张宇
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省教育厅科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 日本沼虾表皮几丁质合成酶基因克隆及表达分析被引量：2
- 2015年
- 为了解日本沼虾几丁质合成酶(Chs)基因在蜕皮过程中的作用,本实验采用RACE技术首次从表皮中克隆了几丁质合成酶基因(Mn Chs)c DNA全长,并用生物软件对其序列进行生物信息学分析,RT-PCR技术检测该基因的时空表达模式。结果表明,其c DNA全长5 133bp,5'UTR为283 bp,3'UTR为159 bp,开放阅读框(ORF)长度为4 701 bp,编码1 566个氨基酸,分子量为179.57 ku,理论等电点为6.09,包含2个几丁质合成酶的标签序列EDR和QRRRW及Chitin-synth-C结构域。经BLAST比对,与日本仿长额虾、淡水枝角水蚤Chs相似性分别为89%和63%。RT-PCR结果显示,在蜕皮周期各阶段,不同组织Mn Chs的表达量差异显著:头胸甲在A期达到最高,胃肠在D0和D4期均较高,尾扇和肌肉在D4期最高,肝胰腺则普遍较低。结果表明,Mn Chs基因转录物不仅存在于表皮,在其他组织中也有分布,且mRNA水平的变化与蜕皮周期有关,作为几丁质生物合成的关键酶,推测该基因的表达在新外表皮和内表皮的形成中发挥重要作用。
- 王佩郭爱莲张宇吕艳杰宁黔冀
- 关键词：日本沼虾几丁质合成酶克隆
- KK-42对日本沼虾幼虾蜕皮周期的影响及其可能机制被引量：4
- 2016年
- 为了探索KK-42对日本沼虾幼虾蜕皮周期的影响及其可能的机制,以水产基地自行繁殖的2月龄幼虾（体长1.2~2.0 cm）为材料,捕捞后暂养于流水养殖水槽,水温（26±1）°C,每天投喂2次,1周后用于实验研究。用1.95×10–4 mol/L的KK-42溶液（处理组）或不含KK-42溶液（对照组）浸润1 min,取出,一部分用于幼虾生长速率、蜕皮周期的测定;从剩余部分中选择处于蜕皮间期（C）和蜕皮前期（D）的幼虾,Real-time PCR分析表皮几丁质酶1基因（Mnchi-1）的转录水平,同时进行表皮几丁质酶的活力测定。在实验观察期间,KK-42处理组平均体质量均显著高于对照组,体质量增长率的升高出现在处理后的前2周。随着幼虾的生长,蜕皮周期的持续时间均趋于延长,在4个连续测定的蜕皮周期中,KK-42处理能明显缩短前2个周期的时程,分别从（8.70±1.07）、（9.81±0.43）d/周期缩短为（6.93±0.97）、（8.11±1.20）d/周期。KK-42处理可显著上调C期表皮Mnchi-1的表达,在第3、6和9 h,其m RNA水平比对照组高10倍以上,酶活性同比提高2倍以上;KK-42对D期的影响相对较弱,该基因的表达水平及酶活性仅在12 h显著升高。结果表明,KK-42能显著诱导D期、尤其是C期表皮Mnchi-1基因的表达,提高几丁质酶活性,推测幼虾对旧表皮的分解提前至C期,这可能是KK-42缩短幼虾的蜕皮周期、促进其生长的分子机制之一。
- 关建义吕艳杰张宇宁黔冀
- 关键词：日本沼虾几丁质酶
- 日本沼虾表皮几丁质结合蛋白基因的克隆以及KK-42对其表达的影响被引量：2
- 2016年
- 为探讨KK-42缩短日本沼虾蜕皮周期的可能机制,首次从日本沼虾步足表皮组织克隆了编码几丁质结合蛋白的一个新基因——MnCBP-1部分cDNA序列,对其序列进行生物信息学分析,qRT-PCR技术检测MnCBP-1基因的表达水平以及KK-42的影响.结果表明,MnCBP-1基因部分cDNA序列为1396bp,含有特征性的几丁质结合结构域(chitin-bind-4),经BLAST比对,MnCBP-1与蚤状溞相似性为44%.qRT-PCR结果显示,步足表皮组织内MnCBP-1基因表达量随着蜕皮前期(D0-2)的开始逐渐增多.KK-42处理后,蜕皮间期(C)幼虾内MnCBP-1基因表达水平分别在6、12、24和48h比对照组显著升高,而在D0-2期和D3-4期MnCBP-1基因转录物仅在个别时间点有所增多.研究表明,MnCBP-1基因表达与蜕皮周期有关,KK-42处理可显著诱导MnCBP-1基因表达,且表达的高峰提前至C期,这可能是KK-42缩短蜕皮周期的机制之一.
- 张宇王佩吕艳杰宁黔冀
- 关键词：日本沼虾克隆基因表达
