邓旭东
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 白藜芦醇在烧伤血清诱导的肺微血管内皮细胞凋亡中的作用研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨白藜芦醇在烧伤血清诱导的肺微血管内皮细胞(PMVEC)凋亡中的作用及可能的分子机制。方法 (1)取5只SD大鼠背部于95℃热水浴18 s制成30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,伤后24 h制备烧伤大鼠血清;另取5只SD大鼠不做处理,制备正常大鼠血清。(2)体外组织块法培养大鼠PMVEC,免疫组织化学法鉴定细胞。取第3代对数生长期的细胞分别接种6孔板和12孔板,各板均分为3组(每组设3个复孔):对照组、烧伤血清组、烧伤血清+白藜芦醇组。白藜芦醇在烧伤血清刺激前2 h加入(浓度20μmol/L)。(3)采用铺明胶的Transwell培养细胞后,酶联免疫吸咐法检测单层细胞通透性;采用吖啶橙-溴化乙啶法检测PMVEC的凋亡;RT-PCR检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA水平;Western blot法检测细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表达。结果 (1)原代培养细胞生长较慢,呈铺路石样生长;传代后细胞呈均匀分布生长。细胞凝血因子Ⅷ阳性表达率为(97±3)%,鉴定为PMVEC。(2)培养24 h后,对照组,烧伤血清组,烧伤血清+白藜芦醇组中细胞通透性分别为(87±16)、(220±11)、(131±11)ng/m L(F=207.40,P<0.05),细胞凋亡率分别为(5.2±2.3)%、(22.3±3.7)%、(11.7±2.3)%(F=69.07,P<0.05)。与对照组比较,烧伤血清组单分子层通透性、细胞凋亡率明显增加(t值分别为18.76、10.75,P值均小于0.05);烧伤血清+白藜芦醇组内皮细胞单分子层通透性、细胞凋亡率较烧伤血清组明显减少(t值分别为6.21、5.47,P值均小于0.05)。(3)培养24 h后,对照组,烧伤血清组,烧伤血清+白藜芦醇组TNF-α以及IL-1β的mRNA水平分别为1.0±0.1、3.8±1.3、1.6±0.7(F=22.47,P<0.05);1.0±0.1、3.3±1.5、1.7±0.4(F=13.01,P<0.05);SIRT1以及Cleaved Caspase3的蛋白表达量分别为1.0±0.3、2.8±0.5、3.7±0.6(F=69.99,P<0.05);1.0±0.2、3.3±0.5、1.9±0.6(F=28.78,P<0.05);与对照组比
- 肖厚安周小茜张丽安鸿肇刘晨王煜寇谦邓旭东贾赤宇
- 关键词：烧伤内皮细胞细胞凋亡
