胡拥明
- 作品数：11 被引量：34H指数：3
- 供职机构：江南大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 氨基化聚苯乙烯微球的制备及在克伦特罗抗体纯化中的应用
- 2011年
- 进行氨基聚苯乙烯微球制备方法及其应用于克伦特罗抗体纯化的研究。通过分散聚合法制备聚苯乙烯微球,硝基反应成硝基化聚苯乙烯微球,再还原成氨基化微球。并利用电子显微镜及红外光谱仪对微球形态及结构进行表征。成功制备氨基聚苯乙烯微球后,将微球与盐酸克伦特罗分子发生重氮化反应,得到连接克伦特罗分子的微球。将这种微球免疫亲和吸附分离盐酸克伦特罗的抗体。最后将纯化后的抗体通过紫外检测,电泳检测等方法证明所制备的微球用于抗体的纯化可行。
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- 关键词：聚苯乙烯微球盐酸克伦特罗
- 呋喃唑酮人工抗原的制备与鉴定被引量：1
- 2013年
- 为了制备3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)的完全抗原,作者以乙醇肼和碳酸二甲酯为原料,首先合成了3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ),然后通过对醛基苯甲酸对AOZ进行衍生制得3-(4-羧基苯亚甲基)-氨基-2-恶唑烷酮(CPAOZ),以CPAOZ作为半抗原,经水溶性碳化二亚胺法(EDC),缩合酯化法(DCC)和混合酸酐法(MA)法3种方法分别与载体蛋白偶联,合成人工抗原。对于制备产物通过紫外光谱扫描分析进行了鉴定,3种抗原的偶联比率分别为8、12、17。采用3种抗原做为包被原,建立了酶联免疫(ELISA)抑制曲线。结果表明,对AOZ的半数抑制率(IC50)分别为12.9、7.6、1.1 ng/mL。采用混合酸酐法(MA法)制备的包被抗原与抗体具有较好的匹配性。3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ),是硝基呋喃类抗生素呋喃唑酮在动物体内的稳定代谢物,采用本试验制备的抗原,有望获得特异性更好的抗体。
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- 关键词：呋喃唑酮酶联免疫检测抗原抗体
- 食品中苏丹红I酶联免疫检测方法的建立及酶学性质研究被引量：6
- 2013年
- 为了检测食品中非法添加物苏丹红,采用重氮化法合成了2种苏丹红Ⅰ的衍生物,通过液相色谱-质谱（LC/MS）鉴定后,分别将两种衍生物与载体蛋白牛血清白蛋白（BSA）以及卵清蛋白（OVA）偶联制备完全抗原.紫外光谱表征结果证明衍生成功.将制备的BSA络合物做为免疫原免疫兔子,制备了多克隆抗体.采用方阵法确定了抗体和包被抗原的稀释比例.对影响酶免疫检测方法（ELISA）的因素包括包被液,封闭液,样品稀释液,抗体稀释液,反应时间等进行了优化.在最适反应条件下,以苏丹红质量浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标建立了抑制曲线,线性范围为0.3～23.4 ng/mL,苏丹红Ⅰ的半数抑制率（IC50）为3.0 ng/mL,检测限（LOD）为0.1 ng/mL.交叉反应测试表明,与对位红交叉反应率为140％;与苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红G的交叉反应率分别为1.1％,6.85％,6.5％;与苏丹红Ⅳ的交叉反应率＜0.1％.以辣椒粉为样本,在5 ng/g和20 ng/g添加水平下得到回收率分别为90.4％和96.0％,变异系数分别为1.8％和4.9％.
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- 关键词：苏丹红酶免疫测定
- 抗双酚A多克隆抗体的制备
- 2011年
- [目的]制备可以识别双酚A(BPA)的多克隆抗体。[方法]通过双酚酸(DPA)与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)以及卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原DPA-BSA和包被抗原DPA-OVA,以DPA-BSA免疫新西兰大白兔获得抗血清,并采用间接竞争酶联免疫吸附(ELISA)检测方法对抗体进行鉴定。[结果]经紫外光谱分析,DPA-BSA和DPA-OVA制备成功。抗血清效价最高达到1∶256 000,50%抑制率(IC50)达17.2 ng/ml。[结论]该研究为建立双酚A的快速筛选方法奠定了基础。
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- 关键词：双酚A抗血清多克隆抗体ELISA
- 庆大霉素免疫亲和柱的制备及测定被引量：3
- 2009年
- 建立庆大霉素残留的间接竞争ELISA检测方法及其用于样品处理的免疫亲和柱的制备。结果表明:ELISA方法的IC50为3.8ng/ml,线性范围为0.1～25ng/ml(R2=0.99),检测限为0.1ng/ml;用该抗体做的免疫亲和柱使用条件进行了探索,表明当洗脱液为70%甲醇-磷酸盐缓冲液(7:3,V/V),体积为5ml时,可以达到最佳的洗脱;利用庆大霉素标准品建立了HPLC测定的标准曲线,测得吸附率均在90%以上,回收率均在60%以上,可以重复使用大约5次左右,说明该免疫亲和柱的灵敏性和可靠性。
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- 关键词：庆大霉素多克隆抗体免疫亲和柱
- 糖皮质激素ELISA检测方法的建立及群选性抗体的筛选被引量：8
- 2009年
- 设计间接竞争ELISA方法,并优化二抗稀释比、竞争时间、PBS溶液的pH值3个条件参数。优化后的地塞米松、倍他米松、双氟米松3种抗体的间接竞争ELISA曲线的IC50分别为2.66、7.36、6.12ng/ml。通过3种抗体的交叉反应来评估其群选特性。结果表明,地塞米松抗体的群选性最强,对双氟米松的交叉反应率高达120%、倍他米松73%、曲安息龙37%、泼尼松龙21%,而对其他3种内源性类糖皮质激素交叉反应率均小于0.1%,然后地塞米松以0.375、0.75、1.5、3.0ng/g分别添加到鸡肉样本中测定回收率,所得回收率在61.3%～80.3%之间,变异系数小于15%。在实际样本检测中,将ELISA方法的测定结果与LC-MS的结果进行比较,两者具有很好的相关性。
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- 关键词：糖皮质激素酶联免疫吸附测定法选择性
- 生物酶蔬果清洗剂对有机磷农药降解效果的评价被引量：3
- 2011年
- [目的]对市售的生物酶蔬果清洗剂的农药去除效果进行评价。[方法]测定超声辅助和室温处理下,A品牌生物酶蔬果清洗剂对小白菜中有机磷农药的降解情况。并考察A、B 2种生物酶蔬果清洗剂对水生动物生存环境中的敌敌畏降解效果。[结果]生物酶蔬果清洗剂可有效地降解小白菜中的有机磷农药,超声辅助可促进农药的降解。不同的水生生物对有机磷农药的敏感程度有差异,适当使用生物酶可降解水生环境中的有机磷农药。[结论]该研究为开发适合于家庭使用的蔬果清洗试剂和清洗设备提供了依据。
- 屈昌龙匡华胡拥明宋珊珊冀振野胥传来
- 关键词：有机磷农药降解
- 氯霉素免疫检测方法的建立被引量：3
- 2009年
- 采用碳二亚胺法(EDC)和混合酸酐法,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备氯霉素免疫原[CAP-HS-BSA]和包被原(CAP-HS-OVA)。经紫外和变性电泳(SDS-PAGE)鉴定,免疫原与包被原均制备成功,偶联比分别为1:16和1:17。利用免疫原免疫两只新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA检测氯霉素残留的方法。建立的ic-ELISA检测氯霉素方法的半数抑制浓度(IC50)为7.275ng/ml,通过对氯霉素琥珀酸钠和链霉素、青霉素及庆大霉素的交叉反应率的测定,结果显示抗体对氯霉素琥珀酸钠有较高的交叉反应率而对链霉素、青霉素和庆大霉素的交叉反应率均小于0.1%。
- 胡拥明梁沙莉徐丽广陈伟王利兵胥传来
- 关键词：氯霉素
- 糖皮质激素类免疫原的合成与鉴定被引量：1
- 2009年
- 本实验对地塞米松、倍他米松、双氟米松琥珀酸酐化,然后分别与牛血清白蛋白、卵清蛋白偶联,制备三种免疫原和包被原。采用紫外分光光度法来估算几种偶联复合物的偶联比,免疫原的偶联比分别为DEX-BSA:11、BET-BSA:23、FLM-BSA:17。
- 胡拥明袁媛刘丽强陈伟彭池方胥传来
- 关键词：糖皮质激素
- 3种抗糖皮质激素抗体的制备、纯化与鉴定
- 2009年
- 采用活性酯法合成地塞米松(DEX)、倍他米松(BET)、双氟米松(FLM)3种免疫原和包被原,用免疫原分别免疫2只新西兰大白兔,5次免疫后进行采血获得抗血清。用盐析与DEAE-纤维素离子交换联用的方法纯化抗血清,再用间接酶联免疫法测定抗血清的效价,其中较好的抗血清效价分别高达345600、614400、307200,具有较好的亲和性,可以满足抗原抗体反应的动力学要求。
- 边爱刘丽强袁媛胡拥明陈伟彭池方胥传来
- 关键词：糖皮质激素抗体纯化
