曹艳
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 双抗体夹心ELISA定量检测重组人干扰素αlb方法的建立与评价
- 2012年
- 目的建立双抗体夹心ELISA法定量检测重组人干扰素αlb的方法。方法筛选具有不同抗原结合位点的抗重组人干扰素αlb单克隆抗体，分别作为包被抗体和辣根过氧化酶标记抗体，建立双抗体夹心ELISA法定量检测不同批次重组人干扰索仅1b含量，评价该法的检出限、精确度、重复性、特异性。结果所建立的ELISA最低检出限为10ng／ml，检测线性范围10—100ng／ml，R2=0．992，测定值与实际值偏差〉5％，板间变异系数均小于10％。结论该方法灵敏度高，特异性强，准确性和重复性好，可用于重组人干扰素αlb成品的定量检测。
- 吴美英艾艳萍曹艳吴双牛晓霞程永庆
- 关键词：干扰素Α酶联免疫吸附测定
- 重组人干扰素α_1b层析工艺中内毒素的去除被引量：1
- 2015年
- 目的通过检测评价重组人干扰素α1b各步层析工艺中内毒素的去除情况,为工艺验证提供参考。方法重组人干扰素α1b层析工艺采用DEAE Sepharose FF离子交换层析、单抗Sepharose-4B亲和层析和Sephacry-S100凝胶过滤层析。采用鲎试剂法检测层析各阶段产物中的内毒素含量,计算内毒素去除率。结果每步层析均有去除内毒素的作用,以亲和层析去除内毒素作用最强。最终所得蛋白的内毒素含量降至0.7EU/1mg以下,总去除率达到99.9999%。结论生产重组人干扰素α1b所用分离纯化层析技术在纯化蛋白的同时能有效去除产品中的内毒素,所得最终产品的内毒素含量远低于药典对注射剂的内毒素含量要求。
- 牛晓霞曹艳吴美英
- 关键词：重组人干扰素Α1B柱层析内毒素
- 应用高效液相色谱法定量检测重组人干扰素α1b被引量：2
- 2003年
- 目的 寻找一种快速检测重组人干扰素α1b含量的方法。方法 采用美国Waters 600型高效液相色谱仪,选用Protein-Pak125 7.8mm×300mm柱,以25mmol/L pH7.0磷酸缓冲液为流动相,流速为1ml/min,检测吸收波长为280nm,以外标法按峰面积计算回收率。结果 平均回收率为95％,s=2.9％。结论 高效液相色谱法可以用于检测重组人干扰素α1b的含量,而且灵敏度高,结果准确。
- 吴美英曹艳孙俭波
- 关键词：重组人干扰素Α1B高效液相色谱法干扰素
- 高效液相色谱法测定重组人干扰素α1b滴眼液中苯扎氯铵的含量被引量：5
- 2013年
- 目的采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定重组人干扰素α1b(recombi-nant human interferonα1b,rhIFNα1b)滴眼液中苯扎氯铵(benzalkonium chloride)的含量。方法采用HPLC法测定rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵含量,色谱条件:流动相:乙腈:5 mmol/L醋酸铵[含1%三乙胺,用冰醋酸调节pH值至(5.0±0.2)]体积比为65∶35;流速:1.0 ml/min;检测波长:262 nm;进样量20μl;柱温:室温。对该方法进行验证,并应用该方法检测3批rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵的含量。结果该方法检测苯扎氯铵专属性和系统适应性良好;最低检测限和定量限分别为0.53μg/ml和1.48μg/ml;苯扎氯铵在10～50μg/ml浓度范围内,标准曲线的线性关系良好,R2=0.999 1;连续6次进样,峰面积的RSD=1.78%;苯扎氯铵理论浓度为22、24、26μg/ml的加样回收率平均为97.90%,RSD=0.96%。3批rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵的相对含量分别为19.27、19.89和19.76μg/ml,分别为标示量的96.34%、94.46%和98.80%。结论 HPLC法简便、灵敏、准确,可用于测定rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵的含量。
- 牛晓霞曹艳吴美英
- 关键词：高效液相色谱法重组人干扰素Α1B滴眼液苯扎氯铵
