周涯
- 作品数：15 被引量：9H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- P21基因参与早期诱导RUNX1b过表达抑制人类造血发生
- 2019年
- 目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1[CDKN1A(P21)]对造血发生过程的影响。方法对RUNX1b诱导过表达hES细胞系(RUNX1b/hESC)与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM)基质细胞AGM-S3共培养4 d细胞,使用多西环素(DOX)(1μg/mL)与RepSox(0.33μmol/L)或不同浓度DOX(1、0.5、0.2、0.1μg/mL)诱导RUNX1b过表达时,以qRT-PCR技术检测P21与RUNX1b相对表达情况。利用基于转座子载体PiggyBac的PB-tet-on-OE真核诱导过表达系统,建立P21诱导过表达hES细胞系(CDKN1A/hESC)。分别在CDKN1A/hESC与AGM-S3共培养d0、d2、d4、d6添加DOX诱导P21过表达,培养8 d或14 d,通过流式细胞术(FACS)检测血细胞表面分子的变化情况,以判断诱导P21过表达对造血发生产生的影响。结果 qRT-PCR显示:P21表达量随着RUNX1b过表达上调,同时加入RepSox时表达基本处在正常水平,随着DOX浓度降低,RUNX1b与P21表达水平下降。在造血分化的早期,特别是共培养d0开始诱导P21过表达的共培养体系所产生的CD34^-CD43^+、CD34^-CD45^+与CD34^+CD45^+细胞群相较于对照分别降低了85%,94%和78%,当共培养d6后诱导P21过表达上述现象消失。结论 P21可能参与了由RUNX1b诱导过表达所引起的人类早期造血发生的抑制效应;早期诱导P21过表达明显抑制造血细胞产生。
- 常晶滕嘉雯孙文翠曾加辉张勇刚潘旭周涯赖默温边国慧周琼秀刘嘉馨陈波马峰
- 基于一种多孔材料的诱导NK细胞的方法
- 本发明公开了基于一种多孔材料的诱导NK细胞的方法。本发明提供的诱导NK细胞的方法，基于含网筛培养槽及多孔明胶海绵的装置及培养基，高效诱导iPSCs‑NK，解决当前iPSC‑NK的分化培养技术依赖动物来源的饲养层细胞，分化...
- 张勇刚余佳唐诗丽马艳妮薛原周涯
- 丙型肝炎病毒载量与疾病进程相关性分析
- 苑宇哲季阳汪学纯杨秀华周涯边国慧李世林
- 血液制品原料混合血浆中微生物组筛查及病原体鉴定被引量：1
- 2012年
- 血液和血液制品常作为药物来拯救生命,但除了血液常规筛查的4种病原体HIV、HBV、HCV和梅毒外,在合格血浆里,仍可能有大量的病原体威胁血液安全,并可能通过输血传播疾病。然而,目前我国采供血系统和血液制品生产厂家并没有开展这些未检测病原体的调查。因此,本研究通过随机引物扩增的方法,测序获得血液制品多人份混合原料血浆中的微生物组,并通过GenBank同源性比对鉴定出微生物组中的病原体类型,从而评估我国血液制品原料混合血浆的安全现状。将来自贵州地区的12ml血液制品原料混合血浆(8000人份混合),通过0.45μm和0.22μm的滤膜过滤,然后40000r/min,超速离心90min。
- 何苗周涯李武平
- 关键词：混合血浆血液制品输血传播疾病血液安全超速离心
- 人胚胎干细胞向嗜酸性粒细胞高效定向诱导分化模型的建立被引量：1
- 2015年
- 目的建立从人胚胎干细胞向成熟嗜酸性粒细胞定向诱导分化的高效体外培养模型。方法采用人胚胎干细胞与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM)基质细胞共培养的方法,进行早期造血干细胞诱导分化,将诱导分化的造血干细胞进行悬浮培养,在含有血清的培养基中,分阶段添加不同细胞因子组合进行成熟嗜酸性粒细胞的定向分化和增殖。结果获得从CD34+CD45+细胞扩增了约651倍,且纯度高达95%以上,CD88+Siglec-8+EPO+的成熟嗜酸性粒细胞。结论本研究建立了1种人胚胎干细胞高效定向分化为成熟嗜酸性粒细胞的模型,为进一步深入研究嗜酸性粒细胞的早期发育调控和相关疾病的发生机制奠定了基础。
- 潘旭杨文钰孙文翠毛斌郁金凤路旭琳黄淑赖默温周涯邹庆李晴曾宪波周家喜马峰
- 关键词：人胚胎干细胞嗜酸性粒细胞定向诱导分化
- 可诱导GATA-1和GATA-2基因过表达hES细胞系的建立及其在人类早期造血发生中的功能探索
- 目的: 人类多能干细胞（包括人胚胎干细胞human embryonic stem cells，hESCs和诱导性多能干细胞human induced pluripotent stem cells，hiPSCs）作为全能...
- 周涯
- 血液制品原料混合血浆中微生物组筛查及病原体鉴定
- 何苗周涯李武平
- 带有标记基因的Tet-on诱导过表达的重组载体及构建方法
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种带有标记基因的Tet‑on诱导过表达的重组载体及构建方法，其特征在于：核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了成本低而高效的载体系统及其相应的转基因方法来建立转基因细胞系，并通...
- 陈波马峰周涯
- 文献传递
- 人脑类器官来源间充质干细胞促进脐带血造血干祖细胞向巨噬细胞分化和功能极化
- 2022年
- 本文探讨了人脑类器官来源神经源性间充质干细胞(neural mesenchymal stem cells,nMSCs)对脐带血来源CD34(umbilical cord blood CD34,UCB-CD34)细胞向各系分化的作用,尤其是对巨噬细胞(macrophage,Mφ)诱导分化和极化的影响。本文通过UCB-CD34细胞与H1-nMSCs或hi PSC-nMSCs贴壁共培养,无MSCs组作为对照(control),计数共培养组和对照组造血细胞集落数、对集落细胞进行MGG染色、流式检测Mφ相关表面分子、转录组测序检测共培养7 d后CD34细胞红系和髓系基因表达的差异。将nMSCs通过trans-well与UCB-CD34来源的Mφ(UCB-Mφ)共培养,经IL-4刺激后,流式检测Mφ表面分子CD206的表达情况,并用U-PLEX平台测定培养基上清中IL-10的浓度。相较于对照组,UCB-CD34细胞分别与H1-nMSCs、hi PSC-nMSCs共培养时可获得更多的造血细胞集落(P<0.05)以及更多的M集落(P<0.01);UCB-CD34细胞分别与H1-nMSCs、hi PSC-nMSCs共培养第7天,可产生更多GMP细胞,而CFU-E产量减少。UCB-CD34细胞分别与H1-nMSCs、hi PSC-nMSCs在Mφ诱导分化培养基或无细胞因子分化培养基中共培养21 d后,均可获得更高比例和数量的Mφ。共培养7 d后CD34细胞转录组测序显示,与H1-nMSCs、hi PSC-nMSCs共培养组高表达GMP相关基因:NAPSB、HCK、FCGR1A、MS4A6A、PRTN3等和Mφ相关基因CD14、CSF1R、TRIB1和APP等;与nMSCs共培养组的UCB-Mφ在IL-4刺激时,高表达CD206表面标记分子,且分泌更多IL-10,即向M2型极化。本研究初步证明,H1-nMSCs、hi PSC-nMSCs能较好地促进UCB-CD34向Mφ分化及向M2型极化。
- 蔡信平周涯张秀秀潘旭李晓红赖默温张勇刚马峰
- 关键词：脐带血造血干细胞间充质干细胞
- GATA1s敲除hPSCs模型构建与造血分化影响初探
- 2023年
- 本文建立了GATA1s敲除人多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)细胞株,并以此为模型探讨了GATA1s缺失对体外诱导造血分化的影响。本文通过构建含有重组臂-敲入片段(GATA1外显子Ⅱ-Ⅵ序列及BGH polyA序列)-LoxP-潮霉素筛选标记-LoxP-重组臂的打靶质粒和含有gRNA-Cas9的gRNA质粒对hPSCs进行基因编辑以敲除GATA1s。通过第一步电穿孔将以上质粒导入细胞,潮霉素初步筛选7 d后的阳性克隆进行下一步电穿孔环化重组酶(Cre)使LoxP位点特异性重组以去除筛选标记,通过单细胞克隆的方式进一步培养,PCR及测序鉴定出正确基因编辑细胞,最后通过蛋白质免疫印迹验证其GATA1与GATA1s蛋白的表达情况,验证敲除GATA1s后的细胞株进行体外诱导造血分化,发现其CD34^(+)、CD43^(+)及CD45^(+)细胞增多,但GPA^(+)、CD41a^(+)及CD42b^(+)细胞显著减少,通过转座子系统过表达GATA1也不能挽救其减少的GPA^(+)、CD41a^(+)及CD42b^(+)细胞。本研究建立了GATA1s敲除hPSCs细胞株,并发现其在造血分化时有重要作用。
- 李霞李晓红周涯马峰张勇刚
- 关键词：多能干细胞造血分化
