张家俊
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：三峡大学仁和医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅自然科学基金宜昌市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Klotho蛋白对高糖作用下人脐静脉血管内皮细胞凋亡和衰老的作用被引量：1
- 2015年
- 目的研究抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)凋亡和衰老的抑制作用及其机制。方法培养HUVECs细胞,设置C组(加同体积PBS培养基)、L组(加含低浓度5.5 mmol/L葡萄糖组培养基)、H组(加含高浓度33.3 mmol/L葡萄糖组培养基)、K1组(加含0.1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组培养基)、K2组(加含1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组培养基)、K3组(加含10μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组培养基),分别处理48 h。SA-β-半乳糖苷酶染色法检测各组HUVECs细胞衰老情况;RT-PCR方法检测各组HUVECs中人端粒酶逆转录酶mRNA的表达情况;流式细胞术检测各组HUVECs的细胞凋亡率;Western-blot法检测各组HUVECs中凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2表达情况。结果与PBS对照组相比,高浓度葡萄糖组中HUVECs细胞中SA-β-半乳糖苷酶染色阳性率显著上升(P<0.05),端粒酶逆转录酶mRNA表达显著下降(P<0.05)。而当不同浓度Klotho蛋白和高糖同时作用HUVECs时,细胞中SA-β-半乳糖苷酶染色阳性率逐渐下降(P<0.05),端粒酶逆转录酶mRNA表达则逐渐上升(P<0.05);高浓度葡萄糖组中HUVECs细胞凋亡率显著上升(P<0.05),抑制凋亡Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05),而促进凋亡Bax、p53蛋白表达显著上升(P<0.05)。不同浓度Klotho蛋白和高糖同时作用HUVECs时,细胞凋亡率逐渐降低(P<0.05),抑制凋亡Bcl-2蛋白表达显著上升(P<0.05),而促进凋亡Bax、p53蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论抗衰老Klotho蛋白能够抑制高糖诱导的HUVECs细胞衰老和凋亡,并通过诱导人端粒酶逆转录酶mRNA、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、p53蛋白表达发挥作用。
- 张军代文静周敬群张家俊曹志刚
- 关键词：KLOTHO蛋白高糖人脐静脉血管内皮细胞衰老凋亡
- 抗衰老Klotho蛋白减轻大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤被引量：11
- 2015年
- 目的:观察抗衰老Klotho蛋白对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用并探讨其作用机制。方法:建立大鼠乳鼠心肌细胞H/R模型,并将心肌细胞分为正常对照组、H/R模型组和不同浓度(0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L)Klotho作用H/R组。观察各组心肌细胞H/R前后搏动频率变化,利用MTT方法检测细胞存活率;测定各组心肌细胞H/R后LDH、CK、AST的漏出量及MDA含量、SOD活性;流式细胞术检测各组心肌细胞的凋亡率;real-time PCR检测各组心肌细胞中内质网应激标记及凋亡相关分子GRP78、CRT和CHOP和caspase-12 mRNA的表达情况;Western blot法检测心肌细胞内内质网应激凋亡蛋白CHOP和caspase-12蛋白表达及Akt磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,H/R模型组中心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著下降,细胞凋亡率显著升高(P<0.05);LDH、CK、AST和MDA含量升高而SOD活性显著降低(P<0.05);GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA表达显著增高(P<0.05);CHOP和caspase-12蛋白表达随之增高而Akt的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。与H/R模型组相比,抗衰老Klotho蛋白作用H/R心肌细胞后,心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著升高,细胞凋亡率逐渐降低(P<0.05),LDH、CK、AST和MDA含量下降而SOD活性显著增高(P<0.05),GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA的表达逐渐降低(P<0.05),CHOP和caspase-12蛋白表达也随之降低,而Akt磷酸化水平显著增加(P<0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升H/R损伤后心肌细胞的存活率,抑制细胞凋亡,通过抵抗氧化应激和过度内质网应激反应发挥作用,并与激活Akt磷酸化有关。
- 张军代文静周敬群张家俊曹志刚
- 关键词：KLOTHO蛋白内质网应激
- 胸腺肽α1和乌司他丁对急性颅脑损伤患者的免疫调理作用被引量：8
- 2016年
- 目的探讨胸腺肽α1和乌司他丁(UTI)对急性颅脑损伤患者的免疫调理作用。方法将50例急性颅脑损伤患者随机分为对照组和治疗组,对照组予以常规治疗方案;治疗组除常规治疗方案外,同时接受胸腺肽α1及UTI免疫调理治疗。另选取25例健康人作为正常组,并于治疗后1、3、7和14 d取血,检测血清中炎症细胞因子[白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、TGF-β_1]和细胞免疫指标[CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD14+单核细胞人白细胞DR抗原(HLA-DR)]的水平。结果在治疗3、7和14 d后,对照组和治疗组血液中IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β_1水平升高,CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+水平降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组血液中IL-6、TNF-α水平降低,IL-10、TGF-β_1水平升高;CD4^+、CD8^+和HLA-DR水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),同时CD4^+/CD8^+水平也不同程度改善。结论胸腺肽α1和UTI对急性颅脑损伤患者有较好的免疫调理作用。
- 向常清贺海波张家俊周敬群尚发军陈玉宏曹志刚阮佼杨维华张波
- 关键词：胸腺肽Α1乌司他丁急性颅脑损伤免疫调理
- 胸腺肽α1及乌司他丁对急性颅脑损伤患者的免疫调理作用
- 向常清曹志刚董九龙张军阮佼张家俊张波易春波代文静周敬群尚发军杨维华
- 宜昌市科技局科技发展项目《胸腺肽α1及乌司他丁对急性颅脑损伤患者的免疫调理作用研究》（No：A09301-31）颅脑损伤是神经外科最常见疾病之一，颅脑损伤患者的病情急且危重，变化迅速，致残率及死亡率较高。颅脑创伤后继发的...
- 关键词：
- 关键词：颅脑损伤胸腺肽Α1乌司他丁免疫调理治疗
- 抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用被引量：8
- 2017年
- 目的:研究抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),设置PBS对照组、5.5 mmol/L葡萄糖组、33.3 mmol/L葡萄糖组、0.1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组、1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组和10μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组。使用MTT法检测各组细胞活力;同时检测各组细胞培养上清中丙二醛(MDA)的含量以及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)含量变化;ELISA检测各组细胞培养液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的浓度变化;Western blot法检测各组细胞中核因子κB(NF-κB)蛋白的表达。结果:与PBS对照组相比,33.3 mmol/L葡萄糖能够显著降低HUVECs的细胞活力,增加细胞中ROS的含量,增加细胞培养上清中LDH活性和MDA含量,降低SOD和GSH的活性,同时降低NO分泌,诱导ET-1、ICAM-1分泌及细胞中NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。不同浓度Klotho蛋白和33.3 mmol/L高糖同时作用HUVECs时,细胞活力逐渐上升,ROS和MDA含量以及LDH活性逐渐下降,SOD和GSH活性则逐渐上升,同时NO分泌增加,ET-1、ICAM-1分泌及NF-κB蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升高糖作用下HUVECs的细胞活力,减少高糖诱导的ROS生成及氧化损伤,恢复HUVECs的正常分泌功能,并通过减少NF-κB蛋白表达发挥抗损伤作用。
- 张军代文静周敬群张家俊曹志刚
- 关键词：高糖KLOTHO蛋白人脐静脉血管内皮细胞
