王建昌
- 作品数：36 被引量：261H指数：9
- 供职机构：河北出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 鸭短喙——侏儒综合征研究初报被引量：6
- 2016年
- 本文通过病原分离鉴定及动物回归实验,确定了鸭短喙-侏儒综合征病原为鸭细小病毒。
- 袁万哲崔元经美李玉保王建昌张姗陈萍孙继国
- 分子生物学技术在出入境动物检疫中的应用被引量：2
- 2014年
- 分子生物学技术具有简便、高效、准确等优点,可以满足目前出入境检验检疫工作中提出的检得出、检得快、检得准的发展要求,使得分子生物学技术在动物检疫方面的应用越来越广泛。文章根据检疫方法的检测原理,论述了现代分子生物学技术在动物出入境检疫中的研究和应用。
- 王金凤王建昌付琦姜彦芬陈志敏
- 关键词：现代分子生物学技术动物检疫检验检疫工作检疫方法
- 副溶血性弧菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立被引量：1
- 2016年
- 以副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)gyr B基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增(Real-time fluorescence single primer isothermal amplification,实时荧光SPIA)检测副溶血性弧菌的方法。实时荧光SPIA在40 min反应时间内,对3株副溶血性弧菌和16株其他食源性致病菌进行实时荧光SPIA检测,结果表明除3株副溶血性弧菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,实时荧光SPIA检测副溶血性弧菌纯培养DNA的灵敏度为8.2 fg/μL,对副溶血性弧菌菌悬液的检测灵敏度为13.5 CFU/m L;对鳕鱼、海蟹、牡蛎和咸鸭蛋等4种模拟样品中副溶血性弧菌的检出限均为14.7 CFU/g。研究结果表明,实时荧光SPIA检测副溶血性弧菌灵敏度高,特异性强,耗时短,方法简便。
- 王建昌胡连霞段永生李静王金凤
- 关键词：副溶血性弧菌B基因
- 基于内参的大肠埃希氏菌O157∶H7实时荧光定量PCR快速检测方法的建立被引量：8
- 2015年
- 针对大肠埃希氏菌O157∶H7 rfb E和Flic靶基因保守序列,设计特异性引物和探针,优化反应体系,并加入内参(internal amplification control,IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量聚合酶链式反应(polymease chain reaction,PCR)检测方法。结果表明,该方法对E.coli O157∶H7基因组DNA的最低检测限为1 pg/μL;对含有靶基因质粒的最低检测限为103 copies/μL;对细菌的最低检测限为5×103 CFM/m L;Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R2=0.999)。人工污染实验结果表明,在初始菌量为7 CFM/25 g时,采用水洗加试剂盒法提取DNA,E.coli O157∶H7在增菌6 h后即可检出;而采用水煮法提取DNA,则在增菌10 h后方可检出。建立的E.coli O157∶H7实时荧光定量PCR方法,既能有效检测食品中O157∶H7,又能实时监测PCR反应过程,有效防止"假阴性"的发生。
- 王建昌王金凤段永生李静陈志敏陈瑞春
- 关键词：FLIC实时荧光定量PCR内参
- 猪源性bla_(NDM-1)阴性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定被引量：8
- 2015年
- 为了解美国进口种猪人畜共患性致病菌的携带情况,本研究采集种猪新鲜粪便样品,进行常见致病菌的分离。结果在120份样品中分离到1株普罗威登斯菌,命名为HBA13。通过不同选择性培养基、常规生化鉴定及16S rRNA基因序列同源性比对分析,鉴定HBA13为雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)。鉴于雷氏普罗威登斯菌在细菌耐药性方面的重要意义,进行了NDM-1表型检测,并利用PCR方法进行blaNDM-1耐药基因的检测,结果表明所分离雷氏普罗威登斯菌blaNDM-1耐药基因为阴性。猪源性blaNDM-1阴性雷氏普罗威登斯菌的分离,为今后相关研究奠定了基础。
- 王建昌姜彦芬王金凤陈志敏李静
- 关键词：基因
- 鸭肉冒充牛羊肉的分子生物学检测被引量：19
- 2012年
- 针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份送检样品中4份检测到鸭源性成分,2份检测到牛源性成分,1份检测到羊源性成分。实时荧光PCR方法灵敏性更高、特异性更强、结果判定更为迅速。
- 王建昌王金凤陈瑞春田振祥
- 关键词：通用引物实时荧光PCR
- 施马伦贝格病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立及应用
- 2015年
- 依据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因保守序列,设计了特异性引物和MGB荧光探针,建立了SBV实时荧光RT-PCR检测方法,构建标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性等试验评价,并对绵羊和牛全血样品进行了检测。结果表明,所建立的SBV检测方法模板浓度与Ct值呈现良好的线性关系,相关系数R2为0.998;特异性强,仅对SBV RNA出现特异性扩增曲线;灵敏度高,对SBV RNA的检测灵敏度为10copies;重复性好,重复检测灵敏度CV<3%;对临床样品的检测均为SBV阴性。所建立的SBV实时荧光RT-PCR方法可以为SBV的诊断和流行病学调查提供一种快速、特异、敏感的检测手段。
- 王建昌王金凤段永生张永宁李静
- 关键词：施马伦贝格病毒S基因
- 入境旅客非法携带番石榴中实蝇幼虫的分子鉴定被引量：1
- 2014年
- [目的]探索DNA条形码技术在实蝇快速鉴定中的应用。[方法]利用DNA条形码技术和BOLD系统,选取线粒体细胞色素氧化酶I(COI)基因片段,针对截获入境旅客非法携带的番石榴中实蝇幼虫进行序列测定、比对和分析,并对培养后的成虫进行形态学分类从而验证分子分类的结果。[结果]检测的11头实蝇幼虫全部鉴定为橘小实蝇[Bactrocera dorsalis(Hendel)]。[结论]为河北出入境检疫部门初步探索DNA条形码技术在实蝇快速鉴定中的应用及提升检疫工作的时效性奠定了技术基础。
- 李静王珅王建昌张毅邓宏飞王金凤
- 关键词：实蝇DNA条形码COI基因分子鉴定
- 2013～2014年河北进口皮张截获外来有害生物的疫情分析及应对被引量：2
- 2015年
- 系统分析了2013 ～2014年河北进境皮张中外来有害生物截获情况.结果表明,共截获有害生物163批次,其中检疫性杂草2批,均为意大利苍耳.按照来源国家统计,从来自21个国家的皮张中均截获到有害生物,其中以澳大利亚截获批次和种类最多.河北进境皮张携带外来有害生物的风险较大,应加强进境皮张检疫力度,提升外来有害生物截获和物种鉴定水平等检疫措施,以有效防止外来有害生物侵入我国.
- 王建昌高瑞清张帅王珅王照华
- 关键词：外来有害生物检疫措施
- 河北进境种用动物衣原体血清学检测
- 2012年
- 衣原体病是一种重要的人畜共患病,给养殖业带来巨大的经济损失,同时严重威胁从业人员的身体健康。本研究对河北辖区引进的2批种鸡、2批种鸭及2批种猪进行抽样,使用间接血凝试验(IHA)检测引进种用动物的衣原体抗体。结果表明:衣原体IHA抗体阳性率为15.7%。在种鸡、种鸭和种猪中均检测到衣原体IHA抗体,阳性率分别为18.1%、4.2%和20%。这说明在引进种用动物中存在着较高的衣原体抗体阳性率,需要加强对该病的检测。
- 王建昌付琦王金凤田振祥
- 关键词：衣原体间接血凝试验
