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采后处理对紫色菊花花瓣花青素吸收光谱及抗氧化活性的影响被引量：2: 2012年; 采用32℃烘干、-40℃冻干、-18℃冷冻、液氮冷冻后-18℃冷冻、-80℃冷冻和液氮冷冻后-80℃冷冻等方式处理紫色菊花(Dendranthema morifolium Tzvel.)花瓣,考察采后处理方式对紫色菊花花瓣花青素提取液的吸光度和二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)清除能力的影响。结果表明,32℃烘干和-40℃冻干处理后紫色菊花花瓣花青素的紫外吸收峰峰值、可见光吸收峰峰值和DPPH.清除率均极显著高于其他处理;低温冷冻会导致紫色菊花花瓣花青素提取液吸收峰峰值和DPPH.清除率的下降。综合考虑操作流程和生产成本,32℃烘干是最适合紫色菊花花瓣的采后处理方式。; 刘海英郭净净王曼张东玲张倩倩仇金草丁一王佩王苹殷佩齐王莉娜; 关键词：采后处理花青素吸收光谱抗氧化活性

体外诱导骨髓间充质干细胞成肝(样)细胞的研究进展被引量：1: 2015年; 肝病已成为世界上发病率和死亡率最高的疾病之一。目前有望治疗晚期重症肝病的方法有原位肝移植、肝细胞移植、生物人工肝等,但这些方法都面临着肝或肝细胞源紧缺的问题。如何能够获得体外增殖的、可用于移植疗法的肝细胞资源成为研究的要点。骨髓间充质干细胞(BMSCs)既具有自我更新的能力,也具有在合适的微环境里多系横向分化的潜能,在体外可以被诱导分化为肝(样)细胞,理论上可提供丰富的肝细胞,BMSCs成为了细胞治疗的研究热门。我们简要综述了体外诱导BMSCs向肝样细胞(HLCs)分化的研究成果和最新进展,总结了各种诱导方法的优势以及存在的问题,并对该研究领域进行了小结与展望。; 代克强丁一樊晋宇徐存拴; 关键词：骨髓间充质干细胞分化肝样细胞

诱导性多能干细胞与肝样细胞分化被引量：2: 2016年; 肝脏疾病正逐渐成为全球棘手的医疗问题。肝细胞是肝脏生理活动的主要承担者,在肝脏疾病的研究以及药物的研发和测试方面有着举足轻重的作用。然而,体外分离培养的原代肝细胞面临在体外不能无限增殖和稳定表达肝脏特异基因等问题。有强大的自我更新能力和三胚层分化潜能的诱导性多能肝细胞(i PSCs)能被诱导因子、外源基因和小分子化合物等定向诱导分化为功能性肝细胞。同时,还避免了伦理、宗教以及免疫排斥等诸多问题。本文简要综述了从不同策略诱导i PSCs成为功能性肝细胞的研究方法和成果,并对该领域进行小结和展望。; 丁一秦志华徐存拴; 关键词：肝细胞诱导分化

豹蛙抗瘤酶与人血清白蛋白融合蛋白的毕赤酵母高效表达与活性测定被引量：4: 2015年; 豹蛙抗瘤酶(Onconase,ONC),又称豹蛙酶,对多种肿瘤细胞和实体瘤具有显著杀伤作用,为得到高表达的ONC,利用HSA在毕赤酵母系统中的表达优势,将HSA和ONC融合进行毕赤酵母表达并分离纯化。设计融合基因HSA-(Gly4Ser1)3-ONC,简称HSA-ONC,构建至3种表达载体p PIC9、p PIC9K、p PICZα-A并分别转染X-33、GS115和SMD1168 3种宿主菌,在摇瓶和10L规模优化表达条件和双水相偶联柱层析分离纯化目的蛋白并测定其生物学活性。结果显示,在1 L摇瓶规模下,p PICZα-A/X-33/HSA-ONC组合的表达量优于其他组合,且在p H7,温度23℃条件下诱导10 d,表达量达到最高(235 mg/L)。在10 L规模进行不同培养基条件的发酵,r HSA-ONC于p H 7的低盐基础盐培养基(Low salt basic salt mediu m,LS-BSM),甲醇浓度0.25%条件下诱导10 d,表达量达到最高(2.02 g/L)。经双水相萃取偶联DEAE离子交换层析可得到纯度≥95%、收率高于70%的r HSA-ONC。生物活性检测发现,r HSA-ONC在体外能抑制多种癌细胞增殖。r HSA-ONC的表达量较r ONC提高1倍(同等摩尔量情况下),同时在体外抑制多种癌细胞增殖。; 杨刚刚马诚凯史世会张全义王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红丁一徐存拴; 关键词：双水相萃取

人脐带间充质干细胞的分离、培养及其肝细胞生物学特性分析被引量：5: 2015年; 目的:分离、培养人脐带基质来源的间充质干细胞(h UC-MSCs),观察其部分肝细胞生物学特性。方法:利用组织块贴壁培养法从脐带基质中分离培养h UC-MSCs,观察细胞形态,采用细胞免疫荧光法检测表面标记物CD44,通过RT-PCR法检测肝细胞标志基因ALB、CK18、G6P、GLUL、MET、TAT的表达情况,并进行PAS糖原染色。结果:从脐带基质分离出成纤维样细胞形态的h UC-MSCs,CD44表达阳性;RT-PCR结果表明培养的h UC-MSCs表达成熟肝细胞的标志基因ALB、CK18、G6P、GLUL和MET,而不表达TAT,PAS糖原染色呈阳性反应。结论:组织块贴壁培养法可有效获得稳定、均质性良好的h UC-MSCs,其具备部分肝细胞生物学特性。; 李丽丽王巧燕代克强丁一樊晋宇; 关键词：脐带间充质干细胞

5种核碱丙氨酸的合成及其抑制大鼠肝癌细胞RH35增殖的作用机制: 2020年; 目的合成5种核碱丙氨酸,探讨其细胞毒性及机制。方法用丝氨酸-内酯亲核开环方法合成5种核碱丙氨酸,用MTT法检测它们对大鼠正常肝细胞BRL-3A和大鼠肝癌细胞RH35活性的影响,流式细胞术检测它们对上述BLR-3A和RH35细胞周期进程和凋亡的影响,用Real-time PCR检测它们对上述两种细胞增殖/凋亡相关基因表达的影响。结果合成了1-尿嘧啶-L-丙氨酸、1-胸腺嘧啶-L-丙氨酸、1-胞嘧啶-L-丙氨酸、9-腺嘌呤-L-丙氨酸和9-鸟嘌呤-L-丙氨酸等5种核碱丙氨酸。其中,1-胞嘧啶-L-丙氨酸和9-鸟嘌呤-L-丙氨酸对RH35的半数抑制浓度(IC50)值显著低于对BRL-3A的IC50值,它们促进RH35凋亡的作用显著强于对BRL-3A作用,它们促进RH35凋亡相关基因CASP3、CASP9和Bax的表达上调幅度,抑制细胞增殖相关基因CCNA2和PCAN的表达下调幅度和抑制抗凋亡相关基因Bcl-2的表达下调幅度均显著高于对BRL-3A作用。结论1-胞嘧啶-L-丙氨酸和9-鸟嘌呤-L-丙氨酸通过显著抑制RH35增殖相关基因表达,促进凋亡相关基因表达而抑制其活性和促进其凋亡。; 徐存拴宋亚萍许凯杨晖丁一毕晶晶赵茜怡徐霆; 关键词：细胞毒性细胞增殖动力学流式细胞术

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