宋佳
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：武汉轻工大学更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生经济管理更多>>
- 竹节参根状茎总RNA提取方法的研究与优化被引量：3
- 2015年
- 针对竹节参根状茎质地坚硬、植物纤维多,富含多糖、酚类、蛋白质及其他多种次生代谢产物的特点,研究竹节参根状茎总RNA提取方法。分别运用Trizol法、Total RNA Kit植物提取试剂法、CTAB法进行总RNA的提取。借鉴人参根组织RNA的提取经验,根据竹节参的自身特点,有针对性的对CTAB法和Trizol法进行了优化,样品裂解后中加入PVPP(聚乙烯聚吡咯烷酮)和B-巯基乙醇去除酚类,并加入乙酸钠营造出高浓度钠离子环境去除多糖,之后再加入70%高氯酸钠溶液去除蛋白质,并对提取的总RNA进行电泳和OD值检测与分析。优化后的3种方法进行对比发现,对于竹节参总RNA的提取效果有较大差异,其中优化的Trizol法提取的RNA电泳28S、18S条带清晰,比值约为2:1,经紫外光谱分析OD260/OD280比值为1.93,OD260/OD230比值为2.07,获得了纯度高、完整性好的总RNA。进一步以优化的Trizol法提取所得RNA为模版进行反转录,并做RT-PCR,结果表明,RT-PCR的带型特异稳定,优化方法提取的总RNA质量稳定可靠,适用于基因表达等后续分子生物学研究。优化的Trizol法是一种适合于竹节参根状茎总RNA抽提的简单快速有效的方法。
- 吴亚运张绍鹏赵小龙宋佳陈平
- 关键词：竹节参RNA提取RT-PCR根状茎多酚
- 竹节参皂苷Ⅴ对PC-12细胞损伤的修复作用被引量：2
- 2015年
- 目的 观察竹节参皂苷Ⅴ对损伤的PC-12细胞的修复作用以及对淀粉样前体蛋白样蛋白-1（APLP-1）和去整合素-金属蛋白酶-17（ADAM-17）基因表达的影响.方法 利用β-淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）诱导制备PC-12细胞损伤模型,噻唑蓝（MTT）法测定竹节参皂苷Ⅴ对受损PC-12细胞增殖活力的恢复作用,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定竹节参皂苷Ⅴ对PC-12细胞中APLP-1、ADAM-17基因表达的影响.结果 终质量浓度为15 μmol/L的Aβ25-35在作用于PC-12细胞12、24、48 h时,对细胞增殖的抑制率分别为13.15％、22.80％和9.80％,与空白组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.在Aβ25-35诱导的细胞损伤模型（24h）的基础上,竹节参皂苷Ⅴ作用6、12、18、24h时PC-12细胞的增殖率与模型组比较分别增高5.53％、7.74％ （P＜0.05）、9.60％（P＜0.01）和2.07％.模型组中PC-12细胞中APLP-1基因的相对表达量较空白组明显上调,ADAM-17基因的相对表达量则明显下调;竹节参皂苷Ⅴ给药组中APLP-1基因的相对表达量相对模型组明显下调,而ADAM-17基因明显上调.结论 竹节参皂苷Ⅴ对Aβ25-35诱导损伤的PC-12细胞有修复作用,推测是通过下调APLP-1的相对表达量,使淀粉样前体蛋白（APP）低量表达,并上调ADAM-17基因的相对表达量,使APP朝着非Aβ生成途径降解的方式来修复损伤的PC-12细胞.
- 陈玲宋佳孙巧彭维恒黄徐英任立权陈继革
- 关键词：PC-12细胞基因表达
- 竹节参的遗传多样性及活性评价研究
- 竹节参Panax japonicus C.A.Mey是人参属重要的药用植物之一,目前其药用资源呈濒危状态,人工栽培研究正系统化、规模化开展,其种质资源的遗传多样性研究具有十分重要的意义。本课题在前期竹节参转录组测序研究的...
- 宋佳
- 关键词：竹节参基因表达细胞修复抗氧化活性
- 文献传递
- 我国玉米进口激增的原因、影响及对策研究
- 近年来,我国玉米种植面积和产量持续增长,但是在产量增加的同时,玉米进口量和库存量也在持续增加,即在我国玉米产能过剩的同时,每年仍从国际市场进口大量的玉米。此种现象的出现不仅仅会对农民收益造成损害,更有可能造成国内玉米市场...
- 宋佳
- 关键词：玉米
- 文献传递
- 珍稀药用植物竹节参SRAP-PCR反应体系的构建与优化被引量：1
- 2015年
- 人参属重要的药用植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey)野生资源已近濒危,开展其遗传多样性研究对于资源保护和可持续利用具有重要意义。研究构建并优化了竹节参DNA的SRAP-PCR扩增体系。以竹节参根茎为材料,对PCR反应体系中的d NTPs、DNA模板、引物、Taq DNA聚合酶浓度和复性第二阶段的退火温度等条件进行探索和研究,得到了能稳定扩增竹节参基因组的最佳反应体系(25μl):DNA 40ng,d NTPs 0.2 mmol/L,Primer 0.36μmol/L,10×PCR Buffer 2.5 ul,Taq DNA polymerase 2U,退火温度50℃。进一步检测了随机组合的24对引物,进行扩增,得到了2对带型清楚、重复性较好的引物Me1/Em5和Me3/Em1。以这2对引物对10个不同产地竹节参DNA样品进行SRAP-PCR扩增。产物的电泳图谱表明,竹节参不同产地的DNA谱带多态性丰富,带型清晰,重复性好。说明建立的该SRAP-PCR反应体系稳定可靠,为利用SRAP分子标记技术研究竹节参的植物遗传多样性奠定了工作基础。
- 宋佳张绍鹏孙巧李天佩曾万勇陈平
- 关键词：竹节参SRAP-PCR反应体系
