张继红
- 作品数：18 被引量：11H指数：2
- 供职机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 一种肝特异性游离型表达载体和基因治疗载体及其应用
- 本发明属于表达载体领域，具体涉及一种肝特异性游离型表达载体和基因治疗载体及其应用。该肝特异性游离型表达载体使用肝特异性启动子替换骨架游离表达载体pEMM中的EF‑1α启动子，将增强子序列无缝克隆至所述肝特异性启动子序列的...
- 张继红王天云张俊河王小引米春柳王琳徐婷婷赵凌冉董紫阳刘云霞钱昱如
- PI3K等5条信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调节作用研究
- 2015年
- 为从基因转录水平解析信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调控作用,用小鼠基因表达谱芯片Mouse Genome 4 302.0检测信号通路相关基因表达丰度发现,PI3K,STAT3,钙蛋白酶,Rho家族鸟苷酸激酶和VEGF等5条信号通路的105个基因在该细胞的细胞周期中发生有意义的表达变化.分析基因表达变化预示的信号通路作用表明,上述5条信号通路依次促进G1期、G1/S转换期、S期、G2/M转换期和M期进程.结论:上述5条信号通路促进NIH3T3细胞的细胞周期进程.
- 王一雯王改平耿小芳秦丹张继红和婷婷徐存拴
- 关键词：NIH3T3细胞信号通路基因转录细胞周期
- 豹蛙抗瘤酶的毕赤酵母高效表达、纯化及活性测定被引量：1
- 2015年
- 豹蛙抗瘤酶(Onconase,ranpirnase,ONC)对体内外多种肿瘤有很强的杀伤作用,是当前全球重点研究的100种新药之一,为获得高表达与高活性的重组豹蛙抗瘤酶(Recombination onconase,rONC),根据成熟ONC的cDNA序列和毕赤酵母密码子偏好性设计基因并提高其GC含量,分泌信号肽采用酵母α交配因子的pre肽,分别构建表达载体pPIC9/ONC、pPIC9K/ONC和pPICZα-A/ONC,并转染毕赤酵母X-33、GS115和SMD1168,筛选阳性克隆并进行诱导表达。在摇瓶规模筛选最佳载体-宿主组合及优化培养条件之后,进行10 L规模最优培养基的筛选,发酵产物经双水相萃取偶联G50凝胶层析分离纯化。结果表明,pPICZα-A/X-33/ONC组合表达量优于其他组合,且在p H 5.5、23℃条件下诱导7 d,最高表达量达到13 mg/L;在10 L规模条件下,rONC于pH 5.5的低盐基础培养基(Lower basic salt medium,LBSM)、甲醇浓度0.25%条件下诱导7 d,最高表达量为180 mg/L;纯化后的rONC纯度≥95%,收率高于90%;生物活性检测发现,rONC在体外能杀伤多种癌细胞。初步建立了rONC的高效表达与纯化体系,为后续的功能和作用机理研究奠定了一定基础。
- 杨刚刚马诚凯张全义史世会王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红张瑞刚徐存拴
- 关键词：双水相萃取活性测定
- 微课在组织病理学实验教学中的应用探索
- 2016年
- 微课是一种基于网络化和现代教育技术实现学生为学习的教学模式。在微课模式下,教师已经不仅仅是"传道授业解惑者",还是微课的开发设计者、新教学理念和模式的开拓者、学生学习的引路者。
- 程珊张继红杜娟付洁高福莲
- 关键词：实验教学
- Internet网络安全管理途径探讨
- 2001年
- 任永军郭艳云王振才张继红
- 关键词：网络安全管理加密技术防火墙超级服务器
- 黄精属植物种间蛋白质和蛋白水解酶的分析比较被引量：2
- 2001年
- 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和复性电泳(G-PAGE)技术对五种黄精属植物茎和叶的蛋白谱带和蛋白水解酶谱进行了分析。结果表明:(1)茎和叶的蛋白质和蛋白水解酶种类有很大差异;(2)它们的茎中均含有66.2、54.6、38.5、28、18.6kD蛋白质和肠、55kD的蛋白水解酶;(3)蛋白质和蛋白水解酶可作为黄精属植物的分类依据之一。
- 张为民王育水姬生栋李吉学张继红
- 关键词：分类学黄精属植物蛋白质蛋白酶
- 一种肝特异性游离型表达载体和基因治疗载体及其应用
- 本发明属于表达载体领域，具体涉及一种肝特异性游离型表达载体和基因治疗载体及其应用。该肝特异性游离型表达载体使用肝特异性启动子替换骨架游离表达载体pEMM中的EF‑1α启动子，将增强子序列无缝克隆至所述肝特异性启动子序列的...
- 张继红王天云张俊河王小引米春柳王琳徐婷婷赵凌冉董紫阳刘云霞钱昱如
- MAR介导的逆转录病毒包装细胞系的建立
- 2010年
- 根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染PA317细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,提取病毒液上清,测定逆转录病毒颗粒滴度,逆转录病毒颗粒的最高滴度为1.6×106CFU/mL,成功建立了MAR介导的逆转录病毒包装细胞系。
- 张靖王天云张俊河杨保胜张继红
- 关键词：核基质结合区逆转录病毒载体
- 一种人类及哺乳动物细胞表达载体、表达系统及其构建方法和应用
- 本发明涉及一种人类及哺乳动物细胞表达载体、表达系统及其构建方法和应用。本发明通过在启动子的上游和PolyA的下游插入MAR 1‑68序列，同时，在MAR序列与启动子之间插入一段长度为500bp的间隔子DNA序列，构建获得...
- 张俊河王天云张继红樊振林杨雯雯王小引肖云喜
- 文献传递
- IL-18的毕赤酵母表达及其激活NF-κB和p38途径促进BRL-3A细胞增殖
- 2015年
- 目的：探讨白细胞介素18（IL-18）在毕赤酵母中的表达条件及其对BRL-3A细胞的增殖作用和作用机制.方法：构建表达载体p PIC9K-IL-18,电转化至毕赤酵母GS115,PCR、Western blotting和SDS-PAGE方法鉴定表达产物的正确性,并对发酵条件进行优化,再经双水相萃取偶联DEAE离子交换层析分离纯化表达产物.然后,MTT法检测重组大鼠IL-18（rr IL-18）对BRL-3A细胞的增殖作用,RT-PCR和Western blotting方法检测IL-18信号通路相关基因的表达变化.结果：在3 L发酵罐规模下600的菌体密度、p H=6.0、诱导温度23℃、体积分数分别为20%DO和0.25%甲醇浓度条件下表达质量浓度最高约为280 mg/L,经分离纯化后纯度可达95%.此外,质量浓度为15-20 ng/m L rr IL-18孵育48 h,能明显促进BRL-3A细胞增殖（P〈0.5）,且IL18R、My D88、NF-κB及其下游靶蛋白cyclin B1和cyclin B2的表达量均显著高于对照组（P〈0.5）.同时,p38途径的ATF2及其下游靶蛋白cyclin A2和Bcl-2的表达量也随之升高（P〈0.5）.结论：成功构建大鼠IL-18表达载体,优化在毕赤酵母中的发酵条件和纯化工艺,并首次证实IL-18能通过NF-κB和p38/ATF2途径激活细胞增殖相关靶蛋白cyclin B1、cyclin B2、cyclin A2和Bcl-2,进而促进BRL-3A大鼠肝细胞增殖。
- 张继红许晓亚杨刚刚马诚凯徐存拴
- 关键词：白细胞介素18毕赤酵母双水相萃取细胞增殖
