吴皓
- 作品数：11 被引量：18H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非酒精性脂肪性肝病基因多态性的研究进展被引量：1
- 2015年
- 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)被认为是全世界常见的慢性肝脏疾病之一,其发病率与种族、民族、家族、地区密切相关。近年来NAFLD与基因的关系越来越受到人们的重视,了解国际上影响NAFLD发病的相关基因多态性,对于遏制脂肪肝的发展趋势有着十分重要的意义。从葡萄糖代谢、脂肪酸代谢、氧化应激等相关基因的多态性对NAFLD发病的机制研究作一综述,指出NAFLD是一组遗传-环境-代谢应激相关的疾病。
- 朱端权吴皓龚建平
- 关键词：脂肪肝
- 外源性联合应用EPCs和SDF-1α对大鼠肝移植缺血再灌注的保护作用被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨外源性注射骨髓来源的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)或基质细胞源性因子-1α(stromal derived factor-1 alpha,SDF-1α)或两者联合,比较性评估3种方法对大鼠肝移植术后缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)的影响。方法:LEWIS大鼠骨髓EPCs提取培养,流式表型鉴定,激光共聚焦功能鉴定;建立大鼠原位肝移植模型,随机分为5组:A组(假手术组),B组(手术组),C组(SDF-1α组),D组(EPCs组),E组(SDF-1α+EPCs组);再灌注12 h后处死各组大鼠,免疫组化检测肝组织再生以及肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的表达情况;WB检测肝组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、HGF、转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)蛋白表达;ELISA检测VEGF、HGF、TGF-β表达。结果:LEWIS大鼠骨髓提取的EPCs CD34、CD133的阳性比例分别为78.32%、70.76%,同时具有结合ac-LDL和UEA-1功能的EPCs,阳性率达80%以上;SDF-1α诱导EPCs穿过的细胞数[(79.6±6.3)个]明显高于对照组[(36.2±2.9)个](P=0.000);各组大鼠肝组织中,C、D组肝组织HGF分泌和再生情况免疫评分明显高于A、B组(P=0.000),E组免疫评分明显高于C、D组(P=0.000);各组VEGF、HGF、TGF-β、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达结果,C、D组VEGF、HGF、TGF-β、Bcl-2蛋白表达明显高于A、B组(P=0.000),E组VEGF、HGF、TGF-β蛋白表达明显高于C、D组(P=0.000),而C、D、E组Bcl-2蛋白表达比较差异无统计学意义。B、C、D组Caspase-3蛋白表达明显高于A组(P=0.000),而E组Caspase-3蛋白明显低于C、D组(P=0.000);ELISA结果与Western blot结果一致。结论:外源性联合应用EPCs和SDF-1α能有效保护肝移植缺血再灌注的损伤,诱导肝细胞再生,减少肝细胞凋亡。
- 姜飞吴皓王孟皓曹丁吴涯昆段世刚
- 关键词：内皮祖细胞肝移植
- T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-4在免疫应答中的作用以及与相关疾病的关系被引量：7
- 2016年
- T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子（T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule， TIM）基因是近年来发现的新基因家族，其在调节免疫应答中发挥重要的作用。 TIM-4是TIM家族成员之一，仅表达在巨噬细胞和活化的树突状细胞（ dendritic cell， DC）表面，能够调节T细胞，抑制初始CD4＋T细胞和Th17细胞，增加Th2细胞。 TIM-1与TIM-4相互作用可调节T细胞活化增殖，调节Th1／Th2细胞平衡。此外， TIM-4可与磷脂酰丝氨酸结合，促进巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬作用。已经发现TIM-4的调节异常与自身免疫性疾病、过敏性疾病以及肿瘤等有关。因此，了解TIM-4作用于相关受体的机制，可能为免疫介导性疾病调控治疗提供更多的靶点和途径。
- 吴皓李旭红
- 关键词：TIM-4T细胞激活免疫调节免疫性疾病
- 自噬及其在急性胰腺炎中的研究进展
- 2015年
- 急性胰腺炎是胰酶提前激活造成的胰腺以及周围组织自身消化的一种急性炎症,胰腺腺泡细胞内胰蛋白酶原提前激活和炎症反应的级联效应被认为是导致急性胰腺炎发生、发展的关键机制.而自噬作为Ⅱ型程序性死亡,出现在急性胰腺炎的早期病理过程中,其自噬通路受阻可加重胰腺炎时腺泡细胞的坏死程度.本文主要就自噬的最新研究进展及其在急性胰腺炎发生发展机制中的作用作一综述.
- 吴明兵吴皓龚建平
- 关键词：胰腺炎自噬胰蛋白酶原
- 阻断Kupffer细胞TIM-4功能对小鼠肝移植排斥反应的影响
- 2017年
- 目的探讨阻断Kupffer细胞(KCs)TIM-4功能对诱导小鼠原位肝移植术后免疫耐受的产生以及相关机制的研究。方法建立小鼠原位肝移植急性排斥反应模型,随机分为Sham组、Control mAb组、TIM-4 mAb组,术后组化检测KCs活化,提取KCs,Western blot和PCR检测肝脏TIM-4表达,检测血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素,ELISA检测肝组织匀浆肿瘤坏死因子α、干扰素γ、CC族趋化因子2,激光共聚焦检测KCs TIM-4表达,苏木精伊红染色(HE)染色观察肝组织排斥反应,Western blot检测肿瘤坏死因子α、干扰素γ、CC族趋化因子2、p-P65、p-P38表达,流式检测CD25+Foxp3+T细胞的产生。氯膦酸二钠脂质体(CL)可耗竭肝脏KCs,用CL处理移植模型,HE染色观察肝组织排斥反应。结果肝移植术后KCs的活化随着时间变化逐渐增加,术后1、3、7 d TIM-4蛋白以及m RNA表达水平明显高于Sham组(P<0.05),术后7 d谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、肿瘤坏死因子α、干扰素γ、CC族趋化因子2水平高于Sham组(P<0.05),HE染色TIM-4 mAb组小鼠肝病理改变排斥活动指数平均得分为2.67±0.75,集中于轻度排斥反应,明显低于Control mAb组病理改变排斥活动指数得分8.17±0.69(P<0.05),且TIM-4mAb组小鼠平均存活时间53.8±6.4 d明显长于Control mAb组平均存活时间14.5±2.9 d(P<0.05)。CL处理供体小鼠,HE染色CL+TIM-4 mAb组和CL+Control mAb组病理改变排斥活动指数平均得分分别为8.01±0.64、7.93±0.56,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测TIM-4 mAb组KCs p-P65以及p-P38蛋白,明显低于Control mAb组(P<0.05)。流式示TIM-4 mAb组肝脏i Treg细胞明显增多。结论阻断KCs TIM-4可能通过核转录因子κB以及分裂原激活的蛋白激酶通路减少移植后排斥反应发生,诱导i Treg细胞的生成,致使宿主对移植物产生免疫耐受。
- 李学强李旭宏段世刚徐雪松刘一鸣李金政龚建平吴皓
- 关键词：KUPFFER细胞
- 微小RNA与移植免疫的研究进展
- 2016年
- 微小RNA（miRNA）是一类长19～25个核苷酸的小分子RNA,能与特定的mRNA靶向结合,在转录后水平调控基因表达.越来越多的研究表明,miRNA广泛参与了免疫应答的调控,可以通过靶向免疫系统中关键信号转导分子的表达,在多个环节上参与调控免疫耐受 目前miRNA已经成为一种潜在的生物标志物而广泛运用于肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病以及移植的诊断和预后.如能进一步研究miRNA在移植免疫中的调控机制并确定其靶基因,则有可能成功诱导免疫耐受,进而对器官移植的发展起到巨大的推动作用.
- 游海波吴皓龚建平李旭宏
- 关键词：微RNAS细胞发育器官移植免疫耐受
- 阻断Kupffer细胞IRE1-XBP1通路对大鼠肝移植排斥反应的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨阻断Kupffer细胞IRE-XBP1通路对大鼠原位肝移植排斥反应的作用。方法术前用Gd Cl3处理或未处理建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,未处理大鼠随机数字法分为XBP1-shRNA组(A组),Scrambled-shRNA组(B组),PBS组(C组);处理大鼠随机分为Gd Cl3+XBP1-shRNA组(D组),Gd Cl3+Scrambled-shRNA组(E组),Gd Cl3+PBS组(F组)。未处理组术后检测血清ALT、AST、IFN-γ、IL-10、IL-17的表达水平;RT-PCR检测T-bet、RORγt、IFN-γ、IL-17及IL-10mRNA水平;Western blot检测CD86、CD206、IFN-γ、IL-17及IL-10蛋白表达水平,HE染色观察肝组织结构,根据Banff方案进行RAI评分,各组剩余大鼠观察术后生存率。处理组术后检测IFN-γ、IL-17及IL-10 mRNA以及蛋白表达水平,HE染色观察肝组织结构。结果在未处理组中,与B、C组比较,A组各时间点肝功能指标ALT、AST明显下降(P<0.05),A组血清表达IFN-γ、IL-10明显受到抑制(P<0.05),IL-10的表达水平则呈明显上升趋势(P<0.05),与RT-PCR和Western blot结果趋势相符合,另外A组CD86蛋白表明显下降(P<0.05),而表达CD206上升(P<0.05),T-bet/RORγt mRNA相对表达量也明显下降(P<0.05),B、C组上述指标与A组对比则呈相反趋势,而且B、C组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);A组RAI评分(3.83±0.14),明显低于B、C组RAI评分(9.13±0.20)、(8.95±0.26)(P<0.05),并且A组大鼠的生存时间明显高于B、C组大鼠(P<0.05)。在处理组中,D、E和F组肝脏局部IFN-γ、IL-17、IL-10 mRNA和蛋白表达情况以及病理组织AcR程度比较无统计学上的差异(P>0.05)。结论阻断IRE1-XBP1通路促进了KCs的M1型极化,引起Th1/Th17向Th2/Treg的免疫偏移,在一定程度上减轻了移植肝脏急性排斥反应的程度。
- 王润芝吴皓刘一鸣曹丁吴涯昆李金政龚建平
- 关键词：KUPFFER细胞肝移植急性排斥反应
- 阻断Kupffer细胞的TIM-4蛋白功能对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响被引量：3
- 2019年
- 目的探讨阻断Kupffer细胞(Kupffer cells,KCs)的TIM-4蛋白功能对小鼠肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的影响。方法建立小鼠肝缺血再灌注损伤模型,术后Western blot检测KCs和树突状细胞(dendritic cells,DCs) TIM-4表达,免疫组化检测肝组织TIM-4表达;IR小鼠模型采用随机数字表法分为Sham组(PBS处理)、Ctr Ig组(TIM-4同型对照抗体处理)以及TIM-4 m Ab组(TIM-4抗体处理),术后检测血清肝功、炎症指标、肝组织病理变化、肝细胞凋亡以及NF-κB通路相关蛋白的表达。结果 KCs表达TIM-4蛋白随再灌注时间逐渐增加,然而DCs表达TIM-4不随时间变化;组化结果提示TIM-4主要表达于肝血窦巨噬细胞;与Ctr Ig组比较,TIM-4 m Ab组血清肝功、促炎因子产物水平明显减低,而抗炎因子IL-10以及抗氧化应激产物CAT、SOD逐渐增高,且差异具有统计学意义(P <0. 05);肝组织病理学结果示Ctr Ig组部分炎症细胞浸润,肝血窦轻度充血,TIM-4m Ab组无明显变化;TUNEL结果示,TIM-4 m Ab组凋亡程度明显低于Ctr Ig组,Ctr Ig组和TIM-4 m Ab组细胞早期凋亡程度分别为(25. 56±1. 26)%、(5. 35±0. 33)%,且两组差异具有统计学意义(P <0. 05);阻断KCs TIM-4功能后,KCs TLR4以及下游p-IKKα、p-IκBα、p-p65蛋白表达水平逐渐减低;另外,TPCA-1(IKK-2阻断剂)进行预处理小鼠,进一步验证了阻断KCs TIM-4可通过抑制NF-κB信号通路减轻IRI程度。结论阻断KCs TIM-4的功能能够抑制NF-κB炎症通路的激活,改善IR炎症反应以及肝细胞凋亡,从而对HIRI起到一定的保护作用。
- 刘彦刘彦吴皓龚建平
- 关键词：KUPFFER细胞肝缺血再灌注损伤核转录因子ΚB
- XBP-1活性对小鼠移植皮肤存活率的作用研究被引量：1
- 2019年
- 目的通过小干扰RNA技术抑制小鼠体内X-盒结合蛋白1(XBP-1)表达,探讨其在小鼠皮肤移植后急性排斥反应中的作用及可能机制。方法 BALB/c小鼠及C57BL/6小鼠分别作为供体及受体,建立小鼠皮肤急性排斥反应模型。受体随机分为3组,转染组术后1～7d经尾静脉注入100μg XBP-1-siRNA慢病毒质粒(n=15);对照组以同样方式每日注入同剂量慢病毒载体(n=15);磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=15)注入同等剂量PBS。术后7d取标本及眼球血,观察移植物病理改变及生存率、移植物病理改变;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测移植区及外周血白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)及白细胞介素10(IL-10)的表达水平。结果转染组移植皮肤存活率较空白载体组及对照组有明显改善(P<0.05),呈轻度排斥反应;转染组外周血IFN-γ及IL-6的水平较对照组及PBS组明显下降(P<0.05),而IL-10则显著增高(P<0.05)。结论抑制小鼠体内XBP-1活性可通过调节局部细胞因子表达,从而延缓皮肤移植后急性排斥反应对移植物的破坏。
- 杨正弦吴皓刘一鸣
- 关键词：皮肤移植急性排斥反应白细胞介素10
- 骨髓间充质干细胞表达肿瘤坏死因子刺激蛋白-6对大鼠肝脏移植排斥反应的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）表达肿瘤坏死因子刺激蛋白-6（TSG-6）在大鼠原位肝移植排斥反应的作用。方法Kupffer细胞（KCs）和BMSC分离培养，慢病毒载体（LV3-shTSG-6）感染下捌TSG-6的表达，RT-P衄以及Westernblot检测BMSC的TSG-6mRNA以及蛋白表达情况，KCs与BMSC共培养，检测上清液TNF-α、TSG-6含量；建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型，术后1d、5d、7d处死3只受体，检测血清AST、ALT、TBIL、γ-GGT、TNF-α、IL-6、IL-4含量，RT-PCR以及Westernblot检测肝组织TSG-6mRNA以及蛋白表达情况，苏木精-伊红染色观察肝组织结构，各组剩余大鼠观察术后生存率。结果BMSC慢病毒转染率〉70％；KCs和BMSC共培养，TSG-6-shRNA—BMSC＋KCs组各时间点分泌TSG-6明显低于BMSC＋KCs组和TSG-6-NC—BMSC＋KCs组（P〈0．05），BMSC-4-KCs组和TSG-6-NC—BMSC＋KCs组分泌TNF-α于6h达高峰，12h与6h比较明显降低（P〈0．05），但TSG-6-shRNA—BMSC＋KCs组12h分泌TNF-0【明显高于BMSC＋KCs组和TSG-6-NC—BMSC＋KCs组（P〈0．05）；移植术后，TSG-6-shRNA—BMSC组ALT、AST、TBIL、γ-GGT、TNF-α、IL-6明显高于TSG-6-NC—BMSC组和BMSC组（P〈0．05），与PBS组比较差异无统计学意义；TSG-6-shRNA—BMSC组、TSG-6-NC—BMSC组和BMSC组IL-4明显高于PBS组（P〈0．05），而TSG-6．shRNA-BMSC组IL-4低于TSG-6-NC-BMSC组和BMSC组（P〈0．05）；在肝脏病理中，TSG-6．shRNA-BMSC组与PBS组肝组织排斥反应程度明显较高，Banff评分Ⅱ～Ⅲ级；TSG-6-shRNA-BMSC组与PBS组大鼠肝移植术后存活时间分别为（16．6±4．6）d、（15．4±6．7）d，明显低于TSG-6-NC—BMSC组（69．6±28．1）d和BMSC组（69．2±28．2）d（P〈0．05）。结论BMSC分泌表达TSG-6在-定程度上具有减轻肝移植急性排斥反应的作用。
- 刘勇吴皓曾丁吴涯昆龚建平陈先锋
- 关键词：间质干细胞肿瘤坏死因子类肝移植
