公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

钴原卟啉上调HO-1表达对脂多糖诱导的小鼠肺组织炎症损伤的影响: 2017年; 【目的】探讨注射钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,Co PP)在内毒素诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠模型中上调血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对小鼠肺组织炎症损伤的影响。【方法】120只16~18 g雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水(normal saline,NS)组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、LPS+NS组以及LPS+钴原卟啉(Co PP)组。采取经腹腔注射LPS(5 mg/kg)法建立实验性ALI模型。LPS+Co PP组及LPS+NS组均在注射LPS造模之前4 h,分别预先经腹腔注射给予Co PP(5 mg/kg)或等体积的无菌NS。在1、3、7天后分别取材,采用HE染色观察肺泡、肺间质炎症浸润情况并进行炎症评分(inflammatory score,IS);采用BCA蛋白定量法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总蛋白含量,ELISA检测BALF及血清中白介素-8(interleukin 8,IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)含量;使用乳酸盐脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒用微板法检测BALF中LDH活性;右肺分别提取总RNA或总蛋白,采用RTPCR联合2-△△Ct计算方法检测评估HO-1 m RNA相对表达量,Western blotting检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)蛋白表达水平。【结果】在第1天,LPS+Co PP组HO-1 m RNA水平均明显高于LPS+NS组(P<0.01),在第3天持续升高(P<0.01),第7天各组无差异。与NS组相比,LPS组及LPS+NS组小鼠第1天的IS、BALF总蛋白含量和LDH活性及BALF和血清中IL-8、MCP-1水平均明显增高;在第3天持续升高,且肺组织MPO蛋白表达量亦增高(P<0.01)。与LPS+NS组相比,LPS+Co PP组小鼠第1天的IS、BALF总蛋白含量、LDH活性及BALF和血清中IL-8水平均降低,在第3天除以上4个指标持续降低外,BALF及血清中MCP-1、肺组织MPO蛋白表达水平也均降低(P<0.01)。【结论】Co PP上调HO-1 m RNA的表达,可能是通过下调炎性趋化因子IL-8和MCP-1的分泌,缓解了肺组织炎症反应,有助于LPS诱导的ALI的修复。; 李鑫向国安苏程程马永强周欣彭守春魏路清姬文婕; 关键词：血红素加氧酶-1 脂多糖钴原卟啉

盐皮质激素受体阻断剂对SiO_2诱导的肺巨噬细胞表型偏移的调节被引量：3: 2016年; 目的:研究盐皮质受体阻断剂螺内酯(spirolactone,SPI)对二氧化硅(SiO_2)诱导的肺巨噬细胞表型偏移的影响。方法:将60只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水(NS)组、SiO_2组、SPI治疗组(SiO_2+SPI组)及溶剂对照组(SiO_2+NS组),经口咽吸入SiO_2悬浊液(40 mg/kg)建立矽肺模型,对照组给予等量生理盐水,SiO_2+SPI组在造模后每天经口灌胃给予SPI(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),SiO_2+NS组以相同方式给予等量生理盐水。造模后3 d、14d、28 d取材,进行肺泡灌洗,取灌洗液细胞进行定量、分类计数及流式细胞术分析,右下肺叶用酶解法制成单细胞悬液行流式细胞术分析。结果:与SiO_2组相比,SPI治疗可以明显降低SiO_2干预后3 d、14 d支气管肺泡灌洗液总细胞数及巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞数。SiO_2干预后14 d、28 d,肺泡巨噬细胞和间质巨噬细胞由M1表型向M2表型偏移,SPI治疗可以有效逆转SiO_2诱导的巨噬细胞表型偏移。结论:SPI可以减轻SiO_2导致的肺泡炎症细胞浸润,可能是通过逆转SiO_2诱导的巨噬细胞表型偏移实现的。; 苏程程张译丹向国安马永强周欣彭守春魏路清姬文婕; 关键词：螺内酯巨噬细胞

不同诱导剂体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网形成效率的比较: 2016年; 目的比较体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成的不同方法。方法采用(0.5、1、5、10)μg/m L脂多糖(LPS)、(10、25、50、80)μmol/L佛波酯(PMA)和(50、100、150)μg/m L二氧化硅(Si O2)处理RAW264.7细胞,在处理后3 h和6 h,采用免疫荧光染色法检测MET的产生,并对其进行半定量分析。结果免疫荧光染色表明MET主要由DNA和组蛋白构成,1μg/m L LPS处理RAW264.7细胞6 h,MET形成百分比为(37.04±10.02)%,明显高于对照组(7.90±2.71)%;80μmol/L的PMA处理细胞后MET形成百分比为(22.40±1.83)%,高于对照组(10.11±1.13)%;各剂量的Si O2诱导MET的量与对照组无明显差异。结论用LPS和PMA均能在体外诱导RAW264.7细胞MET的形成,Si O2诱导不是可行的方法。; 苏程程向国安马永强张译丹周欣彭守春魏路清姬文婕; 关键词：RAW264.7细胞脂多糖

基于5-乙炔基-2'-脱氧尿苷渗入法的不同细胞增殖检测方法比较被引量：3: 2016年; 【目的】基于5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,Ed U)掺入法,比较利用荧光成像和流式细胞术检测细胞增殖的两种方法。【方法】细胞株采用小鼠巨噬细胞系RAW264.7,在六孔细胞培养板中用盖玻片爬片,Ed U标记后,细胞爬片用荧光成像法,其余细胞用流式细胞术分别检测细胞增殖率。应用Bland-Altman法检测两种方法测量细胞增殖率的一致性,组内相关系数(interclass correlation coefficient,ICC)检测两种方法的重复性。【结果】荧光显微镜下观察呈现明亮绿色荧光的细胞为Ed U标记的处于增殖状态的RAW264.7细胞,其余无绿色荧光的为非增殖期细胞。荧光成像半定量分析的结果显示,约(46.75±16.87)%的细胞处于增殖期;流式细胞术定量结果显示(49.50±3.74)%的细胞处于增殖期,与荧光成像半定量结果比较,未见统计学显著性(P=0.4120)。Bland-Altman一致性检验表明,96.30%的点落在95%一致性区间内,偏倚为-2.750;重复性检测表明荧光成像法所得细胞增殖率的组内相关系数为0.562,小于0.75;流式细胞术所得细胞增殖率的组内相关系数为0.869,大于0.75。【结论】荧光成像法和流式细胞术分析均可用于Ed U标记法检测细胞增殖,与荧光成像相比,流式细胞术分析法操作简便、重复性好。; 苏程程向国安马永强周欣彭守春魏路清姬文婕; 关键词：细胞增殖流式细胞术

ATP清除剂三磷酸腺苷双磷酸酶对实验性矽肺的干预作用被引量：6: 2016年; 目的:观察三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase,Apy)对实验性矽肺小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法:160只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、矽肺组、Apy组及溶剂组,采用经口咽吸入法给予Si O2悬浊液(50 mg/kg)建立小鼠实验性矽肺模型,对照组给予等量生理盐水。Apy组在造模的同时及造模后4 h采用经口咽吸入法给予Apy(40 mg/kg),溶剂组给予等体积的无菌生理盐水。分别于术后3 h、7 d、14 d和28 d处死小鼠,计算各组小鼠肺指数,采用生物发光法检测小鼠肺组织的ATP含量,采用HE染色和苦味酸-天狼星红染色观察肺组织的病理学变化,采用real-time PCR法检测各组肺组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达水平,采用ELISA法测定肺泡灌洗液TGF-β1的蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组和溶剂对照组小鼠的肺指数和胶原含量明显升高,证明矽肺模型制备成功。Apy组与溶剂组相比,肺组织的ATP含量下降,肺组织炎症表现明显减轻,炎症评分显著下降;同时肺指数、胶原容积分数及ColⅠ和ColⅢ的mRNA表达水平均显著下降。Apy可以明显下调肺组织中TGF-β1的mRNA表达水平和肺泡灌洗液中TGF-β1蛋白表达水平。结论:Apy可以明显减轻实验性矽肺小鼠肺组织的炎症反应和纤维化,该作用可能与Apy减少肺组织ATP的浓度、下调TGF-β1的表达有关。; 苏程程向国安马永强周欣彭守春魏路清姬文婕; 关键词：矽肺转化生长因子Β1

石英诱导小鼠矽肺模型中循环单核细胞亚群的动态变化及意义被引量：4: 2016年; 目的矽肺是一种以肺纤维化为病理特征的疾病,其发病机制仍不完全清楚,外周血单核细胞表型偏移失衡在肺纤维化病理进展中发挥着重要作用。文中旨在研究石英诱导小鼠矽肺（pneumosilicosis）模型中循环单核细胞亚群在不同病理阶段的变化特点,探讨其动态变化与肺炎症损伤和纤维化的关系。方法 100只雄性C57BL/6小鼠（18～22 g）随机数字表法分为等渗盐水组和石英组,石英组滴注吸入40 m L石英混悬液（100 mg/kg）,等渗盐水组滴注吸入相同体积无菌等渗盐水。经术后第1、3、7、14和28天应用流式细胞术检测循环单核细胞亚群变化;常规支气管肺泡灌洗术后进行炎症细胞分类计数;HE染色和苦味酸天狼星红染色检测小鼠肺组织炎症评分及胶原容积分数。结果病理染色显示,造模后第7天,小鼠肺组织可见明显的矽结节;与等渗盐水组相比,石英组小鼠肺组织炎症评分、胶原容积分数显著升高[（1.400±0.089）vs（0.920±0.049）、（1.950±0.065）vs（0.525±0.048）,P〈0.01],并持续到第28天[（1.520±0.136）vs（0.800±0.089）,（5.300±0.776）vs（0.850±0.050）,P〈0.01];与相应时间点等渗盐水组比较,石英组BAFL细胞总数于第1天开始升高[（7.693±2.495）vs（2.008±0.901）,P〈0.01],在第3天达到高峰[（13.346±3.563）vs（1.044±0.695）],随后第7、14、28天呈现递减趋势,但仍都高于等渗盐水组（P〈0.01）;石英组BALF巨噬细胞绝对值在第3天时显著高于等渗盐水组（6.821±2.627 vs 0.980±0.663,P〈0.01）,并在第7天维持于高水平状态[（6.697±1.864）vs（1.225±0.601）,P〈0.01],后呈下降趋势,但第14及28天巨噬细胞绝对值仍高于等渗盐水组（P〈0.01）;石英组BALF中性粒细胞绝对值在第1、3、7及14天都显著高于等渗盐水组（P〈0.01）,且呈现出逐渐下降的趋势,在第28天与等渗盐水组差异无统计学意义（P〉0.05）。石英组小鼠Ly6Chi�; 向国安苏程程张译丹马永强周欣林志春彭守春魏路清姬文婕; 关键词：矽肺单核细胞石英

盐皮质激素受体在实验性肺纤维化小鼠中的动态变化及意义: 2015年; 【目的】探讨盐酸平阳霉素诱导的实验性肺纤维化小鼠肺组织中，盐皮质激素受体（mineralocorticoidreceptor，MR）的动态变化及意义。【方法】C57BL／6小鼠随机分为生理盐水组和盐酸平阳霉素组，气管内一次性滴注盐酸平阳霉素溶液（2．5mg／kg）建立小鼠肺纤维化模型，分别于术后12h、1d、2d、3d、7d、14d、28d取材，采用HE染色、Masson染色方法观察肺组织病理学变化及胶原沉积情况，采用Real—timePCR和Westernblotting法分别检测各组肺组织中MRmRNA和蛋白的表达水平。【结果】病理学结果显示，与生理盐水组相比，盐酸平阳霉素组小鼠在1～7d呈现明显的肺泡炎性改变，术后14d开始出现明显的胶原沉积。实时定量PCR结果显示盐酸平阳霉素组小鼠肺组织中MRmRNA表达水平在急性炎症期12h（6．23±0．89）、1d（5．67±0．92）、2d（3．87±0．63）、3d（3．12±0．37）升高，明显高于生理盐水组，差异均有统计学意义（P〈0．05），随后逐渐下降，降至最低，与生理盐水组表达水平接近，而后再次升高，在纤维化晚期（28d）（4．25±0．72）明显高于生理盐水组（P〈0．05）；Westernblotting结果显示，MR蛋白表达水平变化趋势与MRmRNA相一致，术后12h（5．62±1．28）、1d（5．27±0．73）、2d（3．88±0．34）、3d（2．99±0．35）也明显高于生理盐水组，在给予盐酸平阳霉素14d后，表达水平降低并与生理盐水组接近，在术后28d（3．92±0．36）又再次高于生理盐水组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。【结论】MR在盐酸平阳霉素诱导肺纤维化过程中呈现明显的动态变化，并可能参与了肺纤维化的发生与进展过程。; 向国安胡道川苏程程陈雪芬马永强周欣林志春彭守春魏路清姬文婕; 关键词：肺纤维化盐皮质激素受体盐酸平阳霉素

干扰P2X_7R基因对RAW264.7细胞增殖和吞噬的影响被引量：4: 2015年; 目的:应用RNA干扰技术抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞P2X7受体(P2X7R)基因的表达,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:用脂质体法将P2X7R shRNA重组质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选后获得稳定干扰细胞株。细胞分为野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(sh P2X7R)组。Real-time PCR法检测细胞中P2X7R mRNA的表达,Western blot检测细胞中P2X7R蛋白的表达;CCK-8方法检测细胞生长活性,5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)掺入实验检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期的分布和吞噬情况。结果:P2X7R shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的P2X7R mRNA和蛋白的表达,抑制率在80%以上。48 h后,sh P2X7R组细胞的生长速度明显高于NC组和WT组(P<0.05),增殖期细胞比例明显升高(P<0.05),说明下调P2X7R基因能明显促进细胞增殖。sh P2X7R组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期的比例明显上升,增殖指数增高(P<0.05)。sh P2X7R组的细胞吞噬活性明显高于NC组(P<0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰P2X7R基因表达的小鼠巨噬细胞株RAW264.7,sh P2X7R能够明显促进RAW264.7细胞的增殖,改变了细胞的吞噬活性。; 苏程程张译丹马永强陈雪芬向国安周欣彭守春林志春魏路清姬文婕; 关键词：P2X7受体 RAW264.7巨噬细胞细胞增殖细胞吞噬

螺内酯对实验性矽肺小鼠的干预研究被引量：3: 2016年; 目的：探讨螺内酯（spirolactone,SPI）在实验性小鼠矽肺病理进展中的作用及机制。方法：将120只雄性C57 BL/6小鼠（18~20 g）随机分为生理盐水组（NS组）、石英组（quartz组）、石英＋生理盐水组（quartz＋NS组）和石英＋螺内酯组（quartz＋SPI组）,经口咽吸入石英混悬液建立实验性小鼠矽肺模型;quartz＋SPI组及quartz＋NS组每天分别经灌胃给予螺内酯10 mg/kg或等体积的生理盐水。术后3 d、14 d和28 d处死小鼠,行常规支气管肺泡灌洗术,回收支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）进行细胞分类和计数;采用ELISA法检测BALF上清中转化生长因子β1（TGF-β1）的含量;采用HE染色、Masson染色和免疫荧光染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度;采用RT-q PCR检测各组肺组织中胶原Ⅰ（Col Ⅰ）、胶原Ⅲ（Col Ⅲ）及TGF-β1的mRNA表达水平。结果：经口咽吸入石英后,小鼠肺组织经历了典型的急性炎症期和纤维化期改变,给予SPI干预后的小鼠肺组织炎症反应程度相比于quartz＋NS组减轻（P〈0.05）。给予螺内酯干预后,在第3天小鼠肺组织TGF-β1的mRNA表达量显著下调（P〈0.01）,BALF中TGF-β1的含量也显著减少（P〈0.01）。到第28天,quartz＋SPI组小鼠肺组织Col Ⅰ、Col Ⅲ的mRNA表达量明显低于quartz＋NS组（P〈0.05）。结论：SPI可能通过调控TGF-β1的mRNA表达,减少TGF-β1蛋白的分泌,从而改善石英导致的早期急性炎症反应,并在纤维化期减轻了Col Ⅰ和Col Ⅲ的mRNA表达,抑制了纤维化的进展。; 向国安苏程程张译丹马永强周欣魏路清姬文婕; 关键词：石英肺纤维化螺内酯转化生长因子Β1

全选清除导出

共1页<1>

向国安

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

向国安

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈