孙巧
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：武汉轻工大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 茯苓遗传多样性和转化技术的研究
- 茯苓是我国传统的药食兼用的中药材,在中国已有多年的药用历史。目前我国茯苓药材主要依靠人工种植,存在的主要问题是菌种质量参次不齐及菌种老化,严重制约了茯苓的规模化种植。本课题选取茯苓主产区的个菌株,运用现代分子生物学技术及...
- 孙巧
- 关键词：茯苓生物学特性分子标记
- 文献传递
- 竹节参皂苷Ⅴ对PC-12细胞损伤的修复作用被引量：2
- 2015年
- 目的 观察竹节参皂苷Ⅴ对损伤的PC-12细胞的修复作用以及对淀粉样前体蛋白样蛋白-1（APLP-1）和去整合素-金属蛋白酶-17（ADAM-17）基因表达的影响.方法 利用β-淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）诱导制备PC-12细胞损伤模型,噻唑蓝（MTT）法测定竹节参皂苷Ⅴ对受损PC-12细胞增殖活力的恢复作用,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定竹节参皂苷Ⅴ对PC-12细胞中APLP-1、ADAM-17基因表达的影响.结果 终质量浓度为15 μmol/L的Aβ25-35在作用于PC-12细胞12、24、48 h时,对细胞增殖的抑制率分别为13.15％、22.80％和9.80％,与空白组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.在Aβ25-35诱导的细胞损伤模型（24h）的基础上,竹节参皂苷Ⅴ作用6、12、18、24h时PC-12细胞的增殖率与模型组比较分别增高5.53％、7.74％ （P＜0.05）、9.60％（P＜0.01）和2.07％.模型组中PC-12细胞中APLP-1基因的相对表达量较空白组明显上调,ADAM-17基因的相对表达量则明显下调;竹节参皂苷Ⅴ给药组中APLP-1基因的相对表达量相对模型组明显下调,而ADAM-17基因明显上调.结论 竹节参皂苷Ⅴ对Aβ25-35诱导损伤的PC-12细胞有修复作用,推测是通过下调APLP-1的相对表达量,使淀粉样前体蛋白（APP）低量表达,并上调ADAM-17基因的相对表达量,使APP朝着非Aβ生成途径降解的方式来修复损伤的PC-12细胞.
- 陈玲宋佳孙巧彭维恒黄徐英任立权陈继革
- 关键词：PC-12细胞基因表达
- 珍稀药用植物竹节参SRAP-PCR反应体系的构建与优化被引量：1
- 2015年
- 人参属重要的药用植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey)野生资源已近濒危,开展其遗传多样性研究对于资源保护和可持续利用具有重要意义。研究构建并优化了竹节参DNA的SRAP-PCR扩增体系。以竹节参根茎为材料,对PCR反应体系中的d NTPs、DNA模板、引物、Taq DNA聚合酶浓度和复性第二阶段的退火温度等条件进行探索和研究,得到了能稳定扩增竹节参基因组的最佳反应体系(25μl):DNA 40ng,d NTPs 0.2 mmol/L,Primer 0.36μmol/L,10×PCR Buffer 2.5 ul,Taq DNA polymerase 2U,退火温度50℃。进一步检测了随机组合的24对引物,进行扩增,得到了2对带型清楚、重复性较好的引物Me1/Em5和Me3/Em1。以这2对引物对10个不同产地竹节参DNA样品进行SRAP-PCR扩增。产物的电泳图谱表明,竹节参不同产地的DNA谱带多态性丰富,带型清晰,重复性好。说明建立的该SRAP-PCR反应体系稳定可靠,为利用SRAP分子标记技术研究竹节参的植物遗传多样性奠定了工作基础。
- 宋佳张绍鹏孙巧李天佩曾万勇陈平
- 关键词：竹节参SRAP-PCR反应体系
