杨艳歌
- 作品数：45 被引量：80H指数：6
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划中国检验检疫科学研究院基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学医药卫生理学更多>>
- 毛细管电泳技术检测羊乳婴幼儿配方粉中的牛乳成分被引量：13
- 2019年
- 婴幼儿配方乳粉的乳源鉴别对于保障产品安全和真实性至关重要。采用毛细管电泳技术对羊乳来源的婴幼儿配方粉中的牛乳成分进行检测。通过比较不同乳源产品中主要蛋白质组分的电泳图谱,筛选出牛乳表征蛋白峰。通过方法验证以及检测市售样品,证实毛细管凝胶电泳在准确度、精密度及重复性方面表现良好,筛选的表征蛋白峰峰面积与羊乳中牛乳含量呈现良好线性相关性(R^2>0.99),检测灵敏度0.5%,表明该方法可用于羊乳来源婴幼儿配方粉中牛乳成分的定性和定量检测。
- 刘鸣畅侯艳梅杨艳歌黄文胜陈颖吴亚君
- 关键词：牛乳蛋白
- 食源性致病菌快速检测技术研究进展被引量：13
- 2022年
- 食源性致病菌是影响食品安全的主要问题之一。建立快速的食源性致病菌检测方法对控制农产品和食品从生产、加工、运输、仓储、口岸通关到销售和消费各个环节的生物性风险至关重要。由于传统病原微生物检测耗时长且操作较繁琐,不能及时检测出食品中的病原菌。近年来随着生物技术的快速发展以及对食品安全监测要求的提高,食源性致病菌快速检测方法的研究和建立受到高度重视,但由于检测方法种类较多,缺乏统一的评价指标,难以对不同的方法进行对比。本文以目前报道较多和实现商品化应用的快速检测方法如显色培养基技术、腺苷三磷酸发光技术、免疫学技术、分子生物学技术、生物传感器技术、流式细胞技术以及光谱技术等,从食物基质、检测限、检测时间、优缺点以及是否需要预增菌/分离/富集前处理步骤等多个角度进行横向比较,总结了各类方法的基本原理、主要技术路线和关键指标参数,以期为后续相关方法的技术评价和比对提供参考。
- 王丹丹刘鸣畅杨艳歌王洪越袁飞吴亚君吴淑清
- 关键词：食品安全食源性致病菌
- 实时荧光PCR鉴别树莓成分的组合物、试剂盒和方法
- 本发明涉及树莓成分的实时荧光PCR方法。本发明还涉及用于所述方法的寡核苷酸引物探针组合物。本发明还涉及包含所述组合物的实时荧光PCR试剂盒。使用本发明的组合物进行实时荧光PCR检测，能够通过简单、快速、特异且灵敏地检测果...
- 陈颖吴亚君杨艳歌
- 快速检测GI群诺如病毒的ERA方法、组合物和试剂盒
- 本发明涉及GI群诺如病毒的酶促重组等温扩增技术（Enzymatic Recombinase Amplification，ERA）基础型和荧光型两种快速检测方法。本发明还涉及用于所述方法的寡核苷酸引物和探针组合物。本发明还...
- 袁飞杨艳歌吴占文李红娜李涛王迎春王帅
- 文献传递
- 沙门氏菌ERA可视化快速检测方法的建立
- 2023年
- 为实现食品中沙门氏菌的快速检测,选用文献报道的沙门氏菌RPA引物和探针,建立酶促等温扩增(ERA)荧光法和显色法两种沙门氏菌可视化快速检测方法,并分析两种方法的特异性、灵敏度、检出限等指标。同时,为满足实验室外现场检测环境的要求,分别采用自热包和热帖作为现场DNA提取和ERA反应的热源,建立不依赖实验室设备的方法。优化后两种ERA方法检测时间分别为11 min和4 min,灵敏度均可达10^(-2) ng/μL,人工污染样品增菌培养4 h后检出限为1 CFU/mL。本研究创新性地将沙门氏菌RPA引物探针应用到ERA检测体系,建立了荧光法和显色法两种可视化快速检测方法,并集成现场DNA提取和ERA反应检测套组,提高了扩增效率,摆脱了对传统实验室设备的依赖,对于推进食源性致病菌现场可视化快速检测具有重要意义。
- 杨艳歌王帅李红娜李涛吴占文孙冬梅袁飞
- 关键词：沙门氏菌可视化食源性致病菌
- 油菜蜂花粉总黄酮对体外TBHP诱导细胞氧化损伤的保护作用被引量：4
- 2018年
- 为研究油菜蜂花粉总黄酮(rape bee pollen flavonoids,RBPF)抗心血管疾病的作用机制,以RBPF为研究对象,利用人工建立的血管内皮细胞氧化损伤模型,对RBPF的抗氧化活性进行初步研究,在体外水平探索RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。采用超声醇提及大孔树脂纯化的方法提取富集RBPF,同时采用过氧化氢叔丁醇(tert-Butyl hydroperoxide,TBHP)诱导细胞氧化损伤,建立人脐静脉内皮融合细胞系EA.hy926的氧化损伤模型,并利用此模型研究RBPF在细胞水平的抗氧化作用,以公认抗氧化性质良好的黄酮类化合物槲皮素作为阳性对照,CCK8法检测细胞活力。首先,用梯度稀释的RBPF及槲皮素作用于正常培养细胞,分析其细胞毒性,确定毒性阈值;然后,在毒性阈值范围内设置梯度浓度的槲皮素溶液作用于细胞损伤模型,确定槲皮素最佳抗氧化浓度剂量,并以此剂量组作为阳性对照组,与毒性阈值范围内梯度浓度的RBPF同时作用于细胞损伤模型,研究RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护情况。结果表明:其一,体外血管内皮细胞EA.hy926氧化损伤模型的最佳建模条件确定为500μmol·L^(-1)TBHP作用3h;其二,细胞毒性试验结果表明,对于血管内皮细胞EA.hy926,RBPF的毒性阈值为24mg·L^(-1),阳性对照品槲皮素的毒性阈值为50mg·L^(-1);其三,CCK8法测定RBPF对细胞氧化损伤模型的保护作用,结果显示在6~18mg·L^(-1)剂量范围内,RBPF预处理对EA.hy926细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用(p≤0.05),其抗氧化作用在低浓度(≤10mg·L^(-1))范围内呈上升趋势,在高浓度(≥14mg·L^(-1))范围内呈下降趋势,在10,12,14mg·L^(-1)3个剂量组其抗氧化性优于槲皮素(25mg·L^(-1)),RBPF浓度为10mg·L^(-1)时效果最佳。综上所述得出结论,对于血管内皮细胞氧化损伤模型,RBPF表现出了极好的体外抗氧化效果,可作为优质的预防心血管疾病的天然产物资源进行深入开发
- 杨悦刘鸣畅王凯吴黎明杨艳歌吴亚君
- 关键词：TBHP
- GeXP多重PCR鉴别鹿种的组合物、试剂盒和方法
- 本发明涉及马鹿、驯鹿、麋鹿、黇鹿、白唇鹿5种鹿成分的GeXP多重PCR方法。本发明还涉及用于所述方法的寡核苷酸引物探针组合物。本发明还涉及包含所述组合物的GeXP多重PCR试剂盒。使用本发明的组合物进行GeXP多重PCR...
- 陈颖吴亚君凌胜男杨艳歌刘鸣畅韩建勋
- 文献传递
- 婴儿配方乳粉中食源性致病菌双重ERA快速检测方法的建立
- 2023年
- 为快速多重筛查婴儿配方乳粉中食源性致病菌的污染情况,建立克罗诺杆菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌及金黄色葡萄球菌双重酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)快速检测方法。首先,通过筛选确定对4种食源性致病菌特异性好、扩增效率高的引物探针。经过优化建立两组双重ERA检测体系可快速筛查4种食源性致病菌。该方法对沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌及金黄色葡萄球菌的检出限均为10^(-2) ng/μL;对克罗诺杆菌的检出限为1 ng/μL。模拟污染实验显示,污染量为1 CFU/mL的样品增菌培养6 h后,可检出4种致病菌。应用该方法对市售婴儿配方乳粉样品进行检测,检测结果与行业标准规定的实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法一致,证实了本研究建立的双重ERA检测方法的准确性和可靠性。采用本方法仅需20 min左右即可一次性检出4种致病菌,相较于传统的“金标准”方法以及实时荧光PCR法显著提高了检测效率,对于推进食源性致病菌的快速筛查具有重要意义。
- 林志伟王帅王迎春吴占文李涛李红娜杨艳歌袁飞
- 关键词：沙门氏菌单核细胞增生李斯特菌
- 双重荧光RT-ERA技术快速检测贝类食品中诺如病毒
- 2023年
- 目的:基于逆转录-酶促重组等温扩增(reverse transcription-enzymatic recombinase amplification,RTERA)技术,以MS2作为模式过程控制病毒,建立一种贝类食品中GI与GII型诺如病毒(norovirus,NoV)双重荧光RT-ERA快速检测方法。方法:分别将GI、GII NoV参考靶序列克隆到带有T7启动子的载体中,通过体外转录的方式获得高纯度NoV RNA参考样品。以设计的MS2噬菌体引物探针,与实验室前期筛选的GI、GII NoV引物探针进行双重荧光RT-ERA实验,并对反应体系和反应程序进行优化,分析方法的灵敏度。最后,采用建立的方法开展真实样本检测,以GB 4789.42-2016《食品微生物学检验诺如病毒检验》为参比方法进行检测结果对比,确定方法的准确性和可行性。结果:建立MS2与GI、MS2与GII两组双重荧光RT-ERA检测方法,最佳引物及探针体积分别为4.1μL与1.8μL,检测时间可缩短至10 min左右,且最低可检出102拷贝/μL的NoV核酸样品。应用所建立的方法对29份真实样品进行检测,检测结果与GB 4789.42-2016一致。结论:本研究建立的双重荧光RT-ERA检测方法可实现对MS2、GI和GII NoV的同时检测,且灵敏度高、准确性强,为今后NoV现场快速检测提供一定基础。
- 吴占文王帅康婕李涛李红娜蔡杰张昊杨艳歌袁飞
- 关键词：诺如病毒双重荧光
- 诺如病毒快速检测技术研究进展被引量：3
- 2023年
- 以食物和水作为传播基质的诺如病毒(NoV)能够在全球范围内引发急性肠胃炎,但目前没有特效的抗病毒药物,只能通过快速检测在早期筛查识别NoV,从而预防NoV的传播并及时做出干预措施。传统的检测方法耗时耗力,操作繁琐,不利于NoV的即时检测,因此NoV快速检测技术的建立成为研究者不断探究的问题。目前已有一些快速检测方法的报道,但由于NoV体外不可培养的特性,很难进行方法间的试验比较。因此,本文针对目前报道较多的快速检测技术进行了梳理,综述了分子生物学、免疫学、生物传感器等技术在NoV快速检测中的应用及发展趋势,从方法的检出限、检测时间以及优缺点等进行了整理比较,以期为将来NoV的现场快速检测及后续相关新型检测技术的研究提供参考。
- 杨艳歌吴占文李涛李红娜王帅孙冬梅袁飞
- 关键词：诺如病毒分子生物学免疫学生物传感器
