通路
- KLF14基因过表达对改善Hepa1-6小鼠肝癌细胞胰岛素抵抗的作用
- 2015年
- 目的探讨KLF14基因过表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6胰岛素抵抗的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-QPCR)检测KLF14基因m RNA在健康C57BL/6J小鼠各组织的表达分布情况;构建小鼠KLF14基因重组真核表达质粒p IRES2-EGFP-KLF14并转染Hepa1-6细胞,RT-PCR法检测KLF14基因m RNA的表达;Western印迹检测KLF14及p-AKT蛋白水平的表达。结果成功构建p IRES2-EGFP-KLF14质粒;转染肝癌细胞48 h后,KLF14 m RNA和蛋白水平明显高于对照组和空载组(P<0.01);转录水平上KLF14基因在小鼠体内普遍表达,其m RNA相对表达量由高到低依次为心脏、骨骼肌、肝脏、脂肪、小肠、肾脏、脑、肺、胃、脾、附睾;非转染组给予血清干预后,正常人血清处理组和糖尿病病人血清处理组无明显差异;而转染组给予血清干预后,糖尿病病人血清处理组p-AKT表达量较正常人血清处理组明显增加;在胰岛素刺激情况下,无论转染组或非转染组,给予PI3K抑制剂LY294002后,p-AKT表达受抑。结论 KLF14在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中发挥一定作用;KLF14基因过表达可促进AKT的活化,并且其增加胰岛素敏感性的作用在糖尿病状态下较正常人更为明显。
- 代继桓李伶杨刚毅任艳贾彦军罗小河冉文侠曾梦
- 关键词：基因表达胰岛素抵抗
- 中枢nesfatin-1表达下调对SD大鼠胰岛素信号通路的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨中枢nesfatin-1表达下调对SD大鼠肝胰岛素信号通路的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为普食喂养+人工脑脊液(a CSF)输注组(NCA组,n=10),普食喂养+Ad-sh GFP输注组(NCG组,n=10),普食喂养+Ad-sh NUCB2输注组(NCN组,n=10),高脂喂养+人工脑脊液(a CSF)输注组(HFA组,n=10),高脂喂养+Ad-sh GFP输注组(HFG组,n=10),高脂喂养+Ad-sh NUCB2输注组(HFN组,n=10)。构建第三脑室微量输注系统进行第三脑室干预,留取普食组大鼠下丘脑、肝脏、脂肪和肌肉组织采用Western印迹测定nesfatin-1表达。采用Western印迹法测定各组大鼠G6Pase及PEPCK的表达水平以和IR、IRS-1、AKT、STAT3及m TOR的蛋白磷酸化水平变化。结果和NCA或NCG组分别相比,NCN组下丘脑nesfatin-1表达显著降低(P<0.05),而外周组织(肝、脂肪及肌肉)nesfatin-1表达无显著差异。和NCA组相比,HFA组的G6Pase、PEPCK表达水平均显著增高,而IR、IRS-1、AKT、STAT3、m TOR的蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。和NCA或NCG组相比,NCN组的G6Pase、PEPCK表达水平均显著增高,而IR、IRS-1、AKT、STAT3、m TOR的蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。和HFA或HFG组相比,HFN组的G6Pase、PEPCK表达水平均显著增高,而IR、IRS-1、AKT、STAT3、m TOR的蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。结论中枢Ad-sh NUCB2输注可下调SD大鼠下丘脑nesfatin-1表达,同时下调机体肝胰岛素信号通路级联反应蛋白水平,可能通过抑制m TOR/STAT3信号通路从而降低机体肝脏糖异生。
- 瞿文娟曾梦李志勇程昌琴杨若梅蒋先淑杨刚毅李伶
- 关键词：NESFATIN-1胰岛素信号通路
